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Biology版 - 求助: Make humanized mice
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话题: make话题: humanized话题: mice话题: 基因话题: 小鼠
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a****l
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1
准备用crispr技术在小鼠knock in人的基因。请教大牛:donor vector里人的基因仅有
cDNA序列可以吗?需要加polyA signal吗?需要加3’UTR吗?多谢!
v**********m
发帖数: 5516
2
转录翻译机器元件难道不是得在小鼠中有功能的才行?
我觉得看插入的位置,如果该插入点的老鼠基因组中已经有了这些元件,那没必要。如
果没有,转录翻译如何进行?

【在 a****l 的大作中提到】
: 准备用crispr技术在小鼠knock in人的基因。请教大牛:donor vector里人的基因仅有
: cDNA序列可以吗?需要加polyA signal吗?需要加3’UTR吗?多谢!

a****l
发帖数: 8
3
谢谢!是准备插入在小鼠同源基因的ATG之后。小鼠基因自身会因为插入外源基因造成
frame shift。
d******n
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4
双手沾满小鼠的鲜血,还期待小鼠人性?
v**********m
发帖数: 5516
5
大问题不会有,老鼠原蛋白的转录翻译profile应该会继续对插入基因有效。
留着原先老鼠的基因,阅读框内的序列可能太长,用原先的poly A.转录效率可能有些
影响。

【在 a****l 的大作中提到】
: 谢谢!是准备插入在小鼠同源基因的ATG之后。小鼠基因自身会因为插入外源基因造成
: frame shift。

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