尿激酶原蛋白质工程：结构和功能关系的研究 - NJU版

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NJU版 - 尿激酶原蛋白质工程：结构和功能关系的研究

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获奖情况：1998年度教育部科技进步一等奖
主要完成人员：朱德煦、刘建宁、华子春、孙自勇、陈于
红、马忠
主要完成单位：南京大学
内容简介：(1)用分子模建方法预测了尿激酶原(pro－UK)
的三维结构，在此基础上采用定点突变和动力学分析方法阐明
了尿激酶原存在内源性催化活性的结构基础，深化了对尿激酶
原酶学性质的认识，为尿激酶原的临床合理应用提供了科学依
据。
(2)在分子水平上解释了尿激酶对纤维蛋白低亲和性的原
因，并阐明了纤溶酶原激活剂分子中心环柄结构域和纤维蛋白
亲和性的关系，为设计新一代纤溶酶原激活剂奠定了科学依据。
(3)以尿激酶原为模型，证明了维系丝氨酸蛋白水解酶活
性构象的主要作用力是：Asp355和酶原转变成酶新生的N_末端
Ile之间形成的盐键，而不是靠疏水相互作用维系。
(4)系统地探索了重组尿激酶原在大肠杆菌中的高效表达
和表达产物的最佳复性条件，为重组尿激酶原及其变体的生产
化奠定了基础。
(5)设计并构建了性能较天然pro－UK/UK更优良的pro－
UK/UK变体，为开发第二代纤溶酶原激活剂跨出了坚实的一步。
(6)pro－UK非催化性能的探索。发现u－P

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