c******d 发帖数: 564 | 1 我是外行,有个关于荧光光谱的问题请教。 比如下面这大约十种荧光集团,单靠光谱
分析能分出来吗?
或者转化成另外一个问题,MAx EM 只差 5, 6 nm,这两个基团能靠光谱分析分开吗?
溶液环境一致但是较复杂,是PCR反应产物,里面有0.5mM MgCl2,0.05mM dNTP,DNA,
痕量protein等。
多谢指点
Dye Max. EX (nm) Max.EM (nm)
6-FAM 494 515
JOE™ 520 548 BHQ-1,
TET 521 536
Cal Fluor® Gold 5401 522 541
HEX2 535 555
Cal Fluor Orange 5602 540 561
TAMRA™ 555 576
Cy3® 550 570
Quasar® 5703 548 566
Cal Fluor Red 5904 565 588
ROX™ 573 602
Texas Red® 583 603
Cy5® 651 674
Quasar 6705 647 667
Cy5.5® 675 694 |
m****n 发帖数: 75 | 2 MAx EM 只差 5, 6 nm,这两个基团能靠光谱分析分开吗
单纯靠光谱分析不行 |
c******d 发帖数: 564 | 3 多谢指点。
得差别多少nm才能有效分开?
还有别的简单的方法来区别他们吗?我知道质谱可以,但是太复杂。我就是想用更简便
的方法来取代质谱。 目的是用来做分子探针标记(label for probes in PCR)
多谢
【在 m****n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : MAx EM 只差 5, 6 nm,这两个基团能靠光谱分析分开吗 : 单纯靠光谱分析不行
|
m*********s 发帖数: 323 | 4 100nm? Maybe.
Make sure there is no FRET if measurement is in a mixture. |
d********y 发帖数: 176 | 5 对你的这些dye不熟悉,他们的fwhm一般多少?如果在20nm以下,那么通过chemometric
analysis (CLS,PLS,PCA etc)没准可以。当然前提是没有太多fret发生,光谱是线性组合
【在 c******d 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我是外行,有个关于荧光光谱的问题请教。 比如下面这大约十种荧光集团,单靠光谱 : 分析能分出来吗? : 或者转化成另外一个问题,MAx EM 只差 5, 6 nm,这两个基团能靠光谱分析分开吗? : 溶液环境一致但是较复杂,是PCR反应产物,里面有0.5mM MgCl2,0.05mM dNTP,DNA, : 痕量protein等。 : 多谢指点 : Dye Max. EX (nm) Max.EM (nm) : 6-FAM 494 515 : JOE™ 520 548 BHQ-1, : TET 521 536
|