D***H 发帖数: 30 | 1 http://www.moley.com/
这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧? |
b******e 发帖数: 244 | 2 完全有希望,而且也是趋势,现在靠培养低层次的从业人员的模式已经破产,以后只需
要设计课题的就可以了,还有的工作是软件设计 |
j****n 发帖数: 3370 | 3 千老也不要太悲观
很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定
如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一 |
s*******e 发帖数: 1389 | 4 杀老鼠如果有可能的话,解剖苍蝇的机器得多贵
这么一想
有个hhmi实验室花5万一年雇一个解剖果蝇成虫盘的Tec真是很便宜
【在 j****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 千老也不要太悲观 : 很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定 : 如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一
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i**********a 发帖数: 1402 | 5 现在还有切胶的吗
【在 j****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 千老也不要太悲观 : 很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定 : 如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一
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j****n 发帖数: 3370 | 6 不切胶怎么做克隆?
真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
直接做基因全合成的不算。。。
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D***H 发帖数: 30 | 7 这个是成本问题
【在 j****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 千老也不要太悲观 : 很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定 : 如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一
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n*******d 发帖数: 41 | 8 大肠菌神教克隆大法:
参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。
将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操
作。然后trans的dh5a转化,
转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组!
然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。
:不切胶怎么做克隆?
:真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题 |
S*********5 发帖数: 237 | 9 I NEED TO TAKE A SHOWER AND BE FRESH.. |
s*********n 发帖数: 34 | 10 这方法成功率怎么样?
【在 n*******d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 大肠菌神教克隆大法: : 参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。 : 将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操 : 作。然后trans的dh5a转化, : 转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组! : 然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。 : : :不切胶怎么做克隆? : :真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
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s*********n 发帖数: 34 | 11 兄弟用哪种高保真酶来保证vector扩增中不引入突变?
【在 n*******d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 大肠菌神教克隆大法: : 参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。 : 将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操 : 作。然后trans的dh5a转化, : 转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组! : 然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。 : : :不切胶怎么做克隆? : :真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
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s******s 发帖数: 13035 | 12 可以条带前面插膜,跑上去洗脱就行了,比切胶方便点
【在 j****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 不切胶怎么做克隆? : 真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题 : 直接做基因全合成的不算。。。
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d******n 发帖数: 3836 | 13 身材不错
【在 D***H 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : http://www.moley.com/ : 这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧?
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j****n 发帖数: 3370 | 14 隔壁实验室也有人这么操作 以前一直觉得大部分cloning host都是recA敲除,重组的
效率会很低
这个最多可以搞几个片段?我们实验室的一般都会有3个及以上片段
另外就是PCR,如果不是单一条带,克隆的准确性有多高?尤其是有好几个片段的情况下
【在 n*******d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 大肠菌神教克隆大法: : 参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。 : 将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操 : 作。然后trans的dh5a转化, : 转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组! : 然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。 : : :不切胶怎么做克隆? : :真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
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j****n 发帖数: 3370 | 15 能否详细介绍下?看看能否高通量的搞。。。
【在 s******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 可以条带前面插膜,跑上去洗脱就行了,比切胶方便点
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n*******d 发帖数: 41 | 16 能p的很亮就基本都能做出来,本教教徒最长插入八九k的片段
可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段
确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采
用trans5a
只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载
体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净
要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以
欢迎入我教自娱自乐
:这方法成功率怎么样?
:【 在 nodvodnod (大肠菌神教) 的大作中提到: 】 |
N*********6 发帖数: 2302 | 17 8,9k片段??
怎么跟神话一样。。。我是totally out of touch 了。。
【在 n*******d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 能p的很亮就基本都能做出来,本教教徒最长插入八九k的片段 : 可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段 : 确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采 : 用trans5a : 只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载 : 体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净 : 要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以 : 欢迎入我教自娱自乐 : : :这方法成功率怎么样?
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n******7 发帖数: 12463 | 18 也不错,蛋糕做大了的话,钱老以后就是现在的PI了
设计解释实验就好 |