b*****u 发帖数: 75 | 1 如果有头十个guide, 目的蛋白在293中表达,可否转染然后2-3后检测是否有蛋白knock
down (out)?
还是需要先包病毒,然后在target 细胞中试? | s********r 发帖数: 312 | 2 直接转293, 然后做surveyor assay
knock
【在 b*****u 的大作中提到】 : 如果有头十个guide, 目的蛋白在293中表达,可否转染然后2-3后检测是否有蛋白knock : down (out)? : 还是需要先包病毒,然后在target 细胞中试?
| Z******5 发帖数: 435 | 3 在切割位点两侧设计好引物,瞬转后48小时取一点细胞做PCR,然后去测序,第二天就
知道有没有切割了。 | b*****u 发帖数: 75 | 4 多谢楼上两位!
还有一个问题,老想不明白。有几个guide,发表的文章中,发现在细胞a都能产生
indel。我把这几个guide克隆到另外一个慢病毒载体,然后感染同样的细胞系(不排除
细胞可能不一样), 发现有的产生indel以及蛋白表达明显下调了,而有的一点没有动静。 |
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