x****a
发帖数: 1041 | 1 想做protein在polymer表面吸附的实验。请教一下什么方表征比较方便。现在考虑用荧
光显微镜或AFM.
荧光的话是不是一定要先染色，有没有protein自己带荧光的？ AFM的话，觉得一个一
个扫样品太慢了。
另外，protein的选择有讲究吗？研究表面吸附有什么常用的protein类型吗？
谢谢 |
b*******g
发帖数: 1309 | 2 方法：QCM SPR 比较常见
带荧光的protein，可以搞GFP 这类的proteins
或者自己用ｄｙｅ修饰ｐｒｏｔｅｉｎ
一般用BSA比较多，便宜量有足，容易修饰
【在 x****a 的大作中提到】
: 想做protein在polymer表面吸附的实验。请教一下什么方表征比较方便。现在考虑用荧
: 光显微镜或AFM.
: 荧光的话是不是一定要先染色，有没有protein自己带荧光的？ AFM的话，觉得一个一
: 个扫样品太慢了。
: 另外，protein的选择有讲究吗？研究表面吸附有什么常用的protein类型吗？
: 谢谢
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p*****r
发帖数: 805 | 3 看你要用什么样的protein了。rfp或者gfp的都是自带荧光protein。Invitrogen有荧光
标记可以自己联,还有标记好的protein ladder可以直接用。
AFM要怎么扫？在液体里扫吗？扫出来也没办法断定是否是protein啊。
你的polymer是怎么样的？表面有什么functional group可以联protein？
【在 x****a 的大作中提到】
: 想做protein在polymer表面吸附的实验。请教一下什么方表征比较方便。现在考虑用荧
: 光显微镜或AFM.
: 荧光的话是不是一定要先染色，有没有protein自己带荧光的？ AFM的话，觉得一个一
: 个扫样品太慢了。
: 另外，protein的选择有讲究吗？研究表面吸附有什么常用的protein类型吗？
: 谢谢
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x****a
发帖数: 1041 | 4 谢谢
【在 b*******g 的大作中提到】
: 方法：QCM SPR 比较常见
: 带荧光的protein，可以搞GFP 这类的proteins
: 或者自己用ｄｙｅ修饰ｐｒｏｔｅｉｎ
: 一般用BSA比较多，便宜量有足，容易修饰
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x****a
发帖数: 1041 | 5 谢谢
polymer是表面上长的PLA，functional group大概也就是末端的羟基了。protein估计
要物理吸附上去的。
AFM的话，想把样品从溶液里拿出来干燥后再扫描。
【在 p*****r 的大作中提到】
: 看你要用什么样的protein了。rfp或者gfp的都是自带荧光protein。Invitrogen有荧光
: 标记可以自己联,还有标记好的protein ladder可以直接用。
: AFM要怎么扫？在液体里扫吗？扫出来也没办法断定是否是protein啊。
: 你的polymer是怎么样的？表面有什么functional group可以联protein？
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x****a
发帖数: 1041 | 6 如果只想知道吸附的多少是不是可以用IR来测，看氨基峰的大小？ |
P********n
发帖数: 372 | 7 ATR-FTIR, XPS, contact angle, AFM, QCM...太多了。。。 |
x****a
发帖数: 1041 | |
d********y
发帖数: 176 | 9 ATR, sum frequency generation |
o****e
发帖数: 1011 | 10 AFM可以做液体里面的样品。需要用配套的“Fluid Cell”。
【在 x****a 的大作中提到】
: 多谢
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o****e
发帖数: 1011 | 11 ATR-IR（或者表面Raman）主要是resolution的问题。
如果只关心“大面积”范围内的平均信号，不关心其“具体”是从哪里来的，那用IR
什么的应该无妨。
【在 x****a 的大作中提到】
: 如果只想知道吸附的多少是不是可以用IR来测，看氨基峰的大小？
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b***2
发帖数: 348 | 12 荧光显微镜，用GFP或者fitc-bsa这种便宜货色吧，如果你对protein没有特殊要求的话 |
x******i
发帖数: 146 | 13 如果functional group只有OH,
表面太亲水，
估计protein要特异性上去不太容易，
当然干在上面另当别论，
可以考虑搞点长碳链之类的憎水基团~ |
x****a
发帖数: 1041 | 14 如果sample在protein 溶液里overnight，然后用水冲一下再干燥，这个需要有特异性
吸附是吗？ 一般的physisorption是不是不起作用？
【在 x******i 的大作中提到】
: 如果functional group只有OH,
: 表面太亲水，
: 估计protein要特异性上去不太容易，
: 当然干在上面另当别论，
: 可以考虑搞点长碳链之类的憎水基团~
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