m*********D 发帖数: 1727 | 1 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养
皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不
纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对
方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣,但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望,觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说:你也好多年没发第一作者的文章了(上次发是2008年,JBC,还好被Faculty
1000选中了),今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错,了结了这个,就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊,看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据,第二轮成功;一个DOD的grant虽然是学生为主,但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的;最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去,并且根据我的方法再提出新的idea后,第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后,文章也发表了,能和
过去十年一样,有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗,把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉(我的细胞靠这个基因才能生长), 先
筛transfected细胞,再用mutant的特性来筛选我要的克隆,成功率很高。挑选出来的
克隆,70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变,1/2是有一个copy
按我设计的突变,另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上,细节我等老板决定是不是发Scientific Data后,再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐! |
s*****i 发帖数: 1781 | 2 恭喜!中秋快乐?
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m****a 发帖数: 270 | 3 恭喜midwestPstD老师!中秋节快乐!
听说过支原体污染,细菌污染,真菌污染,衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 4 谢谢!
【在 s*****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 恭喜!中秋快乐?
|
m*********D 发帖数: 1727 | 5 哈哈,你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma,就是支原体吧。:(。
多谢!
【在 m****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 恭喜midwestPstD老师!中秋节快乐! : 听说过支原体污染,细菌污染,真菌污染,衣原体污染还是第一次听说。
|
G***G 发帖数: 16778 | 6 congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
d********m 发帖数: 3662 | |
c********6 发帖数: 693 | |
s*********y 发帖数: 292 | |
F*****6 发帖数: 30 | 10 恭喜恭喜,的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子,都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc(45左右?),也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc,也在中西部(I am in texas),很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量,但自己的状态的确达不到这样,也常常把实验室和学校的压力带回家
,真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats! |
|
|
m*********r 发帖数: 2456 | |
S**********e 发帖数: 620 | 12 你这完全是走钢丝似的成功,假如没有compound,假如grant得不到,你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况,出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了,没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心,玩古琴,能有这些体会吗?
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c********n 发帖数: 225 | 13 赞!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
e***s 发帖数: 689 | 14 难得有如此之热情,蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
t******k 发帖数: 599 | |
l********7 发帖数: 175 | 16 真心祝福楼主,这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲,新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚,十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。 |
b*****s 发帖数: 3390 | 17 恭喜,正能量
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
O******e 发帖数: 4845 | 18 恭喜,恭喜!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
b*********1 发帖数: 1054 | 19 恭喜恭喜,都是你努力的回报啊,这下放心啦,也可以抽空多钓鱼了:)
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
x*******5 发帖数: 1335 | 20 congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
|
|
t*****t 发帖数: 773 | |
n******7 发帖数: 12463 | |
m*********D 发帖数: 1727 | 23 多谢上面各位同行!这大家心想事成!
回Shangxuanyue:你说的都市大路货,每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词:“你也好多年没发第一作者的文章了(上次发是2008年
,JBC,还好被Faculty 1000选中了)。。。”
回Fan2016:年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移,生活的稳定,担忧
就会少很多。不管你改不改行,personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善,是需要时间和计划的。
回laodao2007:我可能对自己的个性能力比较了解,所以,选择的时候就不会好高骛远
,而是脚踏实地。
回benxiong811:差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了,就房子周围需要
买点top soil垫高一点,解决房子周边的积水问题,然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食,比较肥美,争取搞几十斤过冬。:)。
回nowhere7:要心平气和,还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
,我估计我今天也不会这么从容。 |
d****i 发帖数: 2346 | |
m******g 发帖数: 3924 | |
c******4 发帖数: 4896 | 26 这个才是科研精神!要是社会对这样的人再多点扶持就好了。 |
F*Q 发帖数: 3259 | |
w*****c 发帖数: 7276 | |
a********p 发帖数: 52 | 29 Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
F*Q 发帖数: 3259 | 30 好奇一下,楼主的技术那么牛,为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢? |
|
|
m*********D 发帖数: 1727 | 31 多谢上面几位。大家中秋快乐!
回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处很不愉快,但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就是我一个人干
了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作,还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 好奇一下,楼主的技术那么牛,为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独 : 立呢?
|
F*Q 发帖数: 3259 | 32 明白。做独立研究光技术是不够,不过大部分独立研究的也就是跟风,技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了,见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了,然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐!
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处
很不愉
快,但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就
是我一
个人干
: 了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作,还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢上面几位。大家中秋快乐! : 回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多经验是当年作 : knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处很不愉快,但 : 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所 : 以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从空房间到建立 : 一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就是我一个人干 : 了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作,还 : 要懂为啥这么作。 : 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。 : 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
|
a*********8 发帖数: 2353 | 33 你老板有太幸福了!lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要,lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
M****I 发帖数: 825 | 34 恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c*********r 发帖数: 1312 | |
j**********0 发帖数: 391 | 36 恭喜! 喜欢看你写的帖子,平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
C****Y 发帖数: 4 | |
D*a 发帖数: 6830 | |
s******y 发帖数: 17729 | 39 恭喜兄弟,能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了,现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位,似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 40 多谢多谢上面各位!昨晚回家忙儿子的事,没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了,准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒,正好喝一杯。
回CRESTY:记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
,老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡,经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder,随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢,就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作,我就满足了。所以,还得搞个grant才行。说实话,到我这个年龄,
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利?祝平安! |
|
|
s******y 发帖数: 17729 | 41 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了
。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢多谢上面各位!昨晚回家忙儿子的事,没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春 : 天钓的crappie拿出来了,准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白 : 葡萄酒,正好喝一杯。 : 回CRESTY:记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下 : ,老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡,经常想起来了在他买茶叶的 : 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder,随时可以煮。小气他还真不是。 : 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢,就是20年前也没戏。从没这么指望过。能 : 保证五年的工作,我就满足了。所以,还得搞个grant才行。说实话,到我这个年龄, : 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利?祝平安!
|
v*******e 发帖数: 11604 | |
i*********0 发帖数: 915 | |
O******e 发帖数: 4845 | 44 其实这行,如果博士后1/3可以独立当PI,1/3转title接着干,1/3转行,那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了 : 。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
|
t*******g 发帖数: 452 | |
r****n 发帖数: 300 | 46 congrats
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
s********1 发帖数: 20 | 47 每次看见你的帖子内容,都很畅心,congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c****j 发帖数: 14 | |
e*********6 发帖数: 3453 | 49 楼主这种应该给个永久职位养起来,一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数,还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 50 谢各位!
回snowyday:呵呵,老了,就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了,机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做,然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多,她们也高兴。
回Ericzhang:呵呵,哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系,地球照转。idea多
,也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她,成功的
概率比我的要小很多,还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把,下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来,应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划,把计算机model ing,crispr,protein structure 等等连到一起,很多还需要别
人合作。所以,年轻人都比较有闯劲。 |
|
|
h*******o 发帖数: 4884 | 51 恭喜
虽然现在不做research了,但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。 |
s*****g 发帖数: 7857 | 52 尽管不常来这里,可是看到你的收获,真心替你高兴啊!!!!
谁说千年老伯(博)没有建树?这就是活榜样!干自己喜欢的事情,让别人说去吧!
恭喜!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
s*****g 发帖数: 7857 | 53 最近我的细胞也是有mycoplasma, 用试剂处理后没有了,但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 哈哈,你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma,就是支原体吧。:(。 : 多谢!
|
s*****g 发帖数: 7857 | 54 看到你的成功,我自己也回想一下,真得像你学习。热爱科研,就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文,都是正能量! |
h*******e 发帖数: 142 | |
t*******g 发帖数: 452 | 56 知足常乐,心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了 : 。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
|
m*********D 发帖数: 1727 | 57 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养
皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不
纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对
方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣,但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望,觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说:你也好多年没发第一作者的文章了(上次发是2008年,JBC,还好被Faculty
1000选中了),今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错,了结了这个,就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊,看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据,第二轮成功;一个DOD的grant虽然是学生为主,但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的;最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去,并且根据我的方法再提出新的idea后,第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后,文章也发表了,能和
过去十年一样,有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗,把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉(我的细胞靠这个基因才能生长), 先
筛transfected细胞,再用mutant的特性来筛选我要的克隆,成功率很高。挑选出来的
克隆,70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变,1/2是有一个copy
按我设计的突变,另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上,细节我等老板决定是不是发Scientific Data后,再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐! |
s*****i 发帖数: 1781 | 58 恭喜!中秋快乐?
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m****a 发帖数: 270 | 59 恭喜midwestPstD老师!中秋节快乐!
听说过支原体污染,细菌污染,真菌污染,衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 60 谢谢!
【在 s*****i 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 恭喜!中秋快乐?
|
|
|
m*********D 发帖数: 1727 | 61 哈哈,你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma,就是支原体吧。:(。
多谢!
【在 m****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 恭喜midwestPstD老师!中秋节快乐! : 听说过支原体污染,细菌污染,真菌污染,衣原体污染还是第一次听说。
|
G***G 发帖数: 16778 | 62 congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
d********m 发帖数: 3662 | |
c********6 发帖数: 693 | |
s*********y 发帖数: 292 | |
F*****6 发帖数: 30 | 66 恭喜恭喜,的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子,都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc(45左右?),也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc,也在中西部(I am in texas),很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量,但自己的状态的确达不到这样,也常常把实验室和学校的压力带回家
,真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats! |
m*********r 发帖数: 2456 | |
S**********e 发帖数: 620 | 68 你这完全是走钢丝似的成功,假如没有compound,假如grant得不到,你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况,出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了,没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心,玩古琴,能有这些体会吗?
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c********n 发帖数: 225 | 69 赞!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
e***s 发帖数: 689 | 70 难得有如此之热情,蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
|
|
t******k 发帖数: 599 | |
l********7 发帖数: 175 | 72 真心祝福楼主,这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲,新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚,十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。 |
b*****s 发帖数: 3390 | 73 恭喜,正能量
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
O******e 发帖数: 4845 | 74 恭喜,恭喜!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
b*********1 发帖数: 1054 | 75 恭喜恭喜,都是你努力的回报啊,这下放心啦,也可以抽空多钓鱼了:)
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
x*******5 发帖数: 1335 | 76 congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
t*****t 发帖数: 773 | |
n******7 发帖数: 12463 | |
m*********D 发帖数: 1727 | 79 多谢上面各位同行!这大家心想事成!
回Shangxuanyue:你说的都市大路货,每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词:“你也好多年没发第一作者的文章了(上次发是2008年
,JBC,还好被Faculty 1000选中了)。。。”
回Fan2016:年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移,生活的稳定,担忧
就会少很多。不管你改不改行,personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善,是需要时间和计划的。
回laodao2007:我可能对自己的个性能力比较了解,所以,选择的时候就不会好高骛远
,而是脚踏实地。
回benxiong811:差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了,就房子周围需要
买点top soil垫高一点,解决房子周边的积水问题,然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食,比较肥美,争取搞几十斤过冬。:)。
回nowhere7:要心平气和,还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
,我估计我今天也不会这么从容。 |
d****i 发帖数: 2346 | |
|
|
m******g 发帖数: 3924 | |
c******4 发帖数: 4896 | 82 这个才是科研精神!要是社会对这样的人再多点扶持就好了。 |
F*Q 发帖数: 3259 | |
w*****c 发帖数: 7276 | |
a********p 发帖数: 52 | 85 Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
F*Q 发帖数: 3259 | 86 好奇一下,楼主的技术那么牛,为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢? |
m*********D 发帖数: 1727 | 87 多谢上面几位。大家中秋快乐!
回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处很不愉快,但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就是我一个人干
了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作,还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 好奇一下,楼主的技术那么牛,为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独 : 立呢?
|
F*Q 发帖数: 3259 | 88 明白。做独立研究光技术是不够,不过大部分独立研究的也就是跟风,技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了,见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了,然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐!
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处
很不愉
快,但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就
是我一
个人干
: 了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作,还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢上面几位。大家中秋快乐! : 回FAQ--生物bench就是熟能生巧,没什么牛或者不牛的。我作这个,很多经验是当年作 : knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年,和老板相处很不愉快,但 : 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所 : 以,老板除了手把手教我(我是实验室里唯一能干点事的),我们一起从空房间到建立 : 一个完整的实验室,你想我经历有多少?我比老板还先到位三个月,也就是我一个人干 : 了三个月之后,老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作,还 : 要懂为啥这么作。 : 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。 : 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
|
a*********8 发帖数: 2353 | 89 你老板有太幸福了!lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要,lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
M****I 发帖数: 825 | 90 恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
|
|
c*********r 发帖数: 1312 | |
j**********0 发帖数: 391 | 92 恭喜! 喜欢看你写的帖子,平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
C****Y 发帖数: 4 | |
D*a 发帖数: 6830 | |
s******y 发帖数: 17729 | 95 恭喜兄弟,能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了,现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位,似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 96 多谢多谢上面各位!昨晚回家忙儿子的事,没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了,准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒,正好喝一杯。
回CRESTY:记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
,老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡,经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder,随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢,就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作,我就满足了。所以,还得搞个grant才行。说实话,到我这个年龄,
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利?祝平安! |
s******y 发帖数: 17729 | 97 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了
。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢多谢上面各位!昨晚回家忙儿子的事,没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春 : 天钓的crappie拿出来了,准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白 : 葡萄酒,正好喝一杯。 : 回CRESTY:记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下 : ,老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡,经常想起来了在他买茶叶的 : 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder,随时可以煮。小气他还真不是。 : 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢,就是20年前也没戏。从没这么指望过。能 : 保证五年的工作,我就满足了。所以,还得搞个grant才行。说实话,到我这个年龄, : 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利?祝平安!
|
i*********0 发帖数: 915 | |
O******e 发帖数: 4845 | 99 其实这行,如果博士后1/3可以独立当PI,1/3转title接着干,1/3转行,那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了 : 。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
|
t*******g 发帖数: 452 | |
|
|
r****n 发帖数: 300 | 101 congrats
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
s********1 发帖数: 20 | 102 每次看见你的帖子内容,都很畅心,congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c****j 发帖数: 14 | |
e*********6 发帖数: 3453 | 104 楼主这种应该给个永久职位养起来,一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数,还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
m*********D 发帖数: 1727 | 105 谢各位!
回snowyday:呵呵,老了,就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了,机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做,然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多,她们也高兴。
回Ericzhang:呵呵,哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系,地球照转。idea多
,也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她,成功的
概率比我的要小很多,还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把,下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来,应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划,把计算机model ing,crispr,protein structure 等等连到一起,很多还需要别
人合作。所以,年轻人都比较有闯劲。 |
h*******o 发帖数: 4884 | 106 恭喜
虽然现在不做research了,但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。 |
s*****g 发帖数: 7857 | 107 尽管不常来这里,可是看到你的收获,真心替你高兴啊!!!!
谁说千年老伯(博)没有建树?这就是活榜样!干自己喜欢的事情,让别人说去吧!
恭喜!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
s*****g 发帖数: 7857 | 108 最近我的细胞也是有mycoplasma, 用试剂处理后没有了,但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 哈哈,你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma,就是支原体吧。:(。 : 多谢!
|
s*****g 发帖数: 7857 | 109 看到你的成功,我自己也回想一下,真得像你学习。热爱科研,就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文,都是正能量! |
h*******e 发帖数: 142 | |
|
|
t*******g 发帖数: 452 | 111 知足常乐,心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 你要求真低,看得开,反正孩子也上大学了,无所谓了,估计很多千老就没那么容易了 : 。我还行,拿了几个面试,先试试水。博士后是不做了,不过工钱还领俩月。
|
c****1 发帖数: 1095 | |
f**********s 发帖数: 1415 | 113
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
c****1 发帖数: 1095 | |
f**********s 发帖数: 1415 | 115
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 呵呵,今天收到通知,送Nature子刊的文章终于接受了。 : 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作,到我说服他就好 : 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验,能想到的可能 : 改进成功率的方式都加进去了。几个月后,终于作完了第一轮,还差点就没拿到我要的 : 东西。在显微镜下找得头昏眼花,没结果,给老板打个招呼正准备放弃呢,扔细胞培养 : 皿的那一瞬间,突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下,一个克隆就在培养皿的最边 : 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。 : 这一年来,又是衣原体污染(实验室的host cell line本身就污染了!),又是克隆不 : 纯,搞得好头疼。最后稿子送出去了,作science这边的reviewer对突变子有兴趣,对 : 方法没兴趣,意见一堆;作方法的reviewer对突变子本身没兴趣,对方法上所有改进作
|
W*T 发帖数: 241 | 116 恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了,真心恭喜 |
W*T 发帖数: 241 | 117 恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了,真心恭喜 |