j*********g 发帖数: 463 | 1 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。
谢谢! |
D*a 发帖数: 6830 | |
c**i 发帖数: 265 | |
j*********g 发帖数: 463 | 4 需要细胞核,红细胞没有核啊
【在 c**i 的大作中提到】 : 抽血好了,分离红细胞
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v*******e 发帖数: 11604 | 5
那就分离白细胞呗。
或者培养细胞,让它们分裂增殖
【在 j*********g 的大作中提到】 : 需要细胞核,红细胞没有核啊
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D***a 发帖数: 516 | 6 skin fibroblast?
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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j*********g 发帖数: 463 | 7 撕一块皮肤?不符合无创啊
而且之后怎么纯化?
两百万细胞得多大的皮肤?
[在 Daiwa (You know I mean 牙牙牙) 的大作中提到:]
:skin fibroblast? |
D***a 发帖数: 516 | 8 培养扩增啊,2百万也就是10cm dish。
【在 j*********g 的大作中提到】 : 撕一块皮肤?不符合无创啊 : 而且之后怎么纯化? : 两百万细胞得多大的皮肤? : [在 Daiwa (You know I mean 牙牙牙) 的大作中提到:] : :skin fibroblast?
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j****n 发帖数: 3370 | 9 一般实验室不是禁止拿自己或者朋友的细胞做实验的?
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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l******r 发帖数: 18699 | 10 去篮子版找勇士球迷做实验个体
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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s*******g 发帖数: 121 | 11 PBM from 1-2unit blood.
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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z*********g 发帖数: 15 | 12 外周血细胞应该是最容易得到的了吧,然后再purify你要的细胞,比如t细胞 |
A******y 发帖数: 2041 | 13 PBMC. Write an IRB protocol for blood collection and fico isolate the PBMC.
You should get millions from just 5 mL of bloods.
Or you can buy PBMC from many suppliers.
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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b****r 发帖数: 17995 | 14 难道不是买细胞系最合适 293是最常用的,随便一个lab都能借到
外周血白细胞根本不是同一种细胞类型,T B 淋巴细胞,中性粒,嗜酸性 嗜碱性粒细
胞。楼上不少人要补点课
【在 j*********g 的大作中提到】 : 同一个人,大量(>2*10^6)、同一种细胞类型、无创。精子不算。 : 谢谢!
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j*********g 发帖数: 463 | 15 要同一个活人、个体的组织,还得无创。
这就是我问的,要均一的同种细胞类型。
目前看只能抽外周血,然后用MACS的磁珠分离了?
[在 bmwcar (decent) 的大作中提到:]
:难道不是买细胞系最合适 293是最常用的,随便一个lab都能借到
:外周血白细胞根本不是同一种细胞类型,T B 淋巴细胞,中性粒,嗜酸性 嗜碱性粒细
:胞。楼上不少人要补点课 |
l***y 发帖数: 638 | 16 无创还是抽血吧,做biopsy拿fibroblast还是fat cell好像都会留点小疤的,好处是能
扩增
【在 j*********g 的大作中提到】 : 要同一个活人、个体的组织,还得无创。 : 这就是我问的,要均一的同种细胞类型。 : 目前看只能抽外周血,然后用MACS的磁珠分离了? : [在 bmwcar (decent) 的大作中提到:] : :难道不是买细胞系最合适 293是最常用的,随便一个lab都能借到 : :外周血白细胞根本不是同一种细胞类型,T B 淋巴细胞,中性粒,嗜酸性 嗜碱性粒细 : :胞。楼上不少人要补点课
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s*****y 发帖数: 32 | 17 尿液细胞。不过一般50ml尿液也就能拿到几个到几十个克隆。可以传到10^4-10^5。如
果对实验没影响的话,可以过表达SV40 Large T,这样传到10^8也轻轻松松。 |
b****r 发帖数: 17995 | 18 学习了。怎么培养呢,有没有比较好的protocol。这种应该是膀胱上皮细胞?
【在 s*****y 的大作中提到】 : 尿液细胞。不过一般50ml尿液也就能拿到几个到几十个克隆。可以传到10^4-10^5。如 : 果对实验没影响的话,可以过表达SV40 Large T,这样传到10^8也轻轻松松。
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