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Biology版 - 有没有方法测组织里的intracellular calcium concentration?
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t******k
发帖数: 5617
1
各种dye似乎都是只能用在体外
T*****e
发帖数: 247
2
你是想要绝对数值还是相对比较?
这些都可以in vivo的用,都是用荧光强度估计Ca2+浓度。都可以实时定量。
GCamP,但给的是相对的范围,多了少了。
或者用Cameleon,这个是基于FRET的,理论上可以估计绝对浓度。
S*****h
发帖数: 21
3
如果你要绝对浓度,ratiometric calcium dye可以preload,不知道你要观察的部位是
否可以就是了。否则表达GCaMP,看相对浓度变化最普遍了。
T*****e
发帖数: 247
4
顶楼上的,cameleon就算是retiometric calcium sensor,这个可以表达在你想要的部
位。稍微小众一点。也没有很多版本。
新的GCamP6用过的大家都说好啊。
j****n
发帖数: 3370
5
那种in vivo genetically encoded biosensor可行不?
t******k
发帖数: 5617
6
谢谢楼上各位!我们的purpose是在一个mouse disease model里去看一个epithelial
organ中epithelial cell的intracellular calcium level的变化。
各位的建议都是用genetically encoded calcium indicators,但查了jackson lab似
乎没有universal 表达这些indicator的strain在卖。
这就需要去买相应的conditional expressing strain再和特定Cre strain cross,需
要周期比较长。
但我现在时间比较紧张,可能来不及重新generate mouse strain,不知道有没有哪些
chemical calcium indicator能作为替代品?

【在 T*****e 的大作中提到】
: 你是想要绝对数值还是相对比较?
: 这些都可以in vivo的用,都是用荧光强度估计Ca2+浓度。都可以实时定量。
: GCamP,但给的是相对的范围,多了少了。
: 或者用Cameleon,这个是基于FRET的,理论上可以估计绝对浓度。

w*****r
发帖数: 2061
7
UPenn Vector有包装好的AAV-GCaMP卖,买了直接感染

【在 t******k 的大作中提到】
: 谢谢楼上各位!我们的purpose是在一个mouse disease model里去看一个epithelial
: organ中epithelial cell的intracellular calcium level的变化。
: 各位的建议都是用genetically encoded calcium indicators,但查了jackson lab似
: 乎没有universal 表达这些indicator的strain在卖。
: 这就需要去买相应的conditional expressing strain再和特定Cre strain cross,需
: 要周期比较长。
: 但我现在时间比较紧张,可能来不及重新generate mouse strain,不知道有没有哪些
: chemical calcium indicator能作为替代品?

t******k
发帖数: 5617
8
谢谢!我去查一下!

【在 w*****r 的大作中提到】
: UPenn Vector有包装好的AAV-GCaMP卖,买了直接感染
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