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Chemistry版 - How to qualify enzyme/oligonucleotide reagent mixes?
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d********w
发帖数: 1110
1
请问有哪位大侠有经验?用Hplc和UV可以吗
h*******n
发帖数: 1328
2
直接UV就可以了吧, 260和290的比例之类的
d********w
发帖数: 1110
3
protein在280有干扰,ratio只能看纯不纯,没办法定量吧。
f*******e
发帖数: 628
4
啥叫 qualify? 干什么用?
定量 oligo 的话,qbit 之类的 fluorescence 很准确,应该也不受 enzyme 的影响。
不怕麻烦的话,fluorometer 之类仪器加 staining dye 也可。
HPLC, ... 也行吧。跑个胶也行。用什么方法取决于你有多大量的 sample。

【在 d********w 的大作中提到】
: protein在280有干扰,ratio只能看纯不纯,没办法定量吧。
l**j
发帖数: 651
5
楼主是要qualify reagent 不是quantify
这俩要求完全不一样

【在 d********w 的大作中提到】
: protein在280有干扰,ratio只能看纯不纯,没办法定量吧。
d********w
发帖数: 1110
6
是的,就想qualify。比如说看看oligonucleotide放在含有enzyme的buffer里面一段时
间,是否变坏了分解了。
f*******e
发帖数: 628
7
那得 define 什么叫变坏。比如 25-mer 变 24-mer 算不算,是 5'- 还是 3'-, 等等?
只要精确测长度的话,就只能 CE/HPLC 了,用量不算大。或者 Mass。
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