co-ip 问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - co-ip 问题

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相关话题的讨论汇总
话题: ip话题: beads话题: 抗体话题: 问题话题: 6his

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m******t 发帖数: 109	1 我试IP 一个蛋白tagged with 6his，用COBALT BEADS IP的，没用抗体，看它是不是和 SMAD３ BIND 在一起。接果发现空VECTOR 的样本ip 的也有很强的smad3条带，有 CELL LYSATE作为阳性对照。抗体没有任何问题. 各位不吝赐教。怎样肇成的？如何解决？谢先
e****s 发帖数: 1125	2 这应该是pull down 而不是IP. Non-specific binding 很正常，特别是His-tag pulldown 首先看看his蛋白Bait本身结合到beads怎样。其次，如果bait本身信号弱，增加表达量。再次，摸洗涤条件最后一个问题，你怎么洗脱的？【在 m******t 的大作中提到】 : 我试IP 一个蛋白tagged with 6his，用COBALT BEADS IP的，没用抗体，看它是不是和 : SMAD３ BIND 在一起。接果发现空VECTOR 的样本ip 的也有很强的smad3条带，有 : CELL LYSATE作为阳性对照。抗体没有任何问题. 各位不吝赐教。怎样肇成的？如何解 : 决？谢先
s******r 发帖数: 2876	3 ps一下。【在 m******t 的大作中提到】 : 我试IP 一个蛋白tagged with 6his，用COBALT BEADS IP的，没用抗体，看它是不是和 : SMAD３ BIND 在一起。接果发现空VECTOR 的样本ip 的也有很强的smad3条带，有 : CELL LYSATE作为阳性对照。抗体没有任何问题. 各位不吝赐教。怎样肇成的？如何解 : 决？谢先

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