b********h 发帖数: 348 | 1 再补充1小点。没包子也没关系,因为10块钱也太少了,看不上 :)
我的问题就是:我准备样品的时候,需要control/treated的动物的tissue一样重或者
100%取下来,最后的结果control/treated才可以比较吗?
::理论上应该取100%,但是因为常常细胞数太多,可以homogenize之后跑同样的
percentage。比如都跑总sample的10%
--这个不一定,只要是均质的组织细胞,取够染色的细胞量就够了。因为如下所述,最
终得出的是各个细胞所占的百分比。
****需要注意每个sample染色的时候ideally是1个million,细胞太多抗体量不够,BD
抗体一般是按着1微升/1million细胞/100微升体积里.
flow cytometry最后的那个结果,反映的是某种polulation的cell的分布百分比,这个概
念对吗?我们每次杀动物的时候,那个tissue都很100%难取下来,每只动物都只能取下
一部分。
::反应的是某种population 的百分比。尽量多取吧,如果tissue是均质的,你也可
以只取一部分,比如如果是肝脏细胞,但是如... 阅读全帖 |
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h******u 发帖数: 602 | 2 Want to use hybridization/FRET probes to detect mRNA in cells. Flow
cytometry will be used to detect signal. Will Saponine be a good
permeability agent for DNA probes?
Thanks~~~~~~~~~~~ |
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J******s 发帖数: 7538 | 3 If flag-IL-17C could bind to surface IL-17RA or RE, after binding by surface
staining of anti-flag-dye, there should be signal in flow cytometry analysis
compared with without IL-17C control.
There is a shift, although not strong in histogram. |
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a****d 发帖数: 1919 | 4 it should work for flow
make sure you have no-transfected control population
do several different transfection dose may also help to tell the difference |
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k********u 发帖数: 7 | 5 I used pcDNA3.1-gene for overexpression transfection. If I wanna perform
flow cytometry analysis, shall I use transcient transfectants or stable
clones after selection for 2 weeks??? Thank you very much... |
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b******s 发帖数: 5365 | 6 R u trying to see the effect of transgene on cell cycle by transgene marker/
PI staining? Not an expert of cell cycle control,but why not go ahead and
do your transfection, take some cells to check with flow at 48hr and do your
colony selection side-by-side? you can compare the result 48hr vs 2 weeks
later
know
2 |
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s*****g 发帖数: 87 | 7 最近要检测一个蛋白的表达量,但是这个蛋白在细胞内的表达量很低
请教各位达人,以下哪个方法更灵敏,或者说更有可能检测到蛋白的表达?
1. Flow cytometry after treatment of FITC-conjugated primary antibody.
2. Western blot analysis using primary antibody and HRP-conjugated secondary
antibody
谢谢! |
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d******1 发帖数: 709 | 8 handy man should use Duo Flow |
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b******y 发帖数: 627 | 9 Duo Flow has its own temperature control? |
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n**********7 发帖数: 29 | 10 非常感谢!也在考虑confocal~phd读了两年,做的大部分实验都是用flow,感觉
tricky的地方太多,快被烦死了。。。 |
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d****i 发帖数: 2346 | 11 不了解fix以后表位有什么变化。flow的抗体应该是识别有高级结构的表位吧。 |
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n***w 发帖数: 2405 | 12 我不少抗体的公司的application只说的是flow,我拿来做IHC刚刚的。。。 |
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y******m 发帖数: 143 | 13 问有哪位大侠用过Millopore的guava flow cytometry.想请教如何输出数据和保存模板。
谢谢! |
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m*********n 发帖数: 158 | 14 想乘机问问有没有人有guava flow的上机手册;
楼里面有一台,但是没有手册,有谁有吗?
谢谢! |
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m*********n 发帖数: 158 | 15 想乘机问问有没有人有guava flow的上机手册;
楼里面有一台,但是没有手册,有谁有吗?
谢谢! |
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t*********g 发帖数: 182 | 16 刚接触flow,做个igm,positive跟negative的靠着,分不开。
看人家文献这两个population 分的很开的,
我这会是什么问题?
dye换了好几个,试了两个公司的antibody,都不行。
跪谢了! |
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d***s 发帖数: 1062 | 17 你这是要用ImageStream吗?普通flow cytometry染核干嘛呀 |
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d***s 发帖数: 1062 | 18 也不怎么高端,数据分析很简单,一步一步软件都会引导你的。花的时间和flow
cytometry的时间差不多。
reliable |
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L*********6 发帖数: 6 | 19 本中心很快会有一个技术员的职位空缺。
full time.
要求会使用流式细胞仪(flow cytometry, BD系列最好),口语流利,可以提高良好的
客户服务。
本科或者硕士毕业即可。
简历寄到:
l****[email protected] |
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b******g 发帖数: 841 | 20 请问板上有人会用doppler测小鼠coronary flow reserve嘛?可以请教一下技术问题吗?
麻烦站内联系!非常感谢!!! |
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T*****e 发帖数: 247 | 21 建议楼主把"但是用B蛋白染色这个表达A receptor的 cell line却染不上"和"flow
cytometry"解释清楚一些,我反正没看懂这是什么意思 |
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h****k 发帖数: 182 | 22 不好意思,没写清楚。这个实验我用B蛋白和表达A receptor的cell line一起incubate
, 然后加识别B蛋白的二抗(带荧光),最后在流式细胞仪(flow cytometry)上跑。表
达A receptor的cell line没有被B蛋白stain. |
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e********c 发帖数: 30 | 23 各位,请教个问题。做flow cytometry分析的时候,用的是wild-type的细胞做的
compensation,但是信号不够强。因为compensation只和dye有关系。可否这样,用于
compensation的group加dye后在四度时间放长一些,或者在室温放置,而样品还是放置
在4度30min。
这样compensation的信号应该会强一些,而且不会影响compensation的效果。这么说对
不对? 有没有这么做过?或者有什么其他的办法可以增强compensation的信号?
多谢! |
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t******n 发帖数: 33 | 24 一个荧光(Alexa Fluor 488)标记的antagonist可以抑制细胞表面的分子信号通路,
IC50在100~200nM。但是用这个AF488标记的antagonist染色target高表达的细胞系,
在flow cytometry上面看不见那个波峰向右边移动,请问大侠可能的原因是什么?谢谢
! |
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c***r 发帖数: 1132 | 25 Flow Cytometry: First Principles
这本书讲flowcytometry的,很适合入门者,先看看这个,了解一些基本原理,然后你
的很多问题就迎刃而解了。
这本书amazon有卖的,之前是第二版,现在不知道出到第几版了。 |
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G******n 发帖数: 289 | 26 我用的是1,有点损失,但是flow没有问题,sorting没做过 |
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f*****m 发帖数: 24 | 27 pharma company located in Massachusetts, looking for a head to lead the core
facility which was just built.
Requirement:
preferred PhD with a couple of year experience(either postdoc or industry
eperience).
solid immunology background.
strong technical expertise in handling Mass cytometry (CyToF),FACS and Flow
Cytometry.
Play manager role/ to be managing at least one scientist.
可以内推。职位要求管好仪器,提供sorting, 懂cytof data analysis, 会有机会自己
做science, 有兴趣的和背景相近的,简历可以发到 f*******[email protected]
有问题可以私信我。 |
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w******x 发帖数: 2769 | 28 statement of cash flow provides a break down and reconciliation. |
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h******e 发帖数: 1647 | 29 请推荐一本如何设计flow bin, hopper,silo的书, 介绍一下关于这方面的基础知识.
非常感谢. |
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b*******x 发帖数: 2469 | 30 制药工业中广泛使用granular flow的,
俺实验室有一大制药公司派来的在职博士做这个... |
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c****8 发帖数: 283 | 31 现在是master,老板是multiphase flow 搞cfd的,没有什么实验做。现在找工作也没
啥消息,在考虑是否要更老板phd。不知道这个方向phd值得不。
希望大家给些建议~ 小弟在此感谢 |
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a***h 发帖数: 283 | 32 请本版的牛牛们帮忙提供或推荐审稿机会。
本PhD研究专攻项目mixing, multiphase flow, rheology, CFD modeling, molecular
modeling。
与流体,传质传热,热力学等相关的都可以。
烦请站内联系,万分感激! |
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r****o 发帖数: 104 | 33 A postdoc position in Missouri University of Science and Technology is open.
The successful candidate will conduct research on nano-channel imaging using
our single cell and single molecule imaging system to investigate fluid
flow behavior of different fluids and gases in tight formations during
hydraulic fracturing. The postdoctoral fellow will design the experiments,
carry out the experiments, collect data and analyze the data. The
postdoctoral fellow will write monthly report on the progres... 阅读全帖 |
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f******e 发帖数: 125 | 34 请问大家,
有人用过如下的StopFlow吗。有一些问题想问一下。
是一个很老的型号。可以回我的Email。
Hi-TECH SCIENTIFIC
PQ/SF-53 PREPARATIVE QUENCH/STOPPED FLOW SPECTROFLUORIMETER
多谢了 |
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s*******y 发帖数: 60 | 36 我现在有个问题请教大家 用Synthesis tool产生的GDS和自己做的Analog circuit 放
在一起 不能做LVS 只能手动检查 据说cadence有Mixed signal的flow 不知道具体是如
何的 ? |
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D*******a 发帖数: 207 | 37 还是自己回答算了。现在找到的一个关键词是 is not unique。
用google找"signal flow graph" "is not unique" 还找到一点相关的东西。 |
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j****h 发帖数: 13 | 38 弱问一下,analog flow methodology 是作什莫的。。。 CAD?。。。谢谢大家:) |
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w*******p 发帖数: 253 | 39 There is one MFC, which was calibrated for 100sccm N2, can I use it for
100sccm Cl2? If Yes, will the flow measurement be accurate? Thanks. |
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s**********2 发帖数: 305 | 40 答案是肯定的。去网上找找换算公式就可以了。或者找那个flow meter的 manual看看
。 |
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n******h 发帖数: 2544 | 41 Hi,
I need a linux workstation with Cadence/Calibre/HSPICE pre-installed for
analog/mixed signal design flow.
Any one can help?
- Pls contact with message. thanks. |
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h******e 发帖数: 1647 | 42 请推荐一本如何设计flow bin, hopper,silo的书, 介绍一下关于这方面的基础知识.
非常感谢. |
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a***g 发帖数: 39 | 43 最近要买几个mass flow controller, 不知各位前辈有什么推荐,是做大气方面的,谢
谢! |
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k**t 发帖数: 3 | 44 想用FLOW-3D做个项目,有一些问题想请教。好像用的人不多,所以先看看有没人在用
,谢谢! |
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f******z 发帖数: 14 | 45 大概年底毕业吧,我有拖延症,磨蹭到现在才开始找……麻烦楼里有经验的前辈给点指
点!
地理系的PhD,但是因为老板主业是civil,但是在两个系兼职,所以主要是做水文模型
的,就是用matlab,C跑跑,算下flow,nutrient 在river network的
transport。因为在地理系,所以多少会点GIS的东西,用python处理下GIS
数据。然后跟风蹭了个统计系的打酱油master,大概会基本的统计理论,会些R,一些
SAS,上过数据库,会些SQL。反正乱七八糟什么都学了一些,但是都不太精……
我大概主要还是想找做modeler或者environmental consulting的吧,我现在知道的就
RMS,AIR两家公司,不知道前辈能不能给点指点?(弱弱的说,虽然挑剔不好,但是我
还是不想做engineer,而且我也没PE什么的,也做不了)
Post-doc也在找,但是好多都是在村里的,我实在是不想去村里,所以想先找找工作看
。或者有什么城里的post-doc职位推荐么?先谢谢帮忙! |
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a***n 发帖数: 578 | 46 what you mean? this was a proposed idea in our group that didn't get funding.
then none keep working on it.
The idea came from that nanotube bundle will be bent if you apply electric
voltages at both sides of bundles. This was published at science three years
ago. Then we proposed that if to put nanotube bundle into fluid, the flow will
bent the nanotube bundle and so that change the voltage over the bundle.
six
nonlinear |
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c*s 发帖数: 2145 | 47 O..really?
admire//
funding.
will
012,
India.
flow.
in
past
work
sensors |
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c*******n 发帖数: 1648 | 48 You are absolutely right, I will not try to stupidly compete with you guys on
FEA, design..But I feel in polymer, that all disciplines(chemistry, physics,
ME, CE...) are not well connected with each other. As you said, all kinds of
problems need to be solved together. For example, a good constitutive
equation, the most basic requirment for simulating polymer flow, is very hard
to formulate. The best constitutive equations by now are from the combination
of
macroscopic fluid mechanics and micros |
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b****y 发帖数: 44 | 49 准备定课题了,主要做flow control和流体建模。据说前景不错,但是不知道该把重点
topic放在什么地方,比如说valve control?谢谢! |
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h****l 发帖数: 7290 | 50 I do not think valve control belong to flow control |
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