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NanoST版 - 请教一个用EDC连接羧基和氨基的反应
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p******6
发帖数: 169
1
坦白说,就是在碳管上thiolation.
看到多篇文献上说要用一种叫MES的buffer.有的控制ph在4,有的在6,而反应无非是纳
米粒子,如金
那么,这个条件的意义在何处?是为了稳定纳米粒子?还是这个反应本身的需要?
但我丝毫看不出来这个反应有稳定ph的必要。。。。
请高人指点,其中有什么玄机呢?
f***a
发帖数: 11477
2
EDC NHS的反应在这个pH下效率才高
pH>6一般来说binding效率就低了
参见Biacore的EDC NHS-conjugation kit的说明吧
那个kit里面有调好的专门适用这个反应的EDC,NHS和之后的EthanolAmine的溶液
你只要把纯水兑进去EDC或者NHS的小瓶瓶,就可以得到合适的pH以及合适浓度的EDC,
NHS
都不用自己算啦
哈哈
以前我都是自己配,后来就都买这个kit啦
顺便做个好人,价格200多刀一个kit

【在 p******6 的大作中提到】
: 坦白说,就是在碳管上thiolation.
: 看到多篇文献上说要用一种叫MES的buffer.有的控制ph在4,有的在6,而反应无非是纳
: 米粒子,如金
: 那么,这个条件的意义在何处?是为了稳定纳米粒子?还是这个反应本身的需要?
: 但我丝毫看不出来这个反应有稳定ph的必要。。。。
: 请高人指点,其中有什么玄机呢?

f***a
发帖数: 11477
3
斑竹要给我发包子
单纯EDC的效果不如EDC,NHS连用好
当然如果你本身的分子已经修饰成了NHS的基团就不用啦
另外,反应完毕后最好用EthanolAmine来钝化已经被EDC活化的表面官能团
这样背景就小多啦
喵喵喵

【在 f***a 的大作中提到】
: EDC NHS的反应在这个pH下效率才高
: pH>6一般来说binding效率就低了
: 参见Biacore的EDC NHS-conjugation kit的说明吧
: 那个kit里面有调好的专门适用这个反应的EDC,NHS和之后的EthanolAmine的溶液
: 你只要把纯水兑进去EDC或者NHS的小瓶瓶,就可以得到合适的pH以及合适浓度的EDC,
: NHS
: 都不用自己算啦
: 哈哈
: 以前我都是自己配,后来就都买这个kit啦
: 顺便做个好人,价格200多刀一个kit

p******6
发帖数: 169
4
果然厉害阿

那这个EDC NHS连用,是不是还有特别的讲究?
因为有看到要先用NHS活化,然后洗干净以后,再和有NH2基团的分子反应。
如果都同时一起加进去呢???
x*o
发帖数: 1037
5
有一点不明白
在pH<6 的时候氨基变成了--NH3+
不是不好反应了吗?

【在 f***a 的大作中提到】
: EDC NHS的反应在这个pH下效率才高
: pH>6一般来说binding效率就低了
: 参见Biacore的EDC NHS-conjugation kit的说明吧
: 那个kit里面有调好的专门适用这个反应的EDC,NHS和之后的EthanolAmine的溶液
: 你只要把纯水兑进去EDC或者NHS的小瓶瓶,就可以得到合适的pH以及合适浓度的EDC,
: NHS
: 都不用自己算啦
: 哈哈
: 以前我都是自己配,后来就都买这个kit啦
: 顺便做个好人,价格200多刀一个kit

f***a
发帖数: 11477
6
我做的都是需要两个连用的
如果你有NHS修饰的,可以不用EDC
平时用都是一起混着两个加进去

【在 p******6 的大作中提到】
: 果然厉害阿
: 恩
: 那这个EDC NHS连用,是不是还有特别的讲究?
: 因为有看到要先用NHS活化,然后洗干净以后,再和有NH2基团的分子反应。
: 如果都同时一起加进去呢???

x*o
发帖数: 1037
7
bump

【在 x*o 的大作中提到】
: 有一点不明白
: 在pH<6 的时候氨基变成了--NH3+
: 不是不好反应了吗?

p******6
发帖数: 169
8
what does that mean?

【在 x*o 的大作中提到】
: bump
x*o
发帖数: 1037
9
that means "顶"

【在 p******6 的大作中提到】
: what does that mean?
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