b*****n
发帖数: 1841 | 1 最近有一个很好的想法想要做，但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织，试
过非常多的方法，都无法看到有效的感染。
我试过lentivirus (滴度在10^6)，不同种类的AAV（滴度在10^11）；试过用强免疫抑
制剂处理小鼠；试过用裸鼠来操作病毒感染，效果均很差（只有<10%细胞被感染。）。
病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使
我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二，定会感激不尽（散尽伪币
，尽管知道大家都不用了）。
期待在版友的指导下走过这个瓶颈，谢谢谢谢！ |
j******i
发帖数: 939 | 2 什么组织?
【在 b*****n 的大作中提到】
: 最近有一个很好的想法想要做，但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织，试
: 过非常多的方法，都无法看到有效的感染。
: 我试过lentivirus (滴度在10^6)，不同种类的AAV（滴度在10^11）；试过用强免疫抑
: 制剂处理小鼠；试过用裸鼠来操作病毒感染，效果均很差（只有<10%细胞被感染。）。
: 病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使
: 我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二，定会感激不尽（散尽伪币
: ，尽管知道大家都不用了）。
: 期待在版友的指导下走过这个瓶颈，谢谢谢谢！
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b*****n
发帖数: 1841 | 3 皮肤
【在 j******i 的大作中提到】
: 什么组织?
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j******i
发帖数: 939 | 4 皮肤用lenti很容易感染 不过老鼠的皮肤比较薄 注射有点难度 你的lenti滴度不高啊
没有超离心吧
【在 b*****n 的大作中提到】
: 皮肤
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b*****n
发帖数: 1841 | 5 滴度有1X10^7/ml，经过了10倍浓缩。
能感染上皮不？
啊
【在 j******i 的大作中提到】
: 皮肤用lenti很容易感染 不过老鼠的皮肤比较薄 注射有点难度 你的lenti滴度不高啊
: 没有超离心吧
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l*****7
发帖数: 8463 | 6 你要用病毒的易感组织／细胞才对呀。
非易感组织／细胞是很难被感染的，
嵌入新DNA／RNA 后，病毒的感染力会变弱或丢失的。 |
v********a
发帖数: 646 | 7 病毒有效感染组织细胞的前提之一，是该细胞表面有足够的受体表达。
已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞，因此，可以考虑将该短肽的编码基因和你
的目的基因融合到一起（中间用序列隔开）。这种修饰过的病毒，也许会增强感染效率
。 |
l*****7
发帖数: 8463 | 8 如果实在不行， 你也可使使按普通plasmid处理的方法：
用gene－gun 或 transfection。 |
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j******i
发帖数: 939 | 9 你这个滴度还是不高
不知道你感兴趣的是哪种细胞 下面这篇文章用的是intradermal injection
Intradermal Injection of Lentiviral Vectors Corrects Regenerated Human
Dystrophic Epidermolysis Bullosa Skin Tissue in Vivo
【在 b*****n 的大作中提到】
: 滴度有1X10^7/ml，经过了10倍浓缩。
: 能感染上皮不？
:
: 啊
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j******i
发帖数: 939 | 10 挺有意思的 有参考文献吗
【在 v********a 的大作中提到】
: 病毒有效感染组织细胞的前提之一，是该细胞表面有足够的受体表达。
: 已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞，因此，可以考虑将该短肽的编码基因和你
: 的目的基因融合到一起（中间用序列隔开）。这种修饰过的病毒，也许会增强感染效率
: 。
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z*******q
发帖数: 16 | 11 浣犵殑婊村害澶綆浜嗭紝鎰熸煋缁勭粐锛屼綘鐨勬敞灏勯噺搴旇涓嶅ぇ锛屽鏋滃
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z*******q
发帖数: 16 | 12 浣犵殑婊村害澶綆浜嗭紝鎰熸煋缁勭粐锛屼綘鐨勬敞灏勯噺搴旇涓嶅ぇ锛屽鏋滃
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r****n
发帖数: 300 | 13 乱码
嶅崄鐨勪簲
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【在 z*******q 的大作中提到】
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b*****n
发帖数: 1841 | 14 有无什么免疫抑制剂能让小鼠的免疫力几乎完全散失？
【在 b*****n 的大作中提到】
: 最近有一个很好的想法想要做，但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织，试
: 过非常多的方法，都无法看到有效的感染。
: 我试过lentivirus (滴度在10^6)，不同种类的AAV（滴度在10^11）；试过用强免疫抑
: 制剂处理小鼠；试过用裸鼠来操作病毒感染，效果均很差（只有<10%细胞被感染。）。
: 病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使
: 我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二，定会感激不尽（散尽伪币
: ，尽管知道大家都不用了）。
: 期待在版友的指导下走过这个瓶颈，谢谢谢谢！
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