a**e
发帖数: 5094 | 1 你赢了：）H&E和免疫组化还是很大区别的。咱们还是不要继续讨论了。喜欢回国看病
的回国，喜欢来美国的来美国。 |
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l*****z
发帖数: 13617 | 2 NewPath Diagnostics Laboratory
42-11 Parsons Blvd
Queens, NY 11355
到这里找找吧，会做病理切片染色免疫组化或者化验室常规检查的技术都可以，他们常
年都缺人，工资低，你也可以先干着再找别的工。 |
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r**z
发帖数: 1793 | 4
survival
subtype
敏感不敏感跟肿瘤来源关系还是很大的，肺癌是鳞癌，腺癌，小细胞癌多一些，对于那
种放化疗，哪期开刀，哪期开刀+放/化疗，哪期只能放/化疗，上个世纪就有定论了。
BA还是跟内分泌激素的关系很大的，奇奇怪怪的来源很多，所以分类是很难的啊，而且
有些对化疗不敏感，对内分泌治疗很敏感，免疫组化还是什么的能检出来有没有内分泌
敏感的受体的，对不对啊？ |
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n*********0
发帖数: 1543 | 5 没有ER, PR and Her2 status么？
这些是标准病理分型啊。
不过，免疫组化分型有局限，cut off有时候比较 arbitrary, 不同phothologist 会给
不同的结果。
还是等个人 whole genome sequencing吧。快了。
这样，分类应该准确多了。
survival
subtype |
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l******0
发帖数: 17 | 6 最新的病理报告：请专家提些建议阿~~~~十万分感谢！！！！！！
病理检查报告；光镜所见：肿瘤在肌纤维间呈浸润性生长。瘤细胞间较多血管生长。瘤
细胞大小较一致，有异型，部分区域细胞呈梭型，可见核分裂，部分区域粘液变性，灶
状区域坏死。免疫组化：CD10(+),SMA(+_),a-inhibin(_),Bc1-2(_),ER(_),PR(_),
Desmin(_),Ki-67(+)<10\100,p53(+)<10|100。病理诊断：子宫内膜简质肉瘤。子宫内
膜呈增生期改变。慢性宫颈炎，腺体磷化。宫旁未见肿瘤组织。
病理检查报告；（光镜所见）送检材料，双侧附件+淋巴结+大网膜 诊断：盆腔左侧淋
巴结旁脂肪组织内可见肿瘤组织浸润。双侧卵巢均见涵囊肿形成。双侧输卵管慢性炎症
。盆腔左侧淋巴结，盆腔右侧淋巴结均未见肿瘤转移，分别为（0|2），（0|4）。大网
膜未见肿瘤组织。 |
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n**e
发帖数: 2026 | 7 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: nile (nile), 信区: Detective
标 题: 学术诡辩不是复旦投毒犯的免死之道
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 11 10:02:50 2014, 美东)
一审判处死刑，声称愿意接受法庭任何处罚的复旦投毒案嫌犯林森浩不服判决上诉。
2014年12月8日，上海高院公开开庭二审。由于控辩双方在受害者的死亡原因问题上发
生激烈争论，庭审持续了13个小时才告结束。林森浩辩护方认为，黄洋喝下去的毒水不
足以致死。致其死亡的真正原因是重型乙型肝炎。
关于中毒剂量问题，辩方律师认为按照事发时水桶中1200毫升的水量计算，黄洋喝下去
的绝对不到致死量。林森浩则推翻原来指控的投药总量，称棕色小瓶装的二甲基亚硝胺
原装100毫升，投毒时瓶内剩下的约有五分之一到四分之一，所以只有30毫升，而不是
指控投入的75毫升或50毫升。尼罗河就按照1200ml水，30ml二甲基亚硝胺原液计算，再
次向公众展示他毒杀黄洋的坚决意志。
黄洋喝下毒水二甲基亚硝胺终浓度是2.5%。每1ml含25mg二甲基亚硝胺。大鼠二甲基亚
硝... 阅读全帖 |
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d**********u
发帖数: 4124 | 8 ☆─────────────────────────────────────☆
sitan (He) 于 (Thu Dec 11 09:57:16 2008) 提到:
我们的儿子孙夏冰，北大物理学院03级本科生，于零七年四月十一日到北医三院就
诊，经过两天时间进行B超、CT、核磁共振等各项检查。诊断为："右肾占位性病变，肺
部多发性小结节。"我们要求立即住院治疗，泌尿外科以（星期五）周末无医生在位拒
收，后经我们家属多方努力才于十六日住进泌尿外科病房。入院后我们恳求早日手术治
疗，可是马潞琳主任以手术安排不过来为由一直拖延手术日期，后在一个朋友点拨下，
二十日上午七点三十分我们找到主任办公室，送上五千元红包后主任才答应安排二十四
日上午手术。
四月二十九日上午（术后第五天）我们找马主任商议，能否请化疗科或放疗科会诊
，以便安排下一步治疗方案。马主任却要求我们自己去门诊挂号就诊，拒绝了我们提出
会诊的请求。
五月三日，（术后第九天）我们的儿子呼吸逐渐急促，气喘严重，无法说话，故请
求值班医生给予处理，下午做了床头B超检查，提示胸腔有大量积液，但大夫说无法... 阅读全帖 |
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J**n
发帖数: 1224 | 9 That's not surprising at all. I will be very surprised if it was the
other way around.
Monoclonal antibody is against one specific epitype of antigen. If
it works, it works. If not (for example, under immunohistochemistry
conditions, methanol, paraglutahyde...), it won't. Polyclonal antibody
is against a great variety epitype of the antigens. Some clones of
antibody might only work for western, the others might work for immunohist,
some might work for flow, eta. Very few monoclonal antibodies ca |
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l*********i
发帖数: 332 | 10 四.抽丝剥茧 上
终于可以说到文章的数据了。我发现我真的非常啰嗦也。
最后再多说一句，刚刚看文章的时候发现，此文章的通讯作者原来是我崇拜的偶像之一
Si
lva的博后，有关Silva见Tonegawa一文。而且这个Paul Frankland在Silva实验室做的
非常
棒，发表了一篇Nature, 一篇Science，第一次在分子和细胞水平证明了，长期记忆可
能储
藏于大脑皮层中。关于长期记忆和短期记忆的讨论，我在Talk to Tim Tully一文中会
详细
讲解，构思中，敬请期待。
这篇文章所有的重要数据全集中在Figure 1中，而且最重要的数据仅仅是Fig 1h, 就这一
个panel，是这篇文章最重要的数据。我们把这个Figure 1讲清楚了，这篇文章也就理
解了
。
开始最常规的journal club八股文，Fig 1a, 讲他们怎么做这个学习和记忆的测试，用
Br
dU标记新生成神经元，然后进行水迷宫测试，然后牺牲小鼠，进行免疫组化，检测大脑海
马区中的神经细胞。为了最后方便比较，他们将标记和最后检测的时间间隔固定，10周，
这一固定，就混乱了。我花了好久才理解这是 |
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w*******s
发帖数: 10 | 11 应该很多软件可以这么做吧。
最近我正在用olympus fv1000的confocal，发现olympus的fluoview 就有这个功能。设
置两个图的threshold，马上就有结果了，很像flow cytometry的。 |
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y**y
发帖数: 36 | 12 现在有HRP （brown） and AKP(blue to purple) double staining IHC
为什么IF不行？ |
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j*z
发帖数: 6 | 13 十分感谢你的回复。我需要计数脏不同部位，比如心房心室，的干细胞数目，因为它们
不是均匀分布的，如果用IF，暗室中不方便确定部位。其二，如果照过像之后，荧光就
退了，不便于重复。
能不能告诉我主要的试剂盒或试剂的厂家及其分类号。再次感谢！ |
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j*z
发帖数: 6 | 15 Thank you so much. I am planning to try HRP/DAB + AP/New Fuchsin. |
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N***P
发帖数: 153 | 16 牛。做啥实验，要用掉这么多的普通tips？
做分子生物，养细胞，用的都是一次性filter tips，不需要自己装啊。免疫组化也用
不了几个普通tip吧？
现在感觉咱老板还不是太抠。 |
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g****n
发帖数: 3 | 17 有兄弟姐妹经常做免疫组化染色，细胞转染之类的，并想赚些零花钱的（注意是零花钱
），请站内联系 |
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W*********n
发帖数: 775 | 18 请问各位大侠，
我想买一个抗体用，结果只查到一个抗体，用途说明中说可以用在dot blot 和 ELISA
及免疫组化中。只是没有说western blot中可用. 我没有做过dot blot. 请问这个可以
用在dot blot的抗体，一般情况下可否用在我的western blot上？浓度一般需要做如何
调整？
谢谢！ |
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I*******h
发帖数: 99 | 19 手头有切片。
如果自己做的话，那家的抗体比较可靠？ |
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h********n
发帖数: 4079 | 20 depending on where you are.
try to find some local company. |
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I*******h
发帖数: 99 | 22 现在在临床，实在没时间。就买BD抗体了，如果自己做的话。 |
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h*****o
发帖数: 342 | 23 他们并没有杀老鼠再做imaging，他们只是把老鼠麻醉了。
这个东西临床上不一定好用，你得测清楚什么时候是背景荧光，多长时间这些背景荧光
被排出去，多长时间真正的信号被降解掉。从他们的图上看，在老鼠上面好像注射两小
时后时间最好，在人身上是多少不好说。而且得做些免疫组化的片子来看看有imaging
信号的地方是不是真是癌组织。
不过他们用FACS能检出100多个癌细胞的那个应用挺酷的，也许对白血病的早期检测有
帮助吧。 |
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n***w
发帖数: 2405 | 24 double staining?
you can choose antibodies from two different host animals. |
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s******e
发帖数: 370 | 26 didn't quite get your question,
is it you don't have frozen sections, or you can't get immunofluorescence,
or problems with antibodies? |
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s****9
发帖数: 932 | 27 Check Fig 2 on this paper http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19597478. If antibody is good, two color IHC is no difference to one color IHC. Used to do it every day.
It is doable for use three color as well (blue, red, and brown) for IHC staining.
么？ |
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m***i
发帖数: 2013 | 28 我想确定一个受体在神经细胞的synaptic cleft(post-synaptic)里面的表达情况，
因为没做过相关实验，不知道目前用哪种技术。当然我想最后成像时ｃｏｎｆｏｃａｌ或者电镜应
该用得上。
假设试剂、抗体、设备都没问题，请做过相似实验的牛人指点一下哪种方法比较好，大
致怎么做。或者知道的给个ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ就行。在此先行谢过！ |
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m*********n
发帖数: 215 | 29 Abcam的 anti chicken GFP 抗体，效率极高，我们做免疫组化都是1：4000在用，背景
很干净。 |
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c****g
发帖数: 93 | 30 我做的是CHO cells， >10个细胞的一个克隆用我的方法基本能看到。一般的细胞及时
体积小点也应该是这个数量级吧。最后有没有clone还是依赖于你的效率，实在没有的
话就转染的plasmids多一些吧，我们一般10k cells/100mm dish，1-2ug plasmid，
48hr之后 add selection pressure。如果有clone，你后续的还要通过免疫组化或
western blot鉴定呢，通常positive的挺多的。 |
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n***w
发帖数: 2405 | 31 I used some antibodies from abcam to do IHC but I used frozen sections.
I am not sure of paraffin sections. |
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d*****s
发帖数: 647 | 33 Santa Cruz的抗体做IHC最好，一定有阳性结果 |
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d*****s
发帖数: 647 | 36 为了精确，单抗
为了阳性，多抗
实验目的决定实验方法
。 |
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t******n
发帖数: 354 | 38 尽量的保证抗体的浓度和incubate的时间一样 |
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F***d
发帖数: 11 | 39 Yes. You can. It is very easy. Just ask how people in pathology do it. |
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J******9
发帖数: 736 | 40 我很少接触IHC试验，实验室新进一个抗体，老板要求看看阴性、阳性对照的染色情况。
我查询了一下，阴性对照，通常需要做：
1，空白对照（pBS替代一抗）；
2，血清替换对照：同种属动物的正常血清替换一抗；
请问“血清替换对照”，具体怎么做？是不是直接用血清液（原液）添加在组织片上，
或者是需要稀释（用什么稀释？稀释度一般是多少？）
请大拿赐教~！ |
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h*******o
发帖数: 4884 | 41 I think all you need is to include an No-primary antibody control.
For example, you have mouse sections, and your primary antibody is rabbit
anti-mouse
for your sample: dilute your primary antibody in your incubation solution (
normally PBST + 5%-10% horse/goat serum), followed by washing. then your 2
nd antibody will be horse/goat anti-rabbit antibody in incubation solution.
For your control: just use your incubation solution without primary antibody
.
This is particularly important if your pri... 阅读全帖 |
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J******9
发帖数: 736 | 42 谢谢。
另外老板还提到一个阻断这个抗原（比如A）的表达，是用A peptide来检测吗？该如何
处理？跟一般的IHC步骤一样吗？仅仅是将peptide替换一抗？
我完全没有概念，谢谢赐教~！ |
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D*a
发帖数: 6830 | 43 2楼说的是空白对照，没必要用血清对照。反正我从来不用。
但是还有一个阴性control 很重要，比如你在brain里面KO掉了蛋白A，你隔壁实验室说
他们有一个在肝脏里面看蛋白A是不是被KO掉的抗体。你于是拿过来在brain上试了试，
发现哇，KO和WT都闪闪发光。。。-_-III
这种情况可以出现在空白对照很干净的抗体上。 |
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k*****s
发帖数: 63 | 45 你可以做只有二抗的对照
血清稀释对照，大概5%-10%
况。 |
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k*****s
发帖数: 63 | 47 一抗里加血清有时候会有意想不到的效果
所以用血清对照有其道理的，有时候可以降低只有二抗时候的非特异染色 |
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h*******o
发帖数: 4884 | 48 I don't quite understand what you meant.
My guess is to use peptide pre-absorbed antibody as negative control.
Honestly, I never bothered to take this step in the past.
Guess for a new antibody, it is good to try. |
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