n****r
发帖数: 5801 | 1 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: zfax (xafz), 信区: LeisureTime
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:47:59 2014, 美东)
发信人: zfax (xafz), 信区: WaterWorld
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:43:55 2014, 美东)
今天晚上有月食，还是血红色的。
今晚不看，下次就是2032年乐。。。
不想整晚不睡的可以三点起来看到4点。
Don't Miss Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse Tonight
http://abcnews.go.com/Technology/miss-rare-blood-moon-lunar-ecl
urn your gaze to the stars tonight ... 阅读全帖 |
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M*****8
发帖数: 17722 | 2 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: MB80528 (肥猫(Contrarian)[食MM而肥]), 信区: Military
标 题: Re: 2013年7月9日最新的1688个看跌的股票。
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 9 22:18:23 2013, 美东)
2013年7月9日最新的1688个看跌的股票。
多数到顶。墙街已深入插管，吸血在即。
排列依次为，号码，股票符号，收市价。
#0001, A , 44.6000
#0002, AA , 7.9010
#0003, AAGIY , 17.1600
#0004, AAMRQ , 4.7300
#0005, AAN , 28.9700
#0006, AAON , 24.7400
#0007, AAP , 83.2000
#0008, AAUKY , 9.5300
#0009, ABAX , 50.2800
#0010, AB... 阅读全帖 |
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nk
发帖数: 4 | 4 Full Time:
Monaco 0:1 Rangers
Leverkusen 3:2 Sporting Lisbon
Real Madrid 1:0 Spartak Moscow
Arsenal 3:2 Shakhtar
Lazio 3:0 Sparta Prague
Heerenveen 0:1 Valencia
Olympiakos 2:1 Lyonnais
Sturm Graz 3:0 Galatasaray
Frederick, it is just us now, hehe. |
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m******k
发帖数: 2390 | 5 Can RM handle Barca's Tita Tika next season, as Barca did not sign anyone
yet.
I would say yes. RM did sign some really good defensive players.
My bet is Barca can win one silverware next season, but not two.
Either Laliga or ECL cup. |
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z**x
发帖数: 3629 | 6 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: zfax (xafz), 信区: WaterWorld
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:43:55 2014, 美东)
今天晚上有月食，还是血红色的。
今晚不看，下次就是2032年乐。。。
不想整晚不睡的可以三点起来看到4点。
Don't Miss Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse Tonight
http://abcnews.go.com/Technology/miss-rare-blood-moon-lunar-ecl
urn your gaze to the stars tonight for an eerie and spectacular view of the
“blood moon.” At 12:53 a.m. ET, the Earth will begin to position itself
between the sun and the m... 阅读全帖 |
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M******f
发帖数: 859 | 7 作者：静听弦吟
此文资料来自于亦明先生文章和网络搜索整理而成。这是一件往事，如果你认为韩寒案
中方舟子确实不对，但是仍然认为方舟子以往的打假是有价值的，且期望他未来继续打
假的，请务必认真看一看此文。
方舟子以前一直在学术性很强的专业领域“打假”，而专业领域的专业术语是外行人很
难懂的。当两个人争论专业问题的时候，外行对他们的语言其实会像火星语一样完全听
不懂。这导致的后果就是，两个人在用火星语吵架，你其实完全不知道他们在吵什么，
而这时你究竟依靠什么来判断谁说的是对的？
以下言归正传，我们来看一场专业领域的打假案：方舟子打魏于全案。（以下蓝字部分
为来自亦明先生《方舟子恶斗肖传国始末》，黑字部分来自博主网络资料搜索整理，红
字为欢乐部分，绿字为博主吐槽。）
2006年3月26日，新语丝发表了司履生的举报信，举报魏于全院士论文造假。（全文见
：http://bbs.ebiotrade.com/showtopic-12290.aspx ）方舟子在登出这封举报信时，加了按语，表示认为司履生举报成立，魏于全的论文确实造假。按语全文如下：
【方舟子按：司履生教授信中提到的给Nature Med... 阅读全帖 |
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z**x
发帖数: 3629 | 8 今天晚上有月食，还是血红色的。
今晚不看，下次就是2032年乐。。。
不想整晚不睡的可以三点起来看到4点。
Don't Miss Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse Tonight
http://abcnews.go.com/Technology/miss-rare-blood-moon-lunar-ecl
urn your gaze to the stars tonight for an eerie and spectacular view of the
“blood moon.” At 12:53 a.m. ET, the Earth will begin to position itself
between the sun and the moon for the first of a series of four total
eclipses to conclude in September 2015.
The phenomenon is known as a tetrad, in which the moon is completely cover... 阅读全帖 |
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z**x
发帖数: 3629 | 9 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: zfax (xafz), 信区: WaterWorld
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:43:55 2014, 美东)
今天晚上有月食，还是血红色的。
今晚不看，下次就是2032年乐。。。
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http://abcnews.go.com/Technology/miss-rare-blood-moon-lunar-ecl
urn your gaze to the stars tonight for an eerie and spectacular view of the
“blood moon.” At 12:53 a.m. ET, the Earth will begin to position itself
between the sun and the m... 阅读全帖 |
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m*********y
发帖数: 1735 | 11 【 以下文字转载自 LosAngeles 讨论区 】
发信人: nectar (怂), 信区: LosAngeles
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 19:45:14 2014, 美东)
发信人: zfax (xafz), 信区: LeisureTime
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:47:59 2014, 美东)
发信人: zfax (xafz), 信区: WaterWorld
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:43:55 2014, 美东)
今天晚上有月食，还是血红色的。
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m*********y
发帖数: 1735 | 12 【 以下文字转载自 Shaanxi 讨论区 】
发信人: mihoutaoboy (Happy Wife, Happy Life), 信区: Shaanxi
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 20:33:49 2014, 美东)
发信人: nectar (怂), 信区: LosAngeles
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 19:45:14 2014, 美东)
发信人: zfax (xafz), 信区: LeisureTime
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食 （Rare 'Blood Moon' Lunar Eclipse (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Apr 14 14:47:59 2014, 美东)
发信人: zfax (xafz), 信区: WaterWorld
标 题: 不要错过今晚罕见的血月食... 阅读全帖 |
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b******y
发帖数: 2729 | 13 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: ticro123 (ticro123), 信区: Military
标 题: 1979年中国是世界第二个制造单片8位微处理器的国家
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Sep 16 22:29:25 2009, 美东)
1979年中国是世界第二个制造单片8位微处理器的国家
1965年，中国自主研制的第一块集成电路在上海诞生，仅比美国晚了5年。广大科研工
作者和工人阶级发扬自力更生和艰苦奋斗的精神，掌握了从拉单晶、设备制造，再到集
成电路制造全过程，相继研制并生产了DTL、TTL、ECL等各种类型的中小规模双极型数
字逻辑电路，支持了国内计算机行业。
当时具备这种能力的国家除中国外，只有美国、日本和苏联.
毛泽东时代后期，随着经济实力的不断增强，科技经费中用于研究和开发的部分占国内
生产总值的比例(称作“R＆D／GDP)增加到2.32％, 达到同期几个最发达国家英、法、
西德的水平.
1979年，上海半导体器件研究所会同上海元件五厂、中国科学院上海冶金研究所、上海
市计算技术研究所、江苏无线电厂、常州市半导体厂等单位联合攻 |
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a**t
发帖数: 157 | 14 上海元件五厂和上海无线电十四厂研制成功单片8080八位微处理器的时间是1979年。
8080为美国Intel公司1974年的产品，西德仿制出该产品是在1980年10月（Siemens SAB
8080 A-C），苏联是在1986年（Eastern Bloc 8080 KP580BM80A）。
截止到1983年，16K MOS动态存储器研制成功；
8位机用大规模集成电路品种基本配套；
4K MOS静态存储器进入小批量生产；
高性能4位处理机集成电路批量生产；
电子器件工业总公司研制成功6800八位微处理器（仿制美国Motorola公司1974年推出的
6800）；
甘肃天光电工厂生产出64位、256位、1024位双极型ECL存储器；
上海无线电十四厂生产出CMOS大规模集成电路（1981年）等等。
超大规模集成电路的关键设备研制工作也取得一定进展，不少基础材料基本达到生产要
求。 |
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g*****g
发帖数: 34805 | 16 Using mouse there kills me. |
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s****y
发帖数: 38 | 17 譬如：The Common Lisp Object System (CLOS)是用库实现的。
真正做东西的话，我推荐用common lisp,我一般用sbcl,可编译成native binary，同样
的代码也可用ECL和C混编，十分灵活。性能也可几乎达到C。 |
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WB
发帖数: 170 | 18 excle粘贴html文本的问题
从IE的html表格拷贝数据到excle
比如html的数字比较长--eg 12346843636584，
粘贴到excle单元格就变成了科学计数法格式--1.22E+xx，
非要自己到ecle单元格改成text，很不方便。
能否禁止粘贴为1.23E+xx格式？如何设置？ |
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R*s
发帖数: 2041 | 19 第一种配比的情况你重复过几次？
如果只是一次的话，我很怀疑是你实验过程中的其它error导致没有detectable band的。
一二及抗体的比完全取决于抗体的sensitivity, 不能一概而轮。
偶用AP system的时候一及1:100-1000, 二及1:7500.
ECL system的时候一及1:100-1000, 二及1:2000-5000. |
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R*s
发帖数: 2041 | 20 第一种配比的情况你重复过几次？
如果只是一次的话，我很怀疑是你实验过程中的其它error导致没有detectable band的。
一二及抗体的比完全取决于抗体的sensitivity, 不能一概而轮。
偶用AP system的时候一及1:100-1000, 二及1:7500.
ECL system的时候一及1:100-1000, 二及1:2000-5000. |
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e****a
发帖数: 17 | 21 猜了半天的结果是
ECL=Enhanced Chemiluminescence
（发现红宝书里18。4。3写了，真好）
所以通常用的底物就是
Enhanced Chemiluminescence reagent
由luminol reagent和oxidizing reagent组成
用的时候把两个混一下
倒是知道了DNA thunder是个牌子 |
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C********e
发帖数: 329 | 22 是的，我说的那个红外激光扫描成像系统就是LICOR ODYSSEY.但功能好像没有
flurochem多。如果要用猪、鸡等动物的荧光二抗，不知是否能买到？而且不能用ECL吧
？ |
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f*********r
发帖数: 1233 | 23 rockland有抗猪、抗鸡的近红外荧光二抗。
不是不能用ecl，而是根本就不需要。不用买底物，不用买胶片，不用胶片机和冲印药
水，不用建暗室。
还有个好处，如果曝光时间不合适，可以任意调整，重新扫描。不会浪费胶片等耗材。 |
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C***Y
发帖数: 61 | 24
状态，我们文章里面，
overexpression可以检测到binding，但内源的试了几次，摸索了不同buffer条件没有
成功，以前就看相关文献，一篇cell
里面可以内源检测到该蛋白和一个底物binding，但我们没有重复出来，就连
overexpression这2个蛋白，我们也没检测到
binding，哎，十分frustrated啊，coip就是很tricky。
Hopefully these tips will be helpful.
Make sue you have a very good 1st antibody. A strong antibody is capable of
pulling down weak interaction
partners.
Crosslink 1st antibody to beads and elute co-purified protein complex from beads
after washing (instead of boiling
beads) to reduce background.
Use ECL plu |
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b*******H
发帖数: 830 | 25 THERMO 的Femto 可比普通的ECL灵敏1000倍，平常曝白片的膜换上FEMTO经常是肉眼下
熠熠发光啊，但对有些抗体不行，背景太高。
另外就是世纪太贵。
from
beads
吗？ |
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R***r
发帖数: 322 | 26 对x-光有增强作用。
不知道对ECL有没有作用？
请教。 |
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R***r
发帖数: 322 | 27 看介绍好像得射线激发吧？
ECL的光也能激发磷光质吗？ |
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c******r
发帖数: 3778 | 28 你说这个啊？那不行。
但是那个白板可以反射ECL的光，不会被盒子的内面吸收。仅此而已。
所以，嗯，你说的对，不能“增强”，但是能减少减弱。 |
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m*****u
发帖数: 15526 | 29 你用过加了NaN3的抗体么？有网页不推荐用NaN3保存抗体，说对ECL显色系统有破坏作用 |
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W****C
发帖数: 1937 | 30 我用promega的表达了一个质粒 用抗体可以检测到了， 但是貌似量很低 要用强的ECL
才能测到， 我还是担心做IP的时候量不够 会被洗掉。
另外做coip的时候是把两个质粒一起放进去表达好， 还是单独表达再混起来好呢？ |
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C******r
发帖数: 790 | 31 我也是约来越不会做western了
在以前实验室，从没做过的三四个内源蛋白CoIP，一次就能做出来
现在实验室，这次有的信号（doublet磷酸化band）下次就没有了（只有脏背景，没有
条带），搞得我每次去显影都提心吊胆
即使cell line相同，抗体相同，稀释倍数相同，一个人western跟另一个人western不
一样的可能原因太多了，试着列举一下：
1、cell lysis buffer的离子强度和去污剂强度不同，裂解时间长短不同，导致你们
lysate里的蛋白种量有差异；至于要看磷酸化band的话，裂解液是否加phosphotate
inhibitor, 加的种类，也超级影响结果。我不加phosphotase inhibitor的话，有时候
可以看到band shift，但更多时候看不到。
2、SDS胶的浓度，Tris的浓度和pH；这个有人说有影响，我还没有比较过。
3、转膜的电流、时间、温度，以及转膜液里的离子强度（Tris和Glycine的量）,以及
是否加有SDS，都会影响转膜效果。个别抗体对转膜有没有SDS会很敏感，没有哪个配方
是绝对的好。
4、一抗和二抗的稀释倍... 阅读全帖 |
|
I*****y
发帖数: 6402 | 32 ECL用的二抗有HRP酶，而Odyssey用的二抗是有荧光的。这个灵敏度应该是有差异的，
不过我不确定Odyssey的灵敏度是否差一些
带， |
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s******r
发帖数: 2876 | 33 多谢你能抽空指点，
我block用的是5% milk in 1xTBST,
2抗之前步骤都相同，同一张膜剪两半。
2抗也是5% milk,1xTBST, 室温1hr，
TBST洗完了后，PBS洗两边，膜完全晾干后scan.
1), 2Ab是Licor自己的IRDye 800CW Goat anti-Mouse，#926-32210
1:5000 in 5% milk.
2), 双色彩图700 intensity 2.5, 800 intensity 5.
800单独扫描参数是 intensity 7.5.
sensitivity都用的缺省值5。
3), 上了四个图，ECL扫描的图，彩图包括700和800 channel，参数如上，
800单色图，参数如上，800灰度图，从800单色图export，没有压缩。
主要比较第一条lane。
因为只用了一种一抗，所以700灰度图应该没什么用。
麻烦帮着诊断诊断。 |
|
s******r
发帖数: 2876 | 34 你觉得ECL和Odyssey比哪个更灵敏一些？
我知道这里可能有带，所以还能调来调去看能不能出来，
如果是不知道的话，可能就会当做没有带了。
正常。
其实就是因为显示的方式问题，把对比调一下就好了
带， |
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s**********o
发帖数: 14 | 35 我一直用Licor，我的经验是他的灵敏度要比ecl高。
我增经用过低于5ug的total protein上样，actin的结果也还是非常好。
要trouble shooting别人的问题，总是比较难。根据你的介绍，
我不知道blocking buffer是不是问题，在licor的manual里，
他有专门的blocking buffer的配方的，我一直用那个，配完后分装冻起来。
用milk和BSA据说都会减弱或者产生比较强的background。我们旁边的实验室
也有人用milk,但他们2抗用的浓度要大，1；2000。我一般用1：10000。
还有一个问题就是，不知道你的2抗是不是长期放在4度，时间太长会显著的降低他的灵
敏度的。
分装，放在4度尽量在1-2月内用完，最好。
别的，我也不知道了，你先试试，回头UPDATE一下进展。 |
|
s******y
发帖数: 28562 | 36 你的那种绿色的膜背景很高啊，不知道你用的是不是Nitrocellulose?
如果你不小心用错了PVDF，会导致背景非常高！
另外，最好不要用牛奶。我的经验是，要么就用牛奶里面提纯的那个casein，
那么就乖乖的用Licor 产的blocking buffer。直接用牛奶的话也很容易导致
背景很高。
在我的经验里，Licor Odessey 的灵敏度比Femto kit稍微低一点点，但是
绝对比普通的ECL强的多 |
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s******r
发帖数: 2876 | 37 谢谢，有空我再试一下，二抗跟别人借的，也可能有点问题。
我一直用Licor，我的经验是他的灵敏度要比ecl高。
我增经用过低于5ug的total protein上样，actin的结果也还是非常好。
要trouble shooting别人的问题，总是比较难。根据你的介绍，
我不知道blocking buffer是不是问题，在licor的manual里，
他有专门的blocking buffer的配方的，我一直用那个，配完后分装冻起来。
用milk和BSA据说都会减弱或者产生比较强的background。我们旁边的实验室
也有人用milk,但他们2抗用的浓度要大，1；2000。我一般用1：10000。
还有一个问题就是，不知道你的2抗是不是长期放在4度，时间太长会显著的降低他的灵
敏度的。
分装，放在4度尽量在1-2月内用完，最好。
别的，我也不知道了，你先试试，回头UPDATE一下进展。 |
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s******r
发帖数: 2876 | 38 是PVDF，millipore non-fluoscence的，用intensity 7.5，背景已经很高了，
anyway，想省钱大概是不行了。
你的那种绿色的膜背景很高啊，不知道你用的是不是Nitrocellulose?
如果你不小心用错了PVDF，会导致背景非常高！
另外，最好不要用牛奶。我的经验是，要么就用牛奶里面提纯的那个casein，
那么就乖乖的用Licor 产的blocking buffer。直接用牛奶的话也很容易导致
背景很高。
在我的经验里，Licor Odessey 的灵敏度比Femto kit稍微低一点点，但是
绝对比普通的ECL强的多 |
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m*****l
发帖数: 28 | 39 看你probe什么蛋白了。 有的抗体在Licor上work的不如ECL， 有可能是二抗的问题。 |
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d****i
发帖数: 2346 | 40 Licor相对方便，但是太敏感，背景太高。如果你要strip就更麻烦，远不如ECL的strip
后好用。 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 41 用了4年licor了。感觉比ecl灵敏。
如果用pdvf （我一般只用nc），二抗中加点sds可以降低背景 。
actin不出来，原因应该是二抗问题。
还有，我从来不干膜，总是湿扫。
他家有专门的strip buffer，管用。
1:5，但是我用1：10，室温20分钟，4度两小时。
tbst洗4遍，可以直接用别的一抗。
有时候tubulin去不干净。 |
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s******s
发帖数: 13035 | 43 嗯。其实还有点，不过太少了。我一般如果没信号，
就沾点新鲜的ECL,马上包上然后压2hour |
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n***w
发帖数: 2405 | 44 exposure久了出来的好多都是非特异性的诶。。。如果抗体好使的话，或者蛋白真在那
里的话，应该10分钟以内能搞定的。。。ECL。 |
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v***a
发帖数: 1242 | 45 我用ECL，觉得如果没信号，曝光1小时跟曝光2分钟没有两样 |
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s******y
发帖数: 220 | 46 有一团团的黑影，
是和最后加ECl的方式有关吗？ |
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m*********7
发帖数: 5207 | 47 前两天作WB。因为蛋白在细胞里丰度很低，所以用的是GE healthcare生产的ECL plus.
结果曝光时间不到5秒，整个blot就全黑了。通常这种情况下，我会等信号自然衰减，
大概2-4小时之后再去darkroom.但那天因为急着接孩子，我就突发奇想，把那张已经曝
光了的片子放在blot上，但是避开黑色的部分。把新的片子压在旧片子的上面，曝光十
秒，出来条带非常清晰。
反正那张废了的片子不用白不用，正好可以屏蔽信号。而且这样做也省时间。不过如果
你用phospho-imager，就不知道这招能不能用了。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 48 一秒钟手会晃，容易出鬼影
我也和楼主分享一下我的经验：就是把膜用PBST 洗一洗,
然后把ECL PLus 直接用PBS稀释5~6倍再放到膜上。 |
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v***a
发帖数: 1242 | 49 哈哈
我也碰到过
做co-ip的IgG
好黄好黄
刚倒上ecl-plus就有了 |
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m*********7
发帖数: 5207 | 50 不是的，背景和条带的ECL signal同样的被film削弱，这样可以在低背景下看到中等强
度的条带。否则的话，就是在很高背景下看到很强的条带。后者被scan出来的图就非常
难看了。 |
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