s******e
发帖数: 1073 | 1 4 度情况下，
大肠杆菌表达的蛋白，可能形成了蛋白间二硫键， 以至于在柱层析时表现不好，我想
得到均一的蛋白，不想让蛋白变性，求教如果加入DTT的话，可以打开已形成的二硫键
吗？ |
|
g*****p
发帖数: 451 | 2 这个基本上不太可能是蛋白表达时生成的(如果你真的发现蛋白间有二硫键的话）
E.coli在细胞胞质里有thioredoxin,glutathione等还原系统
除非你的蛋白是membrane protein或者secret 到periplasm才会有DsbG等系统把二硫键
形成
如果是因为aging形成的缘故，加0.1-0.5mM TCEP/1 mM DTT/5-10mM belta
mercaptoethanol
(价格由高到低）就可以了 |
|
O******e
发帖数: 4845 | 3 从理论上来说，表面的二硫键应该可以被打开，但如果你的蛋白形成了complex，那内
部的还是很难被打开。 |
|
s******3
发帖数: 28 | 4 蛋白本身不长，才50个不到aa，但是有8个cysteine!之前做表达用大肠融合表达，切了
之后就沉淀啦，估计是二硫键氧化后聚集啦，后来先在空气中把溶菌液搅拌加过氧化氢
氧化，再切，发现切不掉啦，没办法，老板让做真菌和植物，觉得不怎么靠谱呀，因为
蛋白本身就是抗真菌的。哪位前辈给点提示吧，这个做包涵体然后复性有戏吗？或者其
他什么比较高效点的表达系统？有人做过类似的东西么？谢谢呀 |
|
C*********4
发帖数: 40 | 5 是不是还要看表达蛋白的e.coli,可以试试rosetta-gami,这种细菌表达含有二硫键的蛋
白好像不错 |
|
f**********r
发帖数: 91 | 6 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: flyingwisher (flyingwisher), 信区: Chemistry
标 题: 请问：DTT 还原/断裂二硫键（disulfide bond）时反应条件，谢谢了。
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 8 12:53:37 2011, 美东)
PH>7. DTT如果浓度在0.5mM，有还原能力吗？这种还原/断裂反应一般需要多长时间
？谢谢了。 |
|
p****g
发帖数: 5 | 7 想把ubiquitin通过C端连接到另外一个protein上。把ubiquitin的C端loop最后一个残
基突变成了Cystein，把目标蛋白表面也突变了一个地方成Cysteine。
都是带His-tag，用镍柱纯化，纯化的时候都用了TCEP。到最后把两个蛋白都换进一个
没有还原剂的buffer，然后dialyse 过夜。结果每次都发现cysteine活性很低，只有少
数的目标蛋白连上了ubiquitin。更不解的是ubiquitin自己应该很容易形成di-
ubiquitin，但这个形成的都不多。
各位前辈有没有过这方面的经验，能不能提供一些建议？多谢多谢
（我想到的是Cysteine已经被提前切掉了。或者被氧化成了非二硫键的氧化产物，比如
sulfinic acid...） |
|
j***i
发帖数: 61 | 8 看氧化还原电势啊
DTT的如果我没记错是-330mV
蛋白的二硫键很少有低到-300mV的
pH 7.5-8.0室温一小时足够了
不放心就37C |
|
c********n
发帖数: 225 | 9 谈谈和蛋白打交道的日子 （二）
前言
本来打算这篇要构思的全面些后再拿出来的。由于第一篇有跟帖提到了学IT比 Bio要强
的多， 而且主要是经济上的优势。咱们这个生物版也经常看见这样纠结的议题。这个
dilemma笔者n年前也曾碰到过。这里就分享一下这方面的一些亲身体会吧。
其实对于大多数人，运气和财气都是守恒的。是你的想逃都逃不掉，不是你的就要学会
放下。实在想要得到，就尽全力去争取。这样得不到时就不会留下遗憾。不管怎样，都
要真心祝福得到的人，那就省下了最伤自己的抱怨。这就是实实在在的“正能量“了吧。
第二篇 转行IT当码农还是继续生物艰辛路？
先从“梦”想照进现实开始说起。
读博时有一段时间总会梦见在大学里考线性代数，卷子上没有一道题看得懂，然后惊醒
。每次都要静下来好一阵子才明白，其实自己从来都没有修过这门课。相似的事情在现
实生活中真的发生了。那天坐在教室里参加Computer Science Master degree第一门必
修课的期末考试，居然没有一道题知道是在问什么。第一反应是，在做梦吗？然后深吸
一口气，佯装镇定地举手叫来监考的TA， 问这次的考题是不是发错了？TA... 阅读全帖 |
|
c********n
发帖数: 225 | 10 谈谈和蛋白打交道的日子 （二）
前言
本来打算这篇要构思的全面些后再拿出来的。由于第一篇有跟帖提到了学IT比 Bio要强
的多， 而且主要是经济上的优势。咱们这个生物版也经常看见这样纠结的议题。这个
dilemma笔者n年前也曾碰到过。这里就分享一下这方面的一些亲身体会吧。
其实对于大多数人，运气和财气都是守恒的。是你的想逃都逃不掉，不是你的就要学会
放下。实在想要得到，就尽全力去争取。这样得不到时就不会留下遗憾。不管怎样，都
要真心祝福得到的人，那就省下了最伤自己的抱怨。这就是实实在在的“正能量“了吧。
第二篇 转行IT当码农还是继续生物艰辛路？
先从“梦”想照进现实开始说起。
读博时有一段时间总会梦见在大学里考线性代数，卷子上没有一道题看得懂，然后惊醒
。每次都要静下来好一阵子才明白，其实自己从来都没有修过这门课。相似的事情在现
实生活中真的发生了。那天坐在教室里参加Computer Science Master degree第一门必
修课的期末考试，居然没有一道题知道是在问什么。第一反应是，在做梦吗？然后深吸
一口气，佯装镇定地举手叫来监考的TA， 问这次的考题是不是发错了？TA... 阅读全帖 |
|
f**********r
发帖数: 91 | 11 但是氧化不是生成二硫键吗？还原才会破坏二硫键。谢谢了。 |
|
f**********r
发帖数: 91 | 12 我看到有些地方讲：浓度<5mM就基本没有还原性，只能做保护-SH基团不被氧化成-S-S-
键的添加剂。但是又看到有些文章用0.6mM的浓度打开-S-S-键，不知道critical的浓度
是多少？谢谢了。 |
|
v**********m
发帖数: 5516 | 13 先打个质谱看看蛋白质量如何。
目标蛋白和U蛋白的交联反应还要竞争ubiquitin分子间反应，知道反应速度比吗？
提高pH，可以提高二流键的形成反应速度。 |
|
|
s******e
发帖数: 1073 | 15 跑SDS-PAGE时看到了一条大约于蛋白分子量的带，说明是二聚体吗？二聚体是不是会比
较容易打开？DTT的浓度多大为好呢？
谢谢！ |
|
|
c***s
发帖数: 70028 | 17 前不久，意大利考古学家声称，他们在佛罗伦萨一座女修道院下面找到了可能是达?芬奇名作《蒙娜丽莎》人物原型的头骨，目前正试图提取DNA并重建此人的面容。
众所周知，DNA分子涵盖了生物遗传所需要的几乎所有信息，研究者早已发现头色、肤色、有无雀斑，眼耳口鼻的大小位置都是由基因决定的。但是以目前的技术水平，直接反映面容特征的DNA信息是零碎和不完整的。
令人惊喜的是，科学家将利用统计学手段研究人类的多个基因和面部特征的关系，一张脸将被定位成231个数据，而这231个数据都一样的两张脸是几乎不可能存在的。如此，我们便有望建立DNA信息决定面部特征的模型。
DNA虽然为法医鉴定提供了极大的便利，但是事实上，德国、比利时以及美国的印第安纳州和怀俄明州明确规定了该手段的非法性。毕竟DNA推断仍可能百密一疏，更何况DNA信息的本质涉及个人的隐私问题。
据英国《每日邮报》5月19日报道，由意大利考古学家希尔瓦诺?文塞提（Silvano Vinceti）教授所领导的团队日前在佛罗伦萨圣厄休拉修道院遗址下面的地窖中挖掘出了一副头骨，目前正试图提取DNA并重建此人的面容。此人的遗体如此受到重视的原因在于她或许就... 阅读全帖 |
|
K******S
发帖数: 10109 | 18 这是经典的质朴实验，第一步先用一种试剂alkylate free cys. 第二步用 dtt打断二
硫键，第三步用另外一种试剂 alkylate 形成二硫键的 cys. 这样哪些 cys 是 free
的 哪些是二硫键的就一目了然了。因为两种 alkylation 试剂修饰后的 cys 分子量不
一样。和用什么质朴，用什么软件没有太大关系。
：大家好，我现在做基于质谱方法的二硫键的鉴定。我的实验是在一个recombinant的蛋
：白基础上做三组condition，每个condition做duplicate。质谱打出来的结果做成MGF |
|
K**4
发帖数: 1015 | 19 faint，谁告诉你有三级结构的蛋白都有二硫键的？
至于这个DNase I，我已经说了，如果有，也不是family-specific feature，显然有很
多没有二硫键的member of DNase I.
LZ问哪个DNases没有二硫键，请问我的回答有问题吗？
如果他在问一个feature that only preserves in certain
protein, then he should have pasted his sequence here。
至于你直接来这么一句就更可笑了：
照你的说法，所有蛋白质（assume you also agree that all proteins have
structures except those short polypeptides）都有二硫键了？ |
|
l*******k
发帖数: 63 | 20 大家好，我现在做基于质谱方法的二硫键的鉴定。我的实验是在一个recombinant的蛋
白基础上做三组condition，每个condition做duplicate。质谱打出来的结果做成MGF
file以后倒入MassMatrix这个软件做二硫键的search。结果做出来非常的不理想，
duplicate之间几乎没有任何match。虽然说二硫键本身很dynamic而且质谱也是有一定
误差的，但是打出来几十个二硫键但是几乎没有match这种情况还是太让人沮丧了。我
对我自己的实验操作还是非常自信的。请有经验的各位高手介绍下经验呗，谢谢^_^ |
|
K******S
发帖数: 10109 | 21 看蛋白的序列和所选择酶的切点,这就是case by case了。
比较dtt处理前和处理后的肽段，目前没有什么软件能有效的把二硫键连接的2个肽段找
出来的。所以有二硫键的时候大部分软件都会缺失那部分序列，但去掉二硫键后会检测
到那些序列。
：但有多个二硫键时如何确定半胱氨酸之间是怎么配对的呢？
：【 在 KingofMS (你太有才了) 的大作中提到: 】 |
|
g***x
发帖数: 645 | 22 那个lane1 develop 的时候ecl没有覆盖上，后来又重新develop了一次就没问题。应该
和这个没关系
我做的LT 是根据文献做的，reducing agent 就是指beta－ME，DTT 这些，你说的对，
是打开氧化的键，主要包括二硫键的，我的dimer 不是二硫键，是范德华力。
你说的你的例子是不用reducing agent， 但是用煮的，这样也会破坏dimer 之间的键
，起到的也是尽量reduce 蛋白的作用吧，你说的也可以跑出好看的带型，是指二硫键
没有被破坏，dimer 也没有破坏么？ |
|
c****g
发帖数: 3893 | 23 【 以下文字转载自 Belief 讨论区 】
发信人: septaphobia (恐妻症), 信区: Belief
标 题: 又见从概率看进化可能性渺小
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 7 00:31:17 2009, 美东)
（警告：看这篇文需要思考，如果不想思考，可以跳到最后几段。）
下面是匹兹堡大学药学院药物遗传学中心主任，及 Joseph Koslow 讲座教授，黄力夫
，认为进化的不可能的理由。
设想在地球某地方有一个火山。火山附近有个小池塘，池塘里有一些很简单的像细菌一
样的单细胞生物，一直在随机地突变。有一天，火山突然爆发，池塘的温度一下升高了
摄氏40度。请问，在这个筛选的机会中，池塘里的细菌，存活的机率有多大？
我们知道，高温导致细胞死亡的原因，是因为生物体的蛋白质会变性。蛋白质是一个氨
基酸所组成的高分子，它在细胞里存在的状态不是一条直线，而是缠起来像个毛线团。
这个毛线团看起来很混乱，但是它的三度空间结构是非常必要的，决定了这个蛋白的活
性。
高温加热的结果，这毛线团就散开了。散开的毛线团是没有活性的。要这个毛线团在高
温下不散开，在原来没有化... 阅读全帖 |
|
C*******t
发帖数: 766 | 24 septaphobia (恐妻症) 于 (Tue Aug 26 18:31:41 2008) 提到:
活不下去的细菌
（警告：看这篇文需要思考，如果不想思考，可以跳到最后几段。）
下面是匹兹堡大学药学院药物遗传学中心主任，及 Joseph Koslow 讲座教授，黄力夫
，认为进化的不可能的理由。
设想在地球某地方有一个火山。火山附近有个小池塘，池塘里有一些很简单的像细菌一
样的单细胞生物，一直在随机地突变。有一天，火山突然爆发，池塘的温度一下升高了
摄氏40度。请问，在这个筛选的机会中，池塘里的细菌，存活的机率有多大？
我们知道，高温导致细胞死亡的原因，是因为生物体的蛋白质会变性。蛋白质是一个氨
基酸所组成的高分子，它在细胞里存在的状态不是一条直线，而是缠起来像个毛线团。
这个毛线团看起来很混乱，但是它的三度空间结构是非常必要的，决定了这个蛋白的活
性。
高温加热的结果，这毛线团就散开了。散开的毛线团是没有活性的。要这个毛线团在高
温下不散开，在原来没有化学键的地方，就必须要产生一个新的化学键。这就一定要有
基因上相应的序列改变，也就是生物学家所谓的突变。
现代生物学告诉我们，基因上... 阅读全帖 |
|
l*******k
发帖数: 63 | 25 我们是考虑到二硫键scramble这个问题，但是因为做in gel digest，也没有特别好的
办法，正常的PAGE 胶还是照样跑，我只是把所有的反应条件从pH 8 改成了pH 7.0 从
而尝试着减少二硫键重组。我上周去查了MS1，发现有一组condition中的duplicate都
有match的MS1，但是很多MS1都仅仅在其中一组被选中去打MS2而没有再另外一组中打
MS2。但是另外一组比较奇怪的是duplicate中几乎没有什么相同的MS1，这是让我很费
解的一件事情。请您介绍下您的经验好吗？包括二硫键shuffle和打质谱的经验。谢谢！
shuffeling. |
|
u***l
发帖数: 2997 | 26 可能是形成二硫键了。溶液除氧了么？Thioamide可以异构化，双键移到氮上，变成烯
胺上接一个巯基。有氧的情况下，可以自身成二硫键，也可以和DTT成二硫键。加点
TCEP试试。 |
|
c*f
发帖数: 226 | 27 遇到知音了，终于有人和我同样的感受。
先学术一下我们平时处理面团越揉越光越白，维基百科解释为“ 反复机械揉压面团，
再把面团放
置若干小时，可以增加面团的弹性、韧性与筋道。其作用机理是把面团中的蛋白质的硫
氢键氧化为二硫键。二硫键越多，可以使蛋白质分子结合起来形成大分子网络结构，增
加面团持气性、弹性和韧性。氧化过程还可以降低面粉中蛋白酶的活性，从而保护了面
团的筋力和工艺性能。氧化过程还能分解面粉中的植物色素（类胡萝卜素），从而漂白
了面粉”
面条机在3分钟把液体和面粉混合成小疙瘩然后开始挤面，稍微干了中间就会很多面粉
点，下水煮就会断，稍微湿了出来的面条粘，这时候停掉机器，稍微加点水或是面进去
，把刚才挤出来的面也扔进去。重新开启机器可以补救。第一遍出来的面我会密封在袋
子里醒几小时后寸断了放回面条机重新出面，第二次出来的面就放冰箱醒1-2天再吃。
我一次做几斤面条，因为每做一次面条都会剩一小团面，中途让机器休息好再开启。剩
的那团面切成米粒大做面疙瘩汤不浪费。 |
|
c*f
发帖数: 226 | 28 遇到知音了，终于有人和我同样的感受。
先学术一下我们平时处理面团越揉越光越白，维基百科解释为“ 反复机械揉压面团，
再把面团放
置若干小时，可以增加面团的弹性、韧性与筋道。其作用机理是把面团中的蛋白质的硫
氢键氧化为二硫键。二硫键越多，可以使蛋白质分子结合起来形成大分子网络结构，增
加面团持气性、弹性和韧性。氧化过程还可以降低面粉中蛋白酶的活性，从而保护了面
团的筋力和工艺性能。氧化过程还能分解面粉中的植物色素（类胡萝卜素），从而漂白
了面粉”
面条机在3分钟把液体和面粉混合成小疙瘩然后开始挤面，稍微干了中间就会很多面粉
点，下水煮就会断，稍微湿了出来的面条粘，这时候停掉机器，稍微加点水或是面进去
，把刚才挤出来的面也扔进去。重新开启机器可以补救。第一遍出来的面我会密封在袋
子里醒几小时后寸断了放回面条机重新出面，第二次出来的面就放冰箱醒1-2天再吃。
我一次做几斤面条，因为每做一次面条都会剩一小团面，中途让机器休息好再开启。剩
的那团面切成米粒大做面疙瘩汤不浪费。 |
|
E*A
发帖数: 10744 | 29 这几天实验了好几次，不管加不加蛋，醒不醒，醒多久，做出来的面条都是暗黄，而且
几乎是意面的味道。
我们平时处理面团越揉越光越白，维基百科解释为“ 反复机械揉压面团，再把面团放
置若干小时，可以增加面团的弹性、韧性与筋道。其作用机理是把面团中的蛋白质的硫
氢键氧化为二硫键。二硫键越多，可以使蛋白质分子结合起来形成大分子网络结构，增
加面团持气性、弹性和韧性。氧化过程还可以降低面粉中蛋白酶的活性，从而保护了面
团的筋力和工艺性能。氧化过程还能分解面粉中的植物色素（类胡萝卜素），从而漂白
了面粉”
这台面条机只是用3分钟把液体和粉混合均匀就蛮横挤出，完全没有上面那个过程，所
以味道上跟我以前做的手擀面相比就是意面和中国面的区别。虽然小朋友都表示面条很
好吃，但我还是想吃正宗的中国面啊，有谁做出来成品较白的能不能分享一下经验呢，
谢谢 |
|
H********g
发帖数: 43926 | 30 从肽链合成的角度看的确是这样。
不过对于小蛋白质，有折叠成正确的3级构象的问题，催产素基本不需要考虑这个问题
。对于胰岛素而言还有两个链间二硫键的正确形成的问题。这个在体外重新构建复杂二
硫键的问题到现在也不是完全解决了，主要的方法还是跟几十年前一样，碰运气。在生
物体里专门有几套机制管这个事。
在60年代，还没有那个蛋白质自己折叠的实验(1973 Anfinsen)，像现在很常规的
refold之类的技术应该还没有设计出来或者广为人知。当时他们做出来胰岛素之后，还
专门做了结晶实验来证明合成的胰岛素跟天然的胰岛素完全一样。这个还是有点水平的
（也可能是运气好，胰岛素就是倾向于自折叠）。
当然从方法学上说，的确没有什么突破性的贡献（尽管很多诺奖得主也是一样）。跟那
个固相合成的人比，的确是别人更应该得奖。
peptide |
|
z***i
发帖数: 8285 | 31 灌这么长。。
从肽链合成的角度看的确是这样。
不过对于小蛋白质，有折叠成正确的3级构象的问题，催产素基本不需要考虑这个问题
。对于胰岛素而言还有两个链间二硫键的正确形成的问题。这个在体外重新构建复杂二
硫键的问题到现在也不是完全解决了，主要的方法还是跟几十年前一样，碰运气。在生
物体里专门有几套机制管这个事。
在60年代，还没有那个蛋白质自己折叠的实验(1973 Anfinsen)，像现在很常规的
refold之类的技术应该还没有设计出来或者广为人知。当时他们做出来胰岛素之后，还
专门做了结晶实验来证明合成的胰岛素跟天然的胰岛素完全一样。这个还是有点水平的
（也可能是运气好，胰岛素就是倾向于自折叠）。
当然从方法学上说，的确没有什么突破性的贡献（尽管很多诺奖得主也是一样）。跟那
个固相合成的人比，的确是别人更应该得奖。
peptide |
|
T**********t
发帖数: 1604 | 32 如果你的蛋白已经aggregate了，加1mM的DTT还原能力不够的。1mM的话，一般只能起防
止二硫键生成的效果。用来打开已经形成的二硫键的话，你加到5mM甚至10mM再试试，
incubate个半小时到一小时的样子再跑胶。
另外，你的蛋白跑SDS胶是纯的么？
还有就是你的蛋白上样量明显太多了，少加一点。
还还有，上回你问的那个Reverse transcription的efficiency的问题，我帮你问过了
，他们都不做测试的，估计反正library够大。。。 |
|
b******i
发帖数: 287 | 33 我很小白，只是好奇：
为什么Lane 1没有Actin的带？
Load少一点样品，会不会没有这么弥散呢？那团dimer很浓啊。。。。
你做的LT的是根据文献做的？Reducing Agent你指的是什么啊？beta-ME or DTT? 这些
不是通常只是打断二硫键的么（如果我错了别笑～～）？你的Dimer是由二硫键所形成
的么？我曾经跑过一个Non-reducing的Gel，不加bete-ME or DTT，同样用高温处理过
，也可以跑出很好看的带型啊。 |
|
z*******n
发帖数: 4 | 34 各位高手，请问有听说过结构上没有二硫键的DNase，或者二硫键不是必须的DNase嘛？ |
|
K**4
发帖数: 1015 | 35 DNase I 应该也没有二硫键阿，如果有，也不是所有所有members都保守的
很多DNases的确有保守的cyc，但是他们往往会结合金属离子进而参与催化过程，而不
是形成二硫键。 |
|
g*****n
发帖数: 250 | 36 别那么懒，先google一下再敲帖子。DNases有二硫键。想一想，哪些有三级结构的蛋白
会没有二硫键。 |
|
r******g
发帖数: 600 | 37 三级结构不需要二硫键！
DNase I 是没有二硫键的，大家做RNA提纯的时候，不是经常加beta-ME吗？ 就是为了
让RNAse失活，再用DNase~ |
|
H****s
发帖数: 301 | 38 谢谢你的发言，我获益匪浅。我不是做这个的，但是一直在思考一个问题。有一些病原
菌可以把细菌毒素输送到细胞质里面去，那些毒素也是有二硫键的呀，那为什么细菌毒
素仍然可以保持折叠后的构象并且仍然有生物活性？同样的还原性环境，为什么抗体就
不行了呢？利用细菌的毒素输送系统，一系列不同的蛋白（最大的有200KD）已经被完
整地输送到哺乳动物细胞的细胞质里面。为什么那些蛋白就可以，同样都是有二硫键的
，抗体就不行了呢？ |
|
p*********3
发帖数: 44 | 39 如果形成二硫键的两条支链中有一条比较短，比如五个氨基酸，可以将二硫键加上这条
支链的质量看成在另一条支链上的半胱氨酸的PTM，再用一些软件去搜索，我用的是
PEAKS7.5.还有一些专门搜索带交联的肽段的质谱分析软件，比如xQuest/xProphet和
pFind studio，我没有用过，不好评论。 |
|
l*******k
发帖数: 63 | 40 谢谢。我除了用软件，也会manually check，但是因为我的蛋白有2个subunit，加起来
一共好几十个二硫键，再加上楼下说的二硫键shuffle的问题，如果只是手工的话，我
真的会疯掉的。。。 |
|
V***b
发帖数: 3419 | 41 硅应该没可能，没听说过硅硅键，生命的复杂形式还是需要大分子的。硫倒是有可能，
二硫键是可以打开结合的，就是键能低，但在完全不同于地球的环境下应该有机会。 |
|
m*********3
发帖数: 1425 | 42 刘伯宁
http://blog.sciencenet.cn/home.php?mod=space&uid=454912&do=blog
今年上半年，美国FDA先后批准两种抗体-药物偶联剂（Antibody-drug conjugates，以
下简称ADCs药物）上市，分别为Seattle Genetics公司的Adcetris TM和罗氏公司的
Kadcyla™。与此同时，据《自然·药物发现》杂志统计，2009-2010年共有7种
ADCs药物，2011-2012年至少有17种ADCs药物进入临床研究阶段。目前，在世界范围内
进入临床研究的ADCs药物累计已达三十余种。ADCs候选药物在数量上已经超过同为“改
型抗体”的双特性抗体、抗体片段等类别，成为单克隆抗体药物，尤其是肿瘤治疗用单
抗的研究热点与发展方向。
ADCs药物的概念由来
单克隆抗体用于肿瘤靶向治疗的概念由来已久。一百年多前，德国免疫学家保罗·欧立
希（Paul Ehrlich）最早提出单克隆抗体的“黄金子弹”学说，即：利用单克隆抗体对
抗原的特异性结合实现对癌变细胞的靶向治疗。同时，保罗·欧立希也是临床上化学... 阅读全帖 |
|
m*********3
发帖数: 1425 | 43 刘伯宁
http://blog.sciencenet.cn/home.php?mod=space&uid=454912&do=blog
今年上半年，美国FDA先后批准两种抗体-药物偶联剂（Antibody-drug conjugates，以
下简称ADCs药物）上市，分别为Seattle Genetics公司的Adcetris TM和罗氏公司的
Kadcyla™。与此同时，据《自然·药物发现》杂志统计，2009-2010年共有7种
ADCs药物，2011-2012年至少有17种ADCs药物进入临床研究阶段。目前，在世界范围内
进入临床研究的ADCs药物累计已达三十余种。ADCs候选药物在数量上已经超过同为“改
型抗体”的双特性抗体、抗体片段等类别，成为单克隆抗体药物，尤其是肿瘤治疗用单
抗的研究热点与发展方向。
ADCs药物的概念由来
单克隆抗体用于肿瘤靶向治疗的概念由来已久。一百年多前，德国免疫学家保罗·欧立
希（Paul Ehrlich）最早提出单克隆抗体的“黄金子弹”学说，即：利用单克隆抗体对
抗原的特异性结合实现对癌变细胞的靶向治疗。同时，保罗·欧立希也是临床上化学... 阅读全帖 |
|
s****a
发帖数: 436 | 44 问的好，DTT 对NPs 表面的影响我想过，有几种可能
首先，它可能和巯基乙酸的硫形成二硫键，导致纳米颗粒团聚。
其次，就是您说的，取代表面的配体，de-stabilize QD。
最后，它可能和ZnSe表面裸露的Zn配位，增强纳米颗粒的稳定性。
于是，我在高浓度的NPs中加入DTT，发现胶体颜色稍稍变黄，这应该是ZnS络合物的颜
色（排除第一种）。同时，对比不加DTT，胶体的稳定性增强（排除第二种），所以我
认为是DTT应该在巯基乙酸脱落的位置，和Zn络合，保护NPs导致稳定性增强。 |
|
O**********0
发帖数: 61 | 45 ☆─────────────────────────────────────☆
BHistory (往者的影子) 于 (Fri Sep 9 00:20:11 2011, 美东) 提到:
俺曾认为生命是进化起源的，后来越找越发现进化论像是信仰而非科学结论。可是每有
飞机网友觉着俺如此看待进化论是反科学了。
所以俺本着科学的精神，问个问题，求各位飞机进化论牛人给个科学的答案。
大家知道达尔文进化论是以遗传机制为基础的，第一个有遗传机制的生命怎么来的，当
时根本没有提及。
后人发现这一问题后，就又提出了化学进化论，就是无机分子在某种机制下，自动组合
出了第一个有遗传的生命。此后达尔文进化论似乎可以take care（其实未必，今后再
讨论）。
今天我们先看比第一个有遗传生命的出现简单万亿倍的问题，第一个蛋白质如何化学进化出
现？
先亮亮俺一个愚昧基督徒的愚见：
已知最简单的具有遗传机制的单细胞生命的复杂度已经远远超出人们最初的想象，大概
有400种蛋白质几十万个组成。其中较小的蛋白质大概100个氨基酸，如果在随机热运动
中组成，因为自然界对称的氨基酸不少于40种（20多种氨基酸及... 阅读全帖 |
|
n********y
发帖数: 187 | 46 科学文化评论》第4卷 第2期（2007）：学术沙龙
邹承鲁：善者好之 不善者恶之 北京大学生命科学学院院长 饶毅
常常有人，希望得到众口一词的好评。其实，大千世界人有各种，差异很大，能得到所
有人好评的人怎么可能是正直而有原则的人？得许多好评和真正的好人，两者之间不能
划等号。
其实，两千多年前，孔老夫子就不提倡人人皆喜欢的“好人”。孔子提倡的人是：善者
好之，不善者恶之。
不久前去世的生化学家邹承鲁先生，就是一位这样的人。
应该说明，和邹承鲁有不同意见，用客观事实正当的反对和批评他的人，并不是不善者
。歪曲事实、用卑劣手段恶意攻击他的，才是不善者。
一 有出色成就的科学家
在生物化学专业上，邹承鲁有出色的成就。
对知识的追求、对自然界的好奇、对演变规律的探索是科学家的本色。
在过去一百年，多数中国科学家从事研究的机会和条件都很有限。但是，令我们敬佩和
自豪的是，先辈中有相当一些人对知识有执着的热爱和追求，他们的态度、他们的精神
推动了中国现代科学起步。
而在现在条件比以前好很多的情况下，中国科技教育界存在一些戴着科学家帽子，对知
识没有热情、从事科学研究为晋阶铺路的人，无助于科... 阅读全帖 |
|
B******y
发帖数: 2255 | 47 是未考虑不同氨基酸相互聚合成长链时，建立肽键/二硫键的相对难易问题。可这对结
论影响不大呢。
因为在生命中中20种氨基酸两两的连接都出现呢，阁下知道有哪些氨基酸之间连接更难
，比更易的有极大差别，象酸碱反应正反方向的差异那么巨大么？这两者没有可比性呢
，比如把20中氨基酸放一个大池子里，能迅速形成某些特定序列，而保证其他出现几率
极小么？
如果氨基酸各种相互连接的难易在一个量级上，那即使我们考虑准确的相对难易，能改
变一个特定蛋白质出现的小概率呢么？ |
|
c****t
发帖数: 19049 | 48 第五十六章朱家有女
在讲台上讲解元素基本知识，叶昭还在琢磨着多伦的事儿，帖子送过去，人自然很快被
放出来了，听手下人回来讲，好似很是吃了些苦头。
这件事自然交给了总理衙门去处理，事事都摄政王出面，也太给这些个洋人作脸了。
叶昭严令，要总理衙门一定给法国人个教训，将亨利驱逐出境是最低的底线。
想想这些洋人，擅自在广州地面上抓人，可真是骄横惯了，据说这个亨利来广州不
久，但也可见列强高高在上的心态。
或许西方科学界、部分上流阶层、大部分商人、有见识的政客对于中国南部之变化
有着清醒的认识，但同样，也有很多抱有偏见的欧洲人不是那么好转变的。
卧薪尝胆吧，现今也实在不是同列强交恶的时机，何况一点点发出中国人自己的声
音，也算达到了目的。
有郁闷之事，自然也有令人振奋之事，桑切斯老头鼓捣出了一台功率大约一百千瓦
的发动机，好几吨重，但转子转动的时候断断续续的出问题，现在正在完善中。
一百千瓦的发电机，在后世别说工业生产，就算家庭供电，怕也就勉强能供应百户
家庭的用电，但在现今，却委实是巨无霸的存在，理论上能带动多少电灯？整个广州又
才多少灯泡？
比煤气灯便宜许多的电能对日常生活的影响就不说了，在... 阅读全帖 |
|
c****t
发帖数: 19049 | 49 第五十六章朱家有女
在讲台上讲解元素基本知识，叶昭还在琢磨着多伦的事儿，帖子送过去，人自然很快被
放出来了，听手下人回来讲，好似很是吃了些苦头。
这件事自然交给了总理衙门去处理，事事都摄政王出面，也太给这些个洋人作脸了。
叶昭严令，要总理衙门一定给法国人个教训，将亨利驱逐出境是最低的底线。
想想这些洋人，擅自在广州地面上抓人，可真是骄横惯了，据说这个亨利来广州不
久，但也可见列强高高在上的心态。
或许西方科学界、部分上流阶层、大部分商人、有见识的政客对于中国南部之变化
有着清醒的认识，但同样，也有很多抱有偏见的欧洲人不是那么好转变的。
卧薪尝胆吧，现今也实在不是同列强交恶的时机，何况一点点发出中国人自己的声
音，也算达到了目的。
有郁闷之事，自然也有令人振奋之事，桑切斯老头鼓捣出了一台功率大约一百千瓦
的发动机，好几吨重，但转子转动的时候断断续续的出问题，现在正在完善中。
一百千瓦的发电机，在后世别说工业生产，就算家庭供电，怕也就勉强能供应百户
家庭的用电，但在现今，却委实是巨无霸的存在，理论上能带动多少电灯？整个广州又
才多少灯泡？
比煤气灯便宜许多的电能对日常生活的影响就不说了，在... 阅读全帖 |
|
l*******k
发帖数: 63 | 50 各位老师好，我现在虽然只是个PHD二年级的学生，但是不知道为什么，最近对以后当
faculty充满了热情，虽然我十分的了解现在market上的position不多，NIH的funding
难申，学校评tenure各种压力大，等位置的高级postdoc相当多，但是我最近似乎特别
喜欢找虐，希望各位老师给做些指导或者及时拍醒。
我本科是做药物分析的，是基于HPLC和GC这类，MS是化学专业，现在phd做的mass
spectrometry-based proteomics的研究，主要研究一个特定蛋白的二硫键对其功能的
影响以及此蛋白S-nitrosylation相关的信号通路。我自己对systems biology比较感兴
趣，现在那些比较基本的protein-protein interaction network，GO 等之类的分析都
能完成，还在自学MATLAB和数学建模，明年5月做qualify，之后全职在实验室的时候再
进一步的搞定质谱仪器。以前也在美国的CRO工作过，知道基本的美国这边FDA标准的药
物分析流程，对美国药厂这边的market也有一定程度的了解。同时我也比较全面的了... 阅读全帖 |
|
