f***a
发帖数: 11477 | 1 【 以下文字转载自 NanoST 讨论区 】
发信人: frada (微风轻哨), 信区: NanoST
标 题: 请教magnetic beads做TEM的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jan 3 12:45:40 2011, 美东)
第一次做TEM，问题很多
我的mag beads比较大, 1 um直径
我就是用滴加5ul干在grid(200 mesh copper, carbon type-B),干5分钟
然后用一个什么放射性的东西染色5分钟，再冲洗，再干5分钟
结果发现只有非常少的bead在膜的边缘地带吊着
但是同样的步骤对于20nm 的普通 gold nanoparticle就没有问题
可以很均匀地分布在整个网上
谁知道这是什么原因啊
是因为有磁性的原因，还是因为尺寸太大的原因
如果是尺寸的原因，那么应该怎么操作呢
如果是磁性的原因，一般mag beads应该怎么样才可以在 TEM下保持住并看到呢 |
o****e
发帖数: 1011 | 2 这么“大”的粒子，我觉得用那种“holey carbon support film”
（Lacey network support film）做会好些。
另外就是这么大的，不妨直接用SEM看了。
【在 f***a 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 NanoST 讨论区 】
: 发信人: frada (微风轻哨), 信区: NanoST
: 标 题: 请教magnetic beads做TEM的问题
: 发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jan 3 12:45:40 2011, 美东)
: 第一次做TEM，问题很多
: 我的mag beads比较大, 1 um直径
: 我就是用滴加5ul干在grid(200 mesh copper, carbon type-B),干5分钟
: 然后用一个什么放射性的东西染色5分钟，再冲洗，再干5分钟
: 结果发现只有非常少的bead在膜的边缘地带吊着
: 但是同样的步骤对于20nm 的普通 gold nanoparticle就没有问题
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f***a
发帖数: 11477 | 3 原来是因为尺寸的原因啊
谢谢啦
【在 o****e 的大作中提到】
: 这么“大”的粒子，我觉得用那种“holey carbon support film”
: （Lacey network support film）做会好些。
: 另外就是这么大的，不妨直接用SEM看了。
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o****e
发帖数: 1011 | 4 我不确定为什么你的magnetic beads最后很少“粘”在grid上。
你不妨提高原始样品的浓度，或者至少让原始样品在grid上dry得久些
（让溶剂多挥发些），希望这样最后粘在grid上的beads多些。你可以
优化一下条件（air dry 5min -->“完全”dry）。
我做的SEM/TEM实验也并不多。就是提个建议，抛砖引玉吧。
【在 f***a 的大作中提到】
: 原来是因为尺寸的原因啊
: 谢谢啦
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f***a
发帖数: 11477 | 5 谢谢你的建议，非常有启发性
后来我给买grid的公司发信问了，他们说
大尺寸的粒子很难沾稳在网上
他们建议用Lacey support film: Formvar Stabilized with Carbon
说这个对于无论大小尺寸的都容易沾住
大的可以hold住10微米以上的，小的可以到几十个nm的
【在 o****e 的大作中提到】
: 我不确定为什么你的magnetic beads最后很少“粘”在grid上。
: 你不妨提高原始样品的浓度，或者至少让原始样品在grid上dry得久些
: （让溶剂多挥发些），希望这样最后粘在grid上的beads多些。你可以
: 优化一下条件（air dry 5min -->“完全”dry）。
: 我做的SEM/TEM实验也并不多。就是提个建议，抛砖引玉吧。
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f***a
发帖数: 11477 | 6 我的大珠子上沾了好多小的小珠子
所以需要一个dynamic range比较大的表征方式
大小都要同时看到
【在 o****e 的大作中提到】
: 这么“大”的粒子，我觉得用那种“holey carbon support film”
: （Lacey network support film）做会好些。
: 另外就是这么大的，不妨直接用SEM看了。
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z***n
发帖数: 600 | |
f***a
发帖数: 11477 | 8 谢谢版上各位大牛的帮助
现在问题解决了
换成了lacey support film，然后增加了真空干燥这一步骤
现在可以非常稳定地观察这么大的mag beads了 |
