m*********D
发帖数: 1727 | 1 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！ |
s*****i
发帖数: 1781 | 2 恭喜！中秋快乐？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
m****a
发帖数: 270 | 3 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
m*********D
发帖数: 1727 | 4 谢谢！
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
|
m*********D
发帖数: 1727 | 5 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
|
G***G
发帖数: 16778 | 6 congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
d********m
发帖数: 3662 | |
c********6
发帖数: 693 | |
s*********y
发帖数: 292 | |
F*****6
发帖数: 30 | 10 恭喜恭喜，的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！ |
|
|
m*********r
发帖数: 2456 | |
S**********e
发帖数: 620 | 12 你这完全是走钢丝似的成功，假如没有compound，假如grant得不到，你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
c********n
发帖数: 225 | 13 赞！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
e***s
发帖数: 689 | 14 难得有如此之热情，蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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t******k
发帖数: 599 | |
l********7
发帖数: 175 | 16 真心祝福楼主，这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲，新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。 |
b*****s
发帖数: 3390 | 17 恭喜，正能量
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
O******e
发帖数: 4845 | 18 恭喜，恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
b*********1
发帖数: 1054 | 19 恭喜恭喜，都是你努力的回报啊，这下放心啦，也可以抽空多钓鱼了：）
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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x*******5
发帖数: 1335 | 20 congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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|
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t*****t
发帖数: 773 | |
n******7
发帖数: 12463 | |
m*********D
发帖数: 1727 | 23 多谢上面各位同行！这大家心想事成！
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。 |
d****i
发帖数: 2346 | |
m******g
发帖数: 3924 | |
c******4
发帖数: 4896 | 26 这个才是科研精神！要是社会对这样的人再多点扶持就好了。 |
F*Q
发帖数: 3259 | |
w*****c
发帖数: 7276 | |
a********p
发帖数: 52 | 29 Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
F*Q
发帖数: 3259 | 30 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢？ |
|
|
m*********D
发帖数: 1727 | 31 多谢上面几位。大家中秋快乐！
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
|
F*Q
发帖数: 3259 | 32 明白。做独立研究光技术是不够，不过大部分独立研究的也就是跟风，技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
|
a*********8
发帖数: 2353 | 33 你老板有太幸福了！lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要，lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
M****I
发帖数: 825 | 34 恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
c*********r
发帖数: 1312 | |
j**********0
发帖数: 391 | 36 恭喜! 喜欢看你写的帖子，平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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C****Y
发帖数: 4 | |
D*a
发帖数: 6830 | |
s******y
发帖数: 17729 | 39 恭喜兄弟，能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
m*********D
发帖数: 1727 | 40 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！ |
|
|
s******y
发帖数: 17729 | 41 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
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v*******e
发帖数: 11604 | |
i*********0
发帖数: 915 | |
O******e
发帖数: 4845 | 44 其实这行，如果博士后1/3可以独立当PI，1/3转title接着干，1/3转行，那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
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t*******g
发帖数: 452 | |
r****n
发帖数: 300 | 46 congrats
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
|
s********1
发帖数: 20 | 47 每次看见你的帖子内容，都很畅心，congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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c****j
发帖数: 14 | |
e*********6
发帖数: 3453 | 49 楼主这种应该给个永久职位养起来，一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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m*********D
发帖数: 1727 | 50 谢各位！
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。 |
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|
h*******o
发帖数: 4884 | 51 恭喜
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。 |
s*****g
发帖数: 7857 | 52 尽管不常来这里，可是看到你的收获，真心替你高兴啊！！！！
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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s*****g
发帖数: 7857 | 53 最近我的细胞也是有mycoplasma， 用试剂处理后没有了，但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
|
s*****g
发帖数: 7857 | 54 看到你的成功，我自己也回想一下，真得像你学习。热爱科研，就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！ |
h*******e
发帖数: 142 | |
t*******g
发帖数: 452 | 56 知足常乐，心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
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m*********D
发帖数: 1727 | 57 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！ |
s*****i
发帖数: 1781 | 58 恭喜！中秋快乐？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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m****a
发帖数: 270 | 59 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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m*********D
发帖数: 1727 | 60 谢谢！
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
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m*********D
发帖数: 1727 | 61 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
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G***G
发帖数: 16778 | 62 congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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d********m
发帖数: 3662 | |
c********6
发帖数: 693 | |
s*********y
发帖数: 292 | |
F*****6
发帖数: 30 | 66 恭喜恭喜，的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！ |
m*********r
发帖数: 2456 | |
S**********e
发帖数: 620 | 68 你这完全是走钢丝似的成功，假如没有compound，假如grant得不到，你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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c********n
发帖数: 225 | 69 赞！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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e***s
发帖数: 689 | 70 难得有如此之热情，蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】
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: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
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: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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t******k
发帖数: 599 | |
l********7
发帖数: 175 | 72 真心祝福楼主，这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲，新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。 |
b*****s
发帖数: 3390 | 73 恭喜，正能量
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: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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O******e
发帖数: 4845 | 74 恭喜，恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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b*********1
发帖数: 1054 | 75 恭喜恭喜，都是你努力的回报啊，这下放心啦，也可以抽空多钓鱼了：）
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
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x*******5
发帖数: 1335 | 76 congrats!
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: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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t*****t
发帖数: 773 | |
n******7
发帖数: 12463 | |
m*********D
发帖数: 1727 | 79 多谢上面各位同行！这大家心想事成！
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。 |
d****i
发帖数: 2346 | |
|
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m******g
发帖数: 3924 | |
c******4
发帖数: 4896 | 82 这个才是科研精神！要是社会对这样的人再多点扶持就好了。 |
F*Q
发帖数: 3259 | |
w*****c
发帖数: 7276 | |
a********p
发帖数: 52 | 85 Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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F*Q
发帖数: 3259 | 86 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢？ |
m*********D
发帖数: 1727 | 87 多谢上面几位。大家中秋快乐！
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
|
F*Q
发帖数: 3259 | 88 明白。做独立研究光技术是不够，不过大部分独立研究的也就是跟风，技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
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a*********8
发帖数: 2353 | 89 你老板有太幸福了！lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要，lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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M****I
发帖数: 825 | 90 恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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c*********r
发帖数: 1312 | |
j**********0
发帖数: 391 | 92 恭喜! 喜欢看你写的帖子，平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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C****Y
发帖数: 4 | |
D*a
发帖数: 6830 | |
s******y
发帖数: 17729 | 95 恭喜兄弟，能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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m*********D
发帖数: 1727 | 96 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！ |
s******y
发帖数: 17729 | 97 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
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i*********0
发帖数: 915 | |
O******e
发帖数: 4845 | 99 其实这行，如果博士后1/3可以独立当PI，1/3转title接着干，1/3转行，那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
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t*******g
发帖数: 452 | |
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r****n
发帖数: 300 | 101 congrats
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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s********1
发帖数: 20 | 102 每次看见你的帖子内容，都很畅心，congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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c****j
发帖数: 14 | |
e*********6
发帖数: 3453 | 104 楼主这种应该给个永久职位养起来，一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
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: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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m*********D
发帖数: 1727 | 105 谢各位！
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。 |
h*******o
发帖数: 4884 | 106 恭喜
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。 |
s*****g
发帖数: 7857 | 107 尽管不常来这里，可是看到你的收获，真心替你高兴啊！！！！
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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s*****g
发帖数: 7857 | 108 最近我的细胞也是有mycoplasma， 用试剂处理后没有了，但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
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s*****g
发帖数: 7857 | 109 看到你的成功，我自己也回想一下，真得像你学习。热爱科研，就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！ |
h*******e
发帖数: 142 | |
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t*******g
发帖数: 452 | 111 知足常乐，心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
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c****1
发帖数: 1095 | |
f**********s
发帖数: 1415 | 113
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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c****1
发帖数: 1095 | |
f**********s
发帖数: 1415 | 115
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
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W*T
发帖数: 241 | 116 恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了，真心恭喜 |
W*T
发帖数: 241 | 117 恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了，真心恭喜 |
