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Chemistry版 - 有人知道如何用HPLC分离这四种物质么?
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求教,HPLC分离DNAHPLC问题:没有UV的分子用什么DETECTOR测试?
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请教HILIC Column问题很搞不懂一些HPLC的method到底是怎么摸出来的?
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HILIC column一些小問題请教:HPLC 什么条件分离amine
求问无机盐在HILIC column中的retention time问一下一个HPLC图
相关话题的讨论汇总
话题: column话题: phase话题: ammacet话题: hplc
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1 (共1页)
s********3
发帖数: 40
1
求救。。。
有大侠知道HPLC如何分离这四种物质,苯甲酸,对二苯酚,EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
基乙二醇,
可以选择下面的条件;
Conditions
Column: C18 Silica ,C8 Silica, Cyano phase,SiOH, PS-DVB, SAX
Column Size: 4.6 x 15cm 2.1 x 10cm
Detector: ELSD Diode Array MS
Initial Gradient Condition:
Final Gradient Condition:
Sample dissolved into:
Injection volume:
s**********8
发帖数: 25265
2
期末考试题?

【在 s********3 的大作中提到】
: 求救。。。
: 有大侠知道HPLC如何分离这四种物质,苯甲酸,对二苯酚,EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,
: 可以选择下面的条件;
: Conditions
: Column: C18 Silica ,C8 Silica, Cyano phase,SiOH, PS-DVB, SAX
: Column Size: 4.6 x 15cm 2.1 x 10cm
: Detector: ELSD Diode Array MS
: Initial Gradient Condition:
: Final Gradient Condition:

s********3
发帖数: 40
3
面试公司发过来的,求救。。。

【在 s**********8 的大作中提到】
: 期末考试题?
c******m
发帖数: 884
4
cyano phase plus MS, gradient start from (sample dissolved in) aqueous to high organic with constant NH4OH and AmmAcet
good luck.

【在 s********3 的大作中提到】
: 求救。。。
: 有大侠知道HPLC如何分离这四种物质,苯甲酸,对二苯酚,EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,
: 可以选择下面的条件;
: Conditions
: Column: C18 Silica ,C8 Silica, Cyano phase,SiOH, PS-DVB, SAX
: Column Size: 4.6 x 15cm 2.1 x 10cm
: Detector: ELSD Diode Array MS
: Initial Gradient Condition:
: Final Gradient Condition:

c**m
发帖数: 757
5
赞,哪里有这方面入门的书?

high organic with constant NH4OH and AmmAcet

【在 c******m 的大作中提到】
: cyano phase plus MS, gradient start from (sample dissolved in) aqueous to high organic with constant NH4OH and AmmAcet
: good luck.

s********3
发帖数: 40
6
太谢谢了,还有一点confused, column size用哪个好?对这个AmmAcet有疑问,能弱弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?

high organic with constant NH4OH and AmmAcet

【在 c******m 的大作中提到】
: cyano phase plus MS, gradient start from (sample dissolved in) aqueous to high organic with constant NH4OH and AmmAcet
: good luck.

s****2
发帖数: 4569
7
Ammonium Acetate.

弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?

【在 s********3 的大作中提到】
: 太谢谢了,还有一点confused, column size用哪个好?对这个AmmAcet有疑问,能弱弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?
:
: high organic with constant NH4OH and AmmAcet

i**********y
发帖数: 218
8
the big HPLC column companies like waters, phenomenax have application for
seperating chemicals on their website. You can go ahead and check.

【在 s********3 的大作中提到】
: 求救。。。
: 有大侠知道HPLC如何分离这四种物质,苯甲酸,对二苯酚,EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,
: 可以选择下面的条件;
: Conditions
: Column: C18 Silica ,C8 Silica, Cyano phase,SiOH, PS-DVB, SAX
: Column Size: 4.6 x 15cm 2.1 x 10cm
: Detector: ELSD Diode Array MS
: Initial Gradient Condition:
: Final Gradient Condition:

c******m
发帖数: 884
9
choose the smaller column. AmmAcet is ammonium acetate, works as mobile phase
additive.

弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?

【在 s********3 的大作中提到】
: 太谢谢了,还有一点confused, column size用哪个好?对这个AmmAcet有疑问,能弱弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?
:
: high organic with constant NH4OH and AmmAcet

s********3
发帖数: 40
10
谢了。。。

phase

【在 c******m 的大作中提到】
: choose the smaller column. AmmAcet is ammonium acetate, works as mobile phase
: additive.
:
: 弱的问问它是个什么?加入流动相的作用又是什么?

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再次请教关于HILIC的问题求助:奇怪的质谱结果
HILIC column一些小問題HPLC问题:没有UV的分子用什么DETECTOR测试?
求问无机盐在HILIC column中的retention time再问个HPLC的问题:糖类分子用什么DETECTOR来看?
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g*****x
发帖数: 3283
11
为什么要用MS检测呢?

high organic with constant NH4OH and AmmAcet

【在 c******m 的大作中提到】
: cyano phase plus MS, gradient start from (sample dissolved in) aqueous to high organic with constant NH4OH and AmmAcet
: good luck.

w*****u
发帖数: 857
12
Daneil Harris, quantitative chemical analysis
I think this book is a good one.

【在 c**m 的大作中提到】
: 赞,哪里有这方面入门的书?
:
: high organic with constant NH4OH and AmmAcet

G*******X
发帖数: 1028
13
根据四个物质的性质,先选detector
1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
respectively to choose proper m/z for monitoring.
2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability
有时候不好,不建议用。
Cyano如果是HILIC phase,是最理想的。
4. Cyano phase, 按HILIC用,先试一下10mM Ammonia Acetate in 90%ACN。根据分离
效果,再调节ACN浓度,和buffer的种类和浓度

【在 s********3 的大作中提到】
: 求救。。。
: 有大侠知道HPLC如何分离这四种物质,苯甲酸,对二苯酚,EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,
: 可以选择下面的条件;
: Conditions
: Column: C18 Silica ,C8 Silica, Cyano phase,SiOH, PS-DVB, SAX
: Column Size: 4.6 x 15cm 2.1 x 10cm
: Detector: ELSD Diode Array MS
: Initial Gradient Condition:
: Final Gradient Condition:

s*******h
发帖数: 3731
14
跪求大牛收徒弟。。。。

compounds
的。
repeatability

【在 G*******X 的大作中提到】
: 根据四个物质的性质,先选detector
: 1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
: respectively to choose proper m/z for monitoring.
: 2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
: 3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
: SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
: PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
: 化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
: SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability

D*********8
发帖数: 398
15
嗯,好厉害。

compounds
的。
repeatability

【在 G*******X 的大作中提到】
: 根据四个物质的性质,先选detector
: 1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
: respectively to choose proper m/z for monitoring.
: 2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
: 3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
: SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
: PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
: 化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
: SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability

s**********8
发帖数: 25265
16
现在很多new column chemistry, 是reverse phase 和其它的hybrid, 比如ion
exchange, 并且mass spec 兼容.

compounds
的。
repeatability

【在 G*******X 的大作中提到】
: 根据四个物质的性质,先选detector
: 1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
: respectively to choose proper m/z for monitoring.
: 2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
: 3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
: SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
: PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
: 化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
: SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability

O*******f
发帖数: 926
17
why ammonium acetate, how about ammonium hydroxide? 3xs.
p**********g
发帖数: 378
18
大牛啊,开班讲课吧。。。

compounds
的。
repeatability

【在 G*******X 的大作中提到】
: 根据四个物质的性质,先选detector
: 1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
: respectively to choose proper m/z for monitoring.
: 2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
: 3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
: SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
: PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
: 化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
: SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability

p*******w
发帖数: 311
19
用C18加ion pairing agent 行吗?
NH4Ac buffer加一点点的tetrabutylammonium hydroxide,用一定量的CH3CN?
K*********e
发帖数: 183
20
All 4 are very polar or called hydrophilic, C18 or C8 are not going to
retain them.
In organic chemistry separation, we can use SiOH (use as normal phase), to
separate them. But in analytical separation,
Using HILIC column.

【在 p*******w 的大作中提到】
: 用C18加ion pairing agent 行吗?
: NH4Ac buffer加一点点的tetrabutylammonium hydroxide,用一定量的CH3CN?

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S****2
发帖数: 349
21
请教一下,能不能展开说说“ELSD就是个joke”,谢谢

compounds
的。
repeatability

【在 G*******X 的大作中提到】
: 根据四个物质的性质,先选detector
: 1. Detetor: ELSD就是个joke。直接pass。EDTA(乙二胺四乙酸),三羧
: 基乙二醇,没有Uv吸收峰,所以要用质谱. Infuse injection of the four compounds
: respectively to choose proper m/z for monitoring.
: 2. 质谱可以handle的flow rate比 diaode array小,所以column size 2.1x10cm
: 3.四个化合物三个是酸,极性都很强,C18、和C8留不住他们,会在void的时间流出的。
: SAX是离子交换柱,一般mobile phase要加较大浓度的盐溶液,不适合质谱检测。
: PS-DVB看产品介绍是只是用来将polar化合物从nonpolar化合物中分离出来的,像是纯
: 化用的。column本身没有官能团,对polar化合物没有分离作用。
: SiOH,是normal phase column。是个选择。不过正相柱对水分很敏感,repeatability

G*******X
发帖数: 1028
22
学费

【在 s*******h 的大作中提到】
: 跪求大牛收徒弟。。。。
:
: compounds
: 的。
: repeatability

G*******X
发帖数: 1028
23
可爱的宝宝,嘟嘟脸

【在 D*********8 的大作中提到】
: 嗯,好厉害。
:
: compounds
: 的。
: repeatability

G*******X
发帖数: 1028
24
“ 现在很多new column chemistry, 是reverse phase 和其它的hybrid”
这个同意,不过题目里限制了column的选择嘛,哈哈
“比如ion
这个不同意。ion exchange要用盐洗compound。和质谱不是很compatible
G*******X
发帖数: 1028
25
ammonium hydroxide 强碱性,会立刻毁了硅胶柱。
一般柱子使用pH小于8,好 一点的小于10.最好在小于6的条件下使用

【在 O*******f 的大作中提到】
: why ammonium acetate, how about ammonium hydroxide? 3xs.
G*******X
发帖数: 1028
26
ion pairing agent will contaminate Mass. If use LC/MS, avoid ion pairing
regent.

【在 p*******w 的大作中提到】
: 用C18加ion pairing agent 行吗?
: NH4Ac buffer加一点点的tetrabutylammonium hydroxide,用一定量的CH3CN?

G*******X
发帖数: 1028
27
吹的我飘飘然了。不是大牛,有点工作经验而已

【在 p**********g 的大作中提到】
: 大牛啊,开班讲课吧。。。
:
: compounds
: 的。
: repeatability

m******2
发帖数: 1056
28
大牛推荐几本hplc盒lcms相关得书来看吧。
多谢。

【在 G*******X 的大作中提到】
: 学费
1 (共1页)
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求教,HPLC分离DNAHPLC问题:没有UV的分子用什么DETECTOR测试?
HPLC mobile phase 求建议再问个HPLC的问题:糖类分子用什么DETECTOR来看?
有人用过negative ion mode分析peptides么?生物学生 HPLC 再次请教
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