b*****u
发帖数: 75 | 1 如果有头十个guide, 目的蛋白在293中表达，可否转染然后2-3后检测是否有蛋白knock
down (out)?
还是需要先包病毒，然后在target 细胞中试？ | s********r
发帖数: 312 | 2 直接转293， 然后做surveyor assay
knock
【在 b*****u 的大作中提到】
: 如果有头十个guide, 目的蛋白在293中表达，可否转染然后2-3后检测是否有蛋白knock
: down (out)?
: 还是需要先包病毒，然后在target 细胞中试？
| Z******5
发帖数: 435 | 3 在切割位点两侧设计好引物，瞬转后48小时取一点细胞做PCR，然后去测序，第二天就
知道有没有切割了。 | b*****u
发帖数: 75 | 4 多谢楼上两位！
还有一个问题，老想不明白。有几个guide，发表的文章中，发现在细胞a都能产生
indel。我把这几个guide克隆到另外一个慢病毒载体，然后感染同样的细胞系（不排除
细胞可能不一样), 发现有的产生indel以及蛋白表达明显下调了，而有的一点没有动静。 |
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