由买买提看人间百态

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全部话题 - 话题: smear
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s******y
发帖数: 28562
1
来自主题: Biology版 - Does BCL-xl get ubiquitined?
我不知道这个蛋白是否会泛素化。
但是,蛋白泛素化一般是不能直接看到smear的,因为泛素化的比例一般都不超过该蛋
白的1%。要看smear一般需要同时transfect 6His-Ub, 或者HA-Ubiquitin,
然后要么pulldown his tag and then use your protein antibody to check the
smear, or pulldown your protein and then use HA antibody to check the smear
U******u
发帖数: 5829
2
来自主题: Biology版 - 力刀新年贺词: 为CMG服务
shyj: 我的考版match路--以此文纪念在美国逝去的10年青春
http://mitbbs.com/pc/pccon_2289_t379_150975.html
发信人: shyj (baobao), 信区: MedicalCareer
标 题: 我的考版match路-以此文纪念在美国逝去的10年青春 (很长很罗嗦,慎入!)
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Apr 3 17:31:55 2010, 美东)
Match的结果终于尘埃落定,周1等电邮的时候非常紧张,因为成败就在此了,虽然一直
告诉自己,今年只是热热身,成败都可以接受,但到真的揭晓的时候,还是很紧张,毕
竟一旦卷入其中就身不由己,何况自己也还是有所付出。到周4等match program的时候
虽然也有点紧张,但程度已经大大减少,1个原因是毕竟match上才是头等大事,去哪里
尚在其次,还有1个原因是心理还是有所准备了,虽然希望留在home school,但直觉告
诉我恐怕是非常困难了,在我rank list上第二位的program应该就是我要去的地方,果
不其然。经过几天的等待,发现果然是要搬家了。
对于我... 阅读全帖
d*********n
发帖数: 18
3
this one of my CS protocols, hope can help whoever going to take the test, I
don’t need any more.
not perfect, but good to figure out diagnosis, should not miss the diagnosis
,
do not need to ask all questions , must adjust base the case,
if better ideas, pleas modify to make easier for people who may need
Amenorrhea
Mental check list:
Pregnancy,
hyperprolatinemia,
hypothyroidism,
PCOS,
premature menopause,
depression
asheman syndrome,
anorexia nervosa,
strenuous exercise
Patricia Garrison, a 36... 阅读全帖
p********1
发帖数: 2785
4
保存一段傅苹的回应。这女人开始撒泼打滚了:
http://www.huffingtonpost.com/ping-fu/sad-but-not-broken_b_2603
Sad, But Not Broken
Posted: 02/01/2013 10:41 pm
Read more
Ping Fu , Bend Not Break , Bend Not Break Controversy , Memoirs , Books News
share this story
Submit this story
I am shocked, heartbroken and deeply saddened by the smear campaign that is
taking place against me personally and my book, Bend, Not Break, which was
published on Dec. 31, 2012.
It took six years of personal exploration and encouragement from ... 阅读全帖
s**********w
发帖数: 866
5
Q: Did you expect Chinese nationalists to attack your credibility?
This caught me totally by surprise. I thought maybe there would be some
negative grumblings, but I never expected anything like this.
Q: How do you explain the intensity of the attacks against you?
Forbes did an interview with me, and Forbes translated that interview in
Chinese. The translation had some errors in there. … But what really
happened is the Forbes article comes one day after The New York Times broke
the story about t... 阅读全帖
h*********g
发帖数: 9102
6
来自主题: Military版 - 买买提被外F抱怨了 (转载)
【 以下文字转载自 Dreamer 讨论区 】
发信人: Dreamer (不要问我从哪里来), 信区: Dreamer
标 题: 买买提被外F抱怨了
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Aug 31 18:31:05 2015, 美东)
外F们说你们这些索男心中充满了嫉妒和愤怒才会说她们是公车,那些白人才不认为她
们cheap是公车。 反waiF的过去战斗么。。。。
http://www.quora.com/How-do-Asian-guys-feel-about-Asian-women-d
This is an interesting question, and... I think most of the answers here don
't do the topic justice. I don't know about other Asian countries, but I do
know a lot about how some Chinese guys feel about Chinese girls dating white
guys.
They hated ... 阅读全帖

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7
来自主题: Military版 - 12 月26日 可能的真相
【Filariasis
From Wikipedia, the free encyclopedia
Filariasis
Life cycle of Wuchereria bancrofti, a parasite that causes filariasis
Classification and external resources
Specialty Infectious disease
ICD-10 B74
ICD-9-CM 125.0-125.9
Patient UK Filariasis
MeSH D005368
[edit on Wikidata]
Filariasis is a parasitic disease caused by an infection with roundworms of
the Filarioidea type.[1] These are spread by blood-feeding black flies and
mosquitoes. This disease belongs to the group of d... 阅读全帖

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8
来自主题: Military版 - 中美进入你死我活新时代
12月27日 为什么我要替中国辩护
我要替中国辩护,并不是因为我是一个中国人,而是因为我知道中国就和这世界上绝大
数的国家一样,虽然有很多丑陋的现象,但是他们是受害者。就
象这个犯罪集团里很多的人一样,他们来自各种种族,他们可能充当了工具,但他们不
是制造这一切,谋划这一切的人。虽然经常会暴露中国产品出现问题。但要知道中国是
世界工厂,他们只是打工者,他们只是按照各种雇主提供的配方来生产,他们并不知道
他们会产生怎样的后果。或者这些工人知道后果,但他们只是奴隶,他们又如何去改变
这一切? 所以,当我的调查不断往前推进的时候,不可避免地会涉及各国的企业,但
这并不表明是针对这个国家或这个国家的人民,而是针对一种社会现实和丑陋现象。就
拿菲律宾来说,菲律宾是一个犯罪猖獗的国家,有很多犯罪分子,但是菲律宾人民却是
这个集团的受害者,他们/她们被绑架,沦为了牺牲品,人体实验对象。一个日本人,
强奸上千名菲律宾女孩,却没有受到惩罚。以前我也提到过,有20个国家的名单,这20
个国家的人民其实都是受害者。现在他们把矛头对准中国,或许仅仅是因为我揭示了他
们图害世界人民的内幕,而我是一个中国人的缘... 阅读全帖

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9
12月27日 为什么我要替中国辩护
我要替中国辩护,并不是因为我是一个中国人,而是因为我知道中国就和这世界上绝大
数的国家一样,虽然有很多丑陋的现象,但是他们是受害者。就
象这个犯罪集团里很多的人一样,他们来自各种种族,他们可能充当了工具,但他们不
是制造这一切,谋划这一切的人。虽然经常会暴露中国产品出现问题。但要知道中国是
世界工厂,他们只是打工者,他们只是按照各种雇主提供的配方来生产,他们并不知道
他们会产生怎样的后果。或者这些工人知道后果,但他们只是奴隶,他们又如何去改变
这一切? 所以,当我的调查不断往前推进的时候,不可避免地会涉及各国的企业,但
这并不表明是针对这个国家或这个国家的人民,而是针对一种社会现实和丑陋现象。就
拿菲律宾来说,菲律宾是一个犯罪猖獗的国家,有很多犯罪分子,但是菲律宾人民却是
这个集团的受害者,他们/她们被绑架,沦为了牺牲品,人体实验对象。一个日本人,
强奸上千名菲律宾女孩,却没有受到惩罚。以前我也提到过,有20个国家的名单,这20
个国家的人民其实都是受害者。现在他们把矛头对准中国,或许仅仅是因为我揭示了他
们图害世界人民的内幕,而我是一个中国人的缘... 阅读全帖

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10
来自主题: Military版 - 12月28日。 答案
12月28日 仔细阅读以下文章
或许这些文章可以告诉你们孩子被伤害病毒的答案。
Astellas Pharma 应该和这些人体实验有莫大的关系!
Founded 2005; 11 years ago
Headquarters 2-5-1, Nihonbashi-Honcho, Chūō-ku, Tokyo 103-8411, Japan
Key people Yoshihiko Katakana
(President and CEO)
Filariasis
From Wikipedia, the free encyclopedia
Filariasis
Life cycle of Wuchereria bancrofti, a parasite that causes filariasis
Classification and external resources
Specialty Infectious disease
ICD-10 B74
ICD-9-CM 125.0-125.9
Patient UK Filariasis
MeSH ... 阅读全帖
c*******e
发帖数: 5818
11
trump 的 acceptance speech 吸引了 ~33M people,比 H多近5M,显然,人们对
trump 有更多的好奇心,直接各大电视网的调查,》60% 的人 对speech 和 trump 持
positive 印象。
原因很显然,Hillary 已在公共视野~30年,几乎是丑闻一个接一个,大部分人都无意
投她,加上大气候民主党已执政快八年,每个人心里都有本帐,既然~70%的 认为是
wrong track,换人换党的心态 明显。
为什么还 没决定,就是想看看 trump 能不能当总统, 所以attention几乎都在trump
身上,trump 的策略就是 身体力行 到处走透透,这比 TV aids 什么的有效多了。然
后通过社交媒体等,以接近耳语的形式 传递信息。
再一个,trump 是个unconventional 候选人,以前的很多playbook 都不太好使,他说
过哪些话,要是放到别人身上,都死好几回了,但到他这儿,不是给pass,有时候到还
涨分。所以现在媒体搞得这个smear,哪个smear,其实都是noise,不会swing 多少
meaning... 阅读全帖
c*******e
发帖数: 5818
12
什么可汗,judge,都是Msm 搞出来smear trump的,trump 无非就是说了几句 ,还是
回应,他要是像政客滴水不漏的说,根本走不到今天。
这次选举,大家还没看出来吗,核心 不是 about trump,他只是 messager。 核心是
美国选民对 过去2,30年政府政策和这些elite 政治class 的 一个公投。
左派这边选的是sanders,他也不是民主党,但dnc 控制力强,生生把sanders 给掐死
了。
gop 这边要不是 trump自己战斗力强,也早被搞下去了,现在还继续搞。
trump 之所以被这么多 revolt 的 选民支持做messager,就是他敢于push back
anything,say what it is。 至于是不是过分了,这些人不太在乎,在乎的是打回去。
sanders投诚气疯多少他的fans。
这里些右派要是看不了msm smear,关TV,捐款,逗逗孩子,到11月去投就行了。 记得
初选时有个右派因为trump debate 表现不专业,一气之下说trump 不做功课,无可救
药了走了。 这不初选也大胜了。
trump 输赢... 阅读全帖
l***o
发帖数: 7937
13
挑波老川和半农。A war between White House globalists and nationalists.
Globalist Panic: Morning Joe Revives ‘President Bannon’ Smear as
Nationalism Gains Traction in White House
In what is becoming the ultimate “tell” that the globalists are losing
ground, Joe Scarborough on Sunday revived his “President Bannon” smear. Of
course, Scarborough may have his own motivations to push Trump to appease
the “No Labels” crowd and his new friends at Harvard. He apparently is the
top mouthpiece for the White House’... 阅读全帖

发帖数: 1
14
多年前曾突发急性尿路感染,尿血,很痛,医生开了三天的抗生素点滴,和一星期的左
氧氟沙星口服,之后症状缓解,但从此尿频尿急,同时妇科检查有霉菌性阴道炎,医
生也是开了口服抗生素和洗液,时好时坏,有次特别痒就挂了几天点滴,之后很久没犯
。来美国三年后复发,半夜尿血尿疼,自己吃了几天从国内带来的氨苄西林,症状缓解,
预约了个YELP上评分不错的妇科医生,等了三周才见到,顺带做了妇科年检,尿检和
CULTURE, 在pap smear 前接的尿液sample,医生说太少了lab不能测试,得过这个病
的朋友就知道UTI就是尿频尿急但是每次尿量又很少,于是喝了两瓶水在做了PAP SMEAR
后立即重接了尿液样本,lab检查结果Urine Blood 2+ ,WBC/HPf 0-2 /(hpf)
, RBC/HPF 0-2 /(hpf) 0 - 2 /(hpf),Urine Epithelial Cells Few /(
lpf) ,Urine Bacteria Moderate /(hpf),Urine Mucous 1+ /(lpf),
细菌培... 阅读全帖
s*****d
发帖数: 2667
15
If you didn't do peap smear for last one year, call them again and say you
want to do pap smear.
It's better to do this before you get preganant, pap smear during first
trimester pregnancy might cause spotting. It may scare you.
c**********0
发帖数: 836
16
来自主题: NextGeneration版 - 13周第二次见OB,内检少量出血
pep smear 会有spotting和轻微腹疼。我上星期做了pep smear后spotting持续了一天
多,然
后就好了,只要没有鲜血就好。我上星期在网上查了,出血是cervix,不会影响孩子。

Midwife
cheese
,然后做了
pap smear,接着又做了指检,并且告诉我可能会有少量出血。
d******n
发帖数: 135
17
我的孕早期经历了brown spotting,早孕反应突然消失,胎心过慢等一系列恐吓,最后
还好有惊无险的平安度过了孕早期。我没有补黄体,卧床等等。
============我是唐僧的分界线====================
计划开始备孕的前一个月,我怀上了。杯具的是不知排卵日,做功课日,以及月经周期
长短。估摸着应该是快5周的时候第一次出现褐色分泌物了。我在班上考古后觉得应该
去看医生,可是ob放假去了,我就临时另约了一个ob,第二天火速去看他。ob做了阴超
后只发现了我有一个正常的子宫,别的啥也没看到,又抽了血就打发我回家了。回家后
我就没有褐色分泌物了。
第二天临时ob打来电话说我的hcg只有324,需要等它升到1500+才可能用阴超观察到生
命迹象。我听了还挺放心的,加上我的褐色分泌物也没了,我就打算安心等着自己的ob
回来了。
这样过了一个礼拜,临时ob的护士打电话给我,要我再去做一次阴超,因为他们怀疑我
宫外孕,会很危险,有大出血,切掉输卵管和卵巢,以后生不出娃等等后果。这个大嘴
腹黑负责任的护士就像一朵乌云在我的孕早期华丽出场了!她说我的hcg太低,疑似宫
外孕。我... 阅读全帖
h********l
发帖数: 239
18
来自主题: NextGeneration版 - 第一次见OB,从喜到悲
昨天10周1天,第一次见OB。一大早我和LG都很高兴,盼望着跟肚子里的小人初次见面
。我没有机会挑OB,诊所谁有空就谁了,是一个女医生。随便聊了几句后就进了B超室。
之前版上看到过早孕做pap smear或阴超出血的帖子,有点怕。所以怀孕前我就在学校
医院做了pap smear。医生说这项不用再做了,可还是给我做了阴道检查,跟pap smear
的physical exam很像。可能是我不够放松,弄得挺痛的。至于阴超,本来还在纠结要
不要跟医生商量做腹超,后来因为迫不及待地想要看到小人,还是让医生决定算了,结
果自然是阴超。果然看到小人了,头和身子差不多大,心跳169,还会动几下。拍了照
片,快乐地和LG抢着看。
回家后就开始悲剧了。先是肚子痛,应该跟检查或者阴超有关,没有太在意。吃过饭去
mall里逛了一小会儿,上厕所发现有淡红色,开始觉得不对劲,于是赶紧回家。又上了
几次厕所,每次都发现有淡红的分泌物,马上紧张起来了。之前没有过spotting,一旦
发生心里就七上八下的。然后做了最不应该做的事,上网乱搜国内的网站。结果不幸地
看到几个阴超后流产的例子,心里越来越纠结。想想上午开心... 阅读全帖
s**********d
发帖数: 1536
19
来自主题: NextGeneration版 - 报告12周b超和检查
刚刚检查完回来。看见了活蹦乱跳的宝宝,听到了传说中的小火车声音,心跳150。我
和lg很高兴:)
b超完了就是全面体检,等了半天,终于开始。照常归每次都验尿。查血压。
先是根据b超大小再次确定我的due day。然后问我关于做不做first trimester screen
的决定(上次护士说根据我的情况不
是必须的)。我和lg决定做。于是今天最后去抽了一管血,4周后说再去抽2管。2次结
果最后出一个我的risk的比率。
然后报告上次血检的结果,主要是血型,hiv,乙肝阴性。还有风疹,麻疹的抗体我还有
这些。
体检还做了pap smear。。有点担心。不过医生说她给孕妇做pap smear做了30年了。也
没有科学证据说会导致流产风险。
回来上网看很多人孕期都不做的。 还是很担心。大家怎么想的?做过的mm来说说。
最不舒服的是检查我的趾骨。觉得她手有点重。结果说根据我的身高和趾骨位置,判断
我能生一个up to 8lb的宝宝。
很开心,一直反应不大,心里还总担心宝宝发育,现在很安心(除了pap smear这个)
报告完毕:)
l****w
发帖数: 1281
20
来自主题: NextGeneration版 - 要第一次见ob了,有些疑问请指教!
pap smear可不是在阴道口抹一下,pap smear是检查宫颈,妇科年检最重要的一部分,
看看有没有非典型增生,HPV等,一定要取宫颈上皮细胞才行。所以才会把阴道撑开,
取一点宫颈上皮细胞,还是会刺激到宫颈的。
但是我不认为这个小小的刺激会引起流产,如果流产了也不一定就跟这个有关,美国这
边讲怀孕的任何阶段都可以sex的,sex的时候对宫颈的刺激可比pap smear大多了。早
期流产大多数是胎儿的原因,少数是母体激素的原因,外界刺激引起流产都是巧合,要
么就是因为以上原因,外界刺激trigger了一下而已。
M****a
发帖数: 11261
21
好像很多abnormal pap smear自己会好,因为是virus infection,自己的抗体很多时
候能抗得住,不需要治疗。不过pap smear不正常的话要每年都做follow up的pap,如
果HPV infection没有消失的话要开始治疗,一般从不正常的pap smear到恶化成cervix
cancer可能要二十年的时间,所以不用太担心了。不过像这种情况能不能现在要孩子
我就不知道了。

发帖数: 1
22
多年前曾突发急性尿路感染,尿血,很痛,医生开了三天的抗生素点滴,和一星期的左
氧氟沙星口服,之后症状缓解,但从此尿频尿急,同时妇科检查有霉菌性阴道炎,医
生也是开了口服抗生素和洗液,时好时坏,有次特别痒就挂了几天点滴,之后很久没犯
。来美国三年后复发,半夜尿血尿疼,自己吃了几天从国内带来的氨苄西林,症状缓解,
预约了个YELP上评分不错的妇科医生,等了三周才见到,顺带做了妇科年检,尿检和
CULTURE, 在pap smear 前接的尿液sample,医生说太少了lab不能测试,得过这个病
的朋友就知道UTI就是尿频尿急但是每次尿量又很少,于是喝了两瓶水在做了PAP SMEAR
后立即重接了尿液样本,lab检查结果Urine Blood 2+ ,WBC/HPf 0-2 /(hpf)
, RBC/HPF 0-2 /(hpf) 0 - 2 /(hpf),Urine Epithelial Cells Few /(
lpf) ,Urine Bacteria Moderate /(hpf),Urine Mucous 1+ /(lpf),
细菌培... 阅读全帖
s******n
发帖数: 2279
23
Primary care of gay men
Author
Harvey J Makadon, MD Section Editor
Robert H Fletcher, MD, MSc Deputy Editor
Pracha Eamranond, MD, MPH
ISSUES TO TARGET — There are few population based studies of
health issues in gay men on which to base recommendations. Based on clinical
experience and epidemiology, we feel that there are a number of areas in
which clinicians providing primary care to gay men should provide additional
emphasis beyond what they might focus on in heterosexual men. We agree with
a ... 阅读全帖

发帖数: 1
24
来自主题: Returnee版 - 中国骨干人才正在流失海外
12月27日 为什么我要替中国辩护
我要替中国辩护,并不是因为我是一个中国人,而是因为我知道中国就和这世界上绝大
数的国家一样,虽然有很多丑陋的现象,但是他们是受害者。就
象这个犯罪集团里很多的人一样,他们来自各种种族,他们可能充当了工具,但他们不
是制造这一切,谋划这一切的人。虽然经常会暴露中国产品出现问题。但要知道中国是
世界工厂,他们只是打工者,他们只是按照各种雇主提供的配方来生产,他们并不知道
他们会产生怎样的后果。或者这些工人知道后果,但他们只是奴隶,他们又如何去改变
这一切? 所以,当我的调查不断往前推进的时候,不可避免地会涉及各国的企业,但
这并不表明是针对这个国家或这个国家的人民,而是针对一种社会现实和丑陋现象。就
拿菲律宾来说,菲律宾是一个犯罪猖獗的国家,有很多犯罪分子,但是菲律宾人民却是
这个集团的受害者,他们/她们被绑架,沦为了牺牲品,人体实验对象。一个日本人,
强奸上千名菲律宾女孩,却没有受到惩罚。以前我也提到过,有20个国家的名单,这20
个国家的人民其实都是受害者。现在他们把矛头对准中国,或许仅仅是因为我揭示了他
们图害世界人民的内幕,而我是一个中国人的缘... 阅读全帖
b*********s
发帖数: 5382
25
☆─────────────────────────────────────☆
tsa (tsa) 于 (Sun Dec 19 23:44:18 2010, 美东) 提到:
前天去校医院,医生跟我说建议我做下妇科检查,这样有没有问题都好放心。其实
从我大四以来,前后有三个医生建议我做妇科检查,但是我妈都跟我讲说女孩子是不可
以做的,结婚之后才可以。第二次医生要求,已经在美国,我看到那个检查器了,看着
好像会很疼的样子,医生最后用棉签给我弄了点东西去化验的。这回医生又这样说,而
且保险公司也跟我讲过,我必须每年做一次妇科检查,不然的话,出了什么妇科疾病,
保险公司是不负责的。
昨天两个护士把我关在一个检查室里面跟我聊天,讲一些其实我知道的知识,她们
把我当成一个伊斯兰女性一样地教育,我很郁闷。其中有一个护士跟我讲,她7岁的时
候就没有处女膜了,因为她学骑自行车,男式的那种,她直接掉在横杠上,出血了。我
从小受到的教育是很传统,可是让选择保留处女膜和健康,居然如此艰难。理智地说,
我应该接受检查,可我总是担心啊,如果我的男朋友,以后的老公不再相信我是处女我
怎么办?
... 阅读全帖
x****y
发帖数: 1853
26
"Other compromises are wavy mustache-type distortion, very strong chromatic
aberration (CA) and strong purple fringing in high contrast edge transitions
around bright areas. But, all of these can be corrected in post. Adobe
Lightroom version 4, which includes a profile for this lens, is effective at
correcting all of these problems. Point light sources towards the edges
will reveal strong coma smearing wide open, mostly gone by f/4 and appears
to be gone around f/8."
其实暗角和红移都不是什么大问题。图像处理软件(Corne... 阅读全帖
e*******e
发帖数: 6165
27
来自主题: LES版 - 宫颈癌
我觉得隔几年还是做一下,对身体没有任何伤害,保险也cover,why not?
---------------------
http://www.mayoclinic.com/health/pap-smear/AN01635
In most cases, cervical cancer is caused by a sexually transmitted infection
called human papillomavirus (HPV). If you've never had any type of sexual
intercourse, you're unlikely to have HPV. However, there are other risk
factors for developing cervical cancer, such as family history and smoking,
so talk to your doctor if you have concerns.
For effective cervical cancer screening, th... 阅读全帖
h*****d
发帖数: 210
28
来自主题: Biology版 - EMSA-Gel shift assay
加蛋白probe是不一样的, it is smear, but there is not a single distinct
probe. Could have some reasons for this, first of all, probe denaturing and
annealing is not good, I bought oligonucleotide, because it is highly
purified. the free probe is also smear which is about half length of the
smear with protein.
secondly, when I extract nuclear protein, I just use 250M sucrose in the
extraction buffer for nuclei and no further gradient centrifuge thereafter.
High/low salt method for getting nuclear protein(
e****p
发帖数: 354
29
来自主题: Biology版 - 求教cDNA 测序问题
酶试了几种高保真的 PFU等 还有什么MIX的酶
是对,引物很不好设计。引物也试了几对, 外围的引物弄过一对,有SMEAR 但预期是
是5-6K开始SMEAR, 结果是1K开始SMEAR DOWN, NESTED 就是更短的100,200 BP 的几个
产物。不知道怎么回事?
shuttle pcr 是什么到时没有试过
b*****n
发帖数: 1841
30
来自主题: Biology版 - Tissue 中的GFP 信号保存问题
一个knock in 的老鼠,目的基因与GFP融合表达。我的目的是让GFP和其它抗体共染色。
发现如下:
Harvest tissue,fix with 4% PFA overnight at 4 degree,切片后GFP无需染色可见
微弱信号,但是其它的抗体无法染色
如果直接用OCT在干冰上速冻,切片后再用4% PFA固定,其它抗体染色没有问题,GFP的
直接信号不可见,GFP抗体染色后一片smear,但是与control无GFP的tissue相比可明显
看到smear的GFP信号。
如果fix with 4% PFA for 2 hours at RT,然后incubate with 30% sucrose
overnight,那么GFP和其它抗体的染色都没有问题。
虽然我根据别人的protocol找到了解决的办法,但是一直想不清楚为什么。
为什么4% PFA固定过夜其它抗体就不能染色?为什么速冻后再用4% PFA固定,GFP信号
减弱或者变得smear?为什么固定两小时再用sucrose处理,则GFP和其它抗体的染色都
得到恢复?
大牛出来解答一下原理。
H*******i
发帖数: 196
31
1.没有突变有两种可能,一种是dpn1处理不完全,第二(某些设计中)如果你的引物5
’可以匹配一段序列,但是3'是突变,那么似乎高保真酶可以把3’切掉,完成PCR,另
外从smear可以看出,你PCR进行得并不好,如果目标片段之中有什么重复序列相似序列
,出现deletion也是很可能的。 我见到smear最多的就是multimer,如果你引物设计如
果做得和cpec最后一步一样,smear可能性非常高
2.pfu按照NEB说法只有6x的保真性,所以肯定要测序(尤其是引物部分,2.5K用不了10
对引物),克隆做多了 phusion Q5突变都是一堆一堆的。

digestion
s******y
发帖数: 28562
32
来自主题: Biology版 - SYBR real-time PCR误差很大?
这个我不太同意。
首先,这两者的理论sensitivity的确差不多,而且在某种程度上来说,Sybr green因
为信号强度大,其实在检测上更容易被仪器看到。不过,你要是真的两者都做一次你就
知道了,对于含量特别低的样品,Sybr green的信号强度根本没有什么用,因为不同重
复孔跑出来的差别太大了(类似楼主看到的这个问题),导致那些跑出来的常常都是废
数据,所以真实的有效敏感度没有那么高。
另外,你可能对Taqman 的特异性的理解有些偏差。那个fluorescent probe, 要产生荧
光必须有两个条件:1,必须在template 上有PCR reaction 在进行; 2。probe 必须
能够结合在template 上面。必须两个条件同时满足,缺一不可,如果仅仅是probe非特
异结合是没有荧光的。
但是对于Sybr-green, 只要满足第一个条件就可以有信号了。
这样一来,Taqman qPCR 和Sybr-green 的特异性向比较就类似于Nested PCR 和普通
PCR的差别,前者在理论上肯定比后者更特异。
另外,Sybr-green 对于高Ct 的样品,光... 阅读全帖
k**e
发帖数: 2728
33
☆─────────────────────────────────────☆
Mcdoudou (laowu) 于 (Fri Sep 10 01:50:41 2010, 美东) 提到:
看这个版也有几年了,一直觉得这个版挺和谐,有很多有用的帖子。我一般不大记得住
ID, 能记住的有老刀,acne, teabao, Eric, 还有一个前版主(个人偶像:此人在IT
浪潮时下海做了码工,考板热时成功考板match, 不记得ID了,只记得他的头像是他女
儿,极cute)。不过最近有点乱,有英语语法癖 (个人很反感,尽量跳过,跳不过就
只好当吃苍蝇了),有26岁问自己是不是太老的(use you common sense, please),
这不又有99er考经是不是炫耀贴。平心而论,有些是有一些炫耀的意味在里面。不过呢
,一是有可能不经意的,二是不影响交流。现在可好,有人抱怨一下,有人砸,乱了套
了。现在我带头发一下我的非99er考经和不成功的match经历。
个人情况:male, 老CMG, (15+), Ph.D无绿卡。
Step1: 06年3月底ebay拍到Kaplan ... 阅读全帖
R******7
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好不容易找到一份工,因为TB test在2004年就positive,叫去做CXR,又有right
apical infiltrate,不让开工啊!我没有TB的syptoms, 连咳嗽一声都没,但医院一
定要我去做sputum smear 和 culture。是不是3次sputum smear都没事就行了?听说
sputum smear 结果2天就知道,culture要6个星期啊。有没有相同经历的?咋办啊?真
是烦死人!
s********n
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你们自己看一下。 这个网站貌似是香港人或者台湾人搞的网站。
http://multipletext.com/2010/9_deputy_sheriff.htm
The following is the main point of an article penned by the chief Beijing
correspondent for Morning News (新闻晨报驻京首席记者):
There was a time when I began to wonder from where Fang got money to support
himself and his family. Later Professor Xiao Chuanguo (肖传国教授) launched
defamation case against Fang in a US court and asked his US lawyer to
investigate Fang's website that is largely used to publically smear anyone
and anyt... 阅读全帖
p********1
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36
http://jqzheng.org/weblog/
Defending the Indefensible?
Posted on 2013-02-04
When I was watching Sorkin’s Newsroom, i loved its wit. But i didn’t
relate too strongly with the show, because i didn’t really think the US
media is as bad as Sorkin was trying to portray: jaded, sensationalism,
interested in the rating only, not interested in exposing the truth.
In real life, none of the media focus has been anything I can vouch for, so
even when i took a side, it was mostly based on my judgement on... 阅读全帖
d*******u
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来自主题: Military版 - The Life Out Loud: Under Siege
http://www.huffingtonpost.com/meimei-fox/bend-not-break-memoir_
狐妹妹的反击!
Bend, Not Break: A Life in Two Worlds, the memoir I wrote with and about
Geomagic CEO Ping Fu, hit bookstores and e-readers on December 31, 2012. The
Western press had an overwhelmingly positive response to this remarkable
tale of Ping's journey from China to America, from nobody to somebody, and
from immigrant with almost no money or knowledge of English to executive at
the top of the American tech world. We received excell... 阅读全帖
m********o
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38
来自主题: Military版 - ZT: I don't believe her story
This is the best I have seen:
Why I gave five stars?, February 8, 2013
By Thomas Leblance
This review is from: Bend, Not Break: A Life in Two Worlds (Hardcover)
My following review and the five stars I gave before are as true as this
book.
----------------------------------------------------------------------------
-------
I gave five stars because every story bad about other country - especially
China must be fantastic true story, and makes me feel how fortunate I am not
living there. If not tr... 阅读全帖
p********1
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User:ParisaprilFrom Wikipedia, the free encyclopediaJump to: navigation,
search [edit] Ping Fu Controversy[edit] SummaryPing Fu is a Chinese American
business woman, currently resides in the United States. She is the co-
founder and CEO of Geomagic, a 3D software company. Her memoir "Bend, Not
Break - A Life in Two Worlds" described her journey from China's Cultural
Revolution to a high tech CEO in America. However, upon the memoir
publication, a major controversy erupted over the author's depic... 阅读全帖
l*****7
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40
来自主题: Military版 - 这是绝对真理!!!
http://www.huffingtonpost.com/2013/06/17/edward-snowden-spy-chi
Edward Snowden: I'm Not A Spy For The Chinese
AP/The Huffington Post | Posted: 06/17/2013 1:58 pm EDT | Updated: 06/17
/2013 2:01 pm EDT
WASHINGTON -- NSA leaker Edward Snowden is defending his disclosure of top-
secret U.S. spying programs in an online chat Monday with The Guardian, in
which he rejected allegations that he is spying for the Chinese and attacked
U.S. officials for calling him a traitor.
"No. I have had no contac... 阅读全帖
t***h
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来自主题: Military版 - Snowden 在twitter上回答网友问题
12.43pm ET
Final question from Glenn Greenwald:
Anything else you'd like to add?
Answer:
Thanks to everyone for their support, and remember that just because you
are not the target of a surveillance program does not make it okay. The US
Person / foreigner distinction is not a reasonable substitute for
individualized suspicion, and is only applied to improve support for the
program. This is the precise reason that NSA provides Congress with a
special immunity to its surveillance.
12.41pm ET
Q... 阅读全帖
w********9
发帖数: 8613
42
来自主题: Military版 - 惊讶于德国人的英语能力
这是Shorter Oxford American English Dictionary第五版列出的与德语或者日耳曼语
相关的英语词根或词汇。
-at, suffix2. + -dom, suffix. + -ed, suffix1. + -ed, suffix2. + -en, suffix1
+ -en, suffix2 + -en, suffix5 + -en, suffix6 + -er, suffix1. + -er, suffix3
. + -er, suffix5. + -est, suffix1. + -est, suffix2. + -et, suffix2. + -eth,
suffix1. + -hood, suffix. + -ing, suffix1. + -ing, suffix3. + -ish, suffix1.
+ -kin, suffix. + -le, suffix1 + -le, suffix3 + -less, suffix. + -ling,
suffix1. + -ling, suffix2 + -ly, suffix1. + -ly, s... 阅读全帖
d*b
发帖数: 21830
43
PubMed里文章一大堆,这个都成行业标准Procedure了。欲龄女子去医药查pep smear,
人医生要没发现positive的evidence,一般都问是否结婚,是否single partner,如果是
single partner的话,下一次pep smear是5年后而不是每年检查一次。
跟他妈的包屁有屁关系。你不接触病毒,身上哪来的病毒?
r*******g
发帖数: 5495
44
来自主题: Military版 - 老婆的妹妹得了HPV
你老婆的妹妹多大了?
如果小于30岁,即使感染HPV,一年内自己也会把HPV干掉,所以没事,放心。如果实在
不放心,做一个Pap smear,如果结果正常,没事。如果异常,根据异常程度,医生会
酌情处理。
如果大于30岁,去做一个Pap smear或HPV test,如果结果正常,没事。如果异常,根
据异常程度,医生会酌情处理。
HPV有几十种亚型,最有危害的就4个亚型,其中2个亚型(16, 18) 会导致宫颈癌,另外
两个(6, 11)导致尖锐湿疣。现在11-26岁女性有HPV疫苗,市场上最普及的是 Gardasil
对这4个亚型都免疫。一年内三针 (0, 1-2, and 6 months).
x********e
发帖数: 35261
45
来自主题: Military版 - 军版将军性病率有多高?
自己看你贴的链接涨涨姿势吧,不要硬拗。你咋知道我没做过pap smear?我在国内体
检时就做过了。美国滥交不染病才怪了。你医生是安慰你吗?不然怎么会莫名其妙提
hpv感染率高?关键是,是看口唇疱疹不需要做pap smear啊?你是阴部感染一型了?
t***h
发帖数: 5601
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纽约时报: DNA Confirms Assassination Victim was Kim Jong-nam, Malaysia Says.
By Russell Goldman, New York Times, March 15, 2017
https://www.nytimes.com/2017/03/15/world/asia/kim-jong-nam-dna-malaysia.html
The Malaysian authorities on Wednesday said the man assassinated in Kuala
Lumpur's international airport last month was indeed Kim Jong-nam, estranged
half brother of North Korea's leader Kim Jong-un. The police compared the
DNA of Mr. Kim with a sample provided by one of his children, Deputy Prime... 阅读全帖
s******r
发帖数: 5309
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GOP fundraiser Broidy under investigation for alleged effort to sell
government influence, people familiar with probe say
By Carol D. Leonnig
, Reporter
Devlin Barrett
, Reporter
Ellen Nakashima
, Reporter
Josh Dawsey
, White House reporter
August 17 at 8:43 PM
The Justice Department is investigating whether longtime Republican
fundraiser Elliott Broidy sought to sell his influence with the Trump
administration by offering to deliver U.S. government actions for foreign
officials in exchange for ... 阅读全帖
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