s********m 发帖数: 748 | 1 想知道为什么有的fluorescent sensor文章里说用fluorescent microscope去检测荧光
,可有的只是用fluorimeter,这两个价格上差很多啊,请问有什么区别啊? 什么情况
下可以用fluorimeter,什么时候必须要fluorescent microscope? 谢谢了 |
W*********t 发帖数: 204 | 2 前者为fluorescence microscopy,通常用于表征2D或者3D的微观现象,比如细胞内某种
化合物的
分布。改表征通常为false color image,梯度显示检测物质的分布。通过这种方法获
得的表征图像
分辨率通常为200nm,通过特殊的方法,分辨率可达到 10nm 或者更低(参见Zhuang
Xiaowei的文
章)。
后者为fluorescence spectroscopy,可以直接一维的看到被表征分子的电子跃迁过程
,例如单线
态和三线态之间的能量差。例如飞米激光的spectroscopy可以允许我们看到某分子短暂
的中间体自由
基等等。
Microscopy更偏重于宏观、应用;spectroscopy更偏重微观、理论。
【在 s********m 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 想知道为什么有的fluorescent sensor文章里说用fluorescent microscope去检测荧光 : ,可有的只是用fluorimeter,这两个价格上差很多啊,请问有什么区别啊? 什么情况 : 下可以用fluorimeter,什么时候必须要fluorescent microscope? 谢谢了
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J**a 发帖数: 215 | 3 fluorimeter是ensemble measurement吧。。。只给出系综平均量。不能显示任何
intensity distribution和不同分子间heterogeneity的信息.
【在 W*********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 前者为fluorescence microscopy,通常用于表征2D或者3D的微观现象,比如细胞内某种 : 化合物的 : 分布。改表征通常为false color image,梯度显示检测物质的分布。通过这种方法获 : 得的表征图像 : 分辨率通常为200nm,通过特殊的方法,分辨率可达到 10nm 或者更低(参见Zhuang : Xiaowei的文 : 章)。 : 后者为fluorescence spectroscopy,可以直接一维的看到被表征分子的电子跃迁过程 : ,例如单线 : 态和三线态之间的能量差。例如飞米激光的spectroscopy可以允许我们看到某分子短暂
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s********m 发帖数: 748 | 4 谢谢回复。那请问如果是做一个self-assembled monolayer,上面接荧光分子那种检测
是不是fluorometer就可以了呢?比如说用来检测离子,想观察bind离子前后的荧光强
度差别,可以直接用fluorometer吗?
【在 W*********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 前者为fluorescence microscopy,通常用于表征2D或者3D的微观现象,比如细胞内某种 : 化合物的 : 分布。改表征通常为false color image,梯度显示检测物质的分布。通过这种方法获 : 得的表征图像 : 分辨率通常为200nm,通过特殊的方法,分辨率可达到 10nm 或者更低(参见Zhuang : Xiaowei的文 : 章)。 : 后者为fluorescence spectroscopy,可以直接一维的看到被表征分子的电子跃迁过程 : ,例如单线 : 态和三线态之间的能量差。例如飞米激光的spectroscopy可以允许我们看到某分子短暂
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r*******h 发帖数: 77 | 5 用spectroscopy即可, 荧光强度变化看所得发射曲线,此外测试些寿命或量子效率做辅
助 |
m****n 发帖数: 75 | 6 可以先拿fluorimeter试测,仪器好找,机时便宜
潜在的问题是:若样本接上的荧光分子很少,则难以被检测到
若是测寿命,要TCSPC吧,那就比较贵了
从你的描述,fluorescence microscope也不需要Xiaowei Zhuang 做STORM 那种那么高
的分辨率,一般的荧光显微镜就可以了。统计下视野内光强在接上荧光分子前后变化就
行了 |