发帖数: 1 | 1 中国历经五千年的文化沉淀,积攒了很多在现如今看来古色古香的东西
而颜色就是其中一种
下面这些颜色你见过吗?
他们是最美中国色!
你最喜欢哪一种???????? |
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h****d 发帖数: 1305 | 2 RT,在STAR看到的消息,但是沉淀的BBS太慢了,无法忍受。
多谢多谢。。
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y***o 发帖数: 163 | 3 什么位置
202.130是哪啊?
RT,在STAR看到的消息,但是沉淀的BBS太慢了,无法忍受。
多谢多谢。。
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k**********g 发帖数: 989 | 4 有听过 septic tank 吗?最佳的沉淀方法 |
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n**********1 发帖数: 251 | 5 最近要做mRNA-Protein co-Immunoprecipitation,对于大致的步骤和原理大概知道
,不知道有没有相应的试剂盒,还有在沉淀下来后,为什么要加入yeast tRNA,或者
linear acrylamide 和 glycogen,据说作用是carriers,我不太知道具体是什么作用
? |
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m****m 发帖数: 395 | 7 用饱和硫酸铵沉淀了蛋白,完全去除上清液后,PELLET用BUFFER溶解,先用PIPET轻轻
把PELLET打碎成小碎片,然后在37C超声水槽里超声,最后还是有微小的蛋白碎片怎么
都不溶解,测了OD280=2左右,也不算很浓啊,这个浓度的时候这个蛋白一般都是溶解
的,测了PH也没有问题。请问该如何让蛋白完全溶解阿? |
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g*****y 发帖数: 6325 | 8 我纯化的蛋白在dialysis过程中总是有很多沉淀。 纯化的蛋白要做NMR所以好多方法都
不可行。 因为用ion exchange
chromatography, 也不能用高浓度的Nacl. 大家有没有什么建议呢? |
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g*****y 发帖数: 6325 | 9 你的蛋白本身不好融,你做融合蛋白又切下,当然就又沉淀了。 我要是你根本就不会
浪费时间做融合蛋白。做了就不要
切。 |
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b******n 发帖数: 4225 | 11 这个sds碰上钾离子沉淀是碱法抽质粒的基础之一 |
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K**********e 发帖数: 188 | 12 ??为什么不可能?
就是含有氯化钾的buffer,遇到loading buffer里面的SDS,生成SDS钾,就沉淀了。
会不会影响跑胶? |
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K**********e 发帖数: 188 | 13 用丙酮沉淀,会不会把盐也搞下来呢?
会损失多少? |
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j*******8 发帖数: 933 | 14 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了! |
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j*******8 发帖数: 933 | 15 沉淀前太稀了。 其实有人用不加秀芬兰的SB溶蛋白, 然后测浓度, 然后再泡脚。 不
过我不喜欢。 |
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j*******8 发帖数: 933 | 16 老大所言极是!可惜昨天没看到回帖, 我们就直接离心了, 结果拿到写浅黄色沉淀。 |
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t****p 发帖数: 1504 | 17 不知道本版有没有人有抗体纯化的经验。
血清过抗原柱,用PH2.5的Glycine洗脱,最浓的几管fraction沉淀出来了(管子有加1M
Tris buffer),形成浑浊液,无法重新溶解 (调PH,加盐都无效)。
溶解问题不解决没办法dialysis,抗体放4度时间长了估计也有问题。哪位知道trick赶
快指点一下,包子相谢! |
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b**********8 发帖数: 349 | 18 如题,谢谢。放在室温下4个月左右,为什么会出现黄色沉淀?可以过滤后重新使用吗
? |
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s******s 发帖数: 13035 | 19 没见过黄色的,不过白色沉淀有时候会有。37-55加热就行了
你一过滤浓度就不对了 |
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k******0 发帖数: 1073 | 20 很可能是你的重组蛋白质不稳定,所以在溶液中出现沉淀,在GST Beads上聚集,不能
被洗脱。 |
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o**4 发帖数: 35028 | 22 我做Flag pull down,之后把elution冻在-20°过夜,今天早上解冻的时候发现蛋白质
沉淀,
我加了SDS (终浓度1%),煮了5分钟,还是没见到任何溶解,
请问该怎么溶解蛋白质啊?
用loading buffer煮一下能溶解么?
谢谢 |
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g***s 发帖数: 30 | 23 最近实验室有人在做一个蛋白激酶,这个激酶是和cell adhesion有关,但是不是膜蛋
白,应该只是membrane associated。我们想IP这个蛋白,buffer是1% triton,后来还
加了点SDS。结果每次裂解后,发现离心后上清中蛋白非常少。也尝试过不同的PH,所
以应该也不是等电点沉淀的问题。不知道各位有遇到过类似的问题吗,有什么好的尝试
条件?非常感谢 |
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s********x 发帖数: 472 | 24 你的detergent应该可以溶膜了,沉淀主要是细胞骨架。
看看你的蛋白是不是和骨架结合吧。
还有可能是过表达 折叠不好 根本不溶。
看看免疫荧光是不是有聚集。 |
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v**********t 发帖数: 9 | 25 从Dharmacon订的RNA,25mer, single-strand, HPLC purified, deprotected,
desalted.
拿到手后用DEPC water resuspend, 加到蛋白溶液后就把蛋白给沉淀了。先后订的三
批RNA全这样。
哪位知道这是怎么回事? |
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v********a 发帖数: 646 | 26 关于RNA-protein的免疫沉淀,我有两个问题一直想请教。因为基础不好,请大家不要
见笑。
1、组织裂解之后,加等量的lysate分别和IgG ctrl和P53 Ab 孵育。
请问: 在这里IgG ctrl组和p53 Ab组分别要做三个或三个以上的重复么?
还是每次只做一管的IgG ctrl和P53 Ab ,把同样的实验重复三次,从而得到结果?
2、为什么发表的文章里面,许多IP实验图里,都要loading一个什么10% input的样品?
3、IP实验如何控制误差?
谢谢哈 |
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c******h 发帖数: 4573 | 27 水溶液中聚合异丙基丙烯酰胺(NIPAM)用什么沉淀剂沉淀阿?
甲醇,丙酮,乙醚好像都不太好 |
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b**s 发帖数: 589 | 28 more time and more solvent(甲醇,丙酮,乙醚)
or maybe your produced polymer has too small MW to 沉淀 |
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t***m 发帖数: 114 | 29 NIPAM在一定分子量下对某一配比的水和甲醇的混合物
有一个沉淀点
不过这个比例比较难确定,所以要有些耐心,一点一点滴加甲醇试试
以上观点未验证过,讨论中听来的 |
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w******r 发帖数: 43 | 30
最好是在真空烘箱里干燥至于恒重。
一般用沉淀法做共混样品时,溶剂合非溶剂的比值是1:10.
既然这样,你为什么不直接挥发呢?在真空下应该是很快的。 |
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m*******0 发帖数: 119 | 31 初来乍到,弱问:
现有量子点的甲苯溶液。
想要用另外一种溶剂将量子点进行沉淀。
是不是用加入无水甲醇(或其它有机溶剂),搅拌就行了?
需要回流啥的吗?
谢谢指教。 |
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m*******0 发帖数: 119 | 32 多谢指教。
我是想通过沉淀的方法,把量子点的甲苯溶剂换成chloroform。
for
bit |
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j********i 发帖数: 2412 | 33 你们见过么?
貌似橄榄油里有wax,温度低会沉淀出来
我那瓶橄榄油越沉越多了,可怕 |
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l****t 发帖数: 36289 | 35 就是的啊
网上说橄榄油在低温情况下(比如放冰箱)会出现沉淀,这是正常现象
你说你在美国的时候从来没见过,我老觉得是因为你在美国的时候橄榄油没在你现在所
处的低温的情况 |
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s*********Z 发帖数: 695 | 39 沉淀:
怎么才习惯的角度,你给我的爱不在,离开掩埋,还没反映过来,就化成了悲
哀、她给你的爱,应该感慨依赖,温柔在你胸怀,幸福却将我撕开。 |
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c***c 发帖数: 2721 | 40 “六四”已过去了十七个年头,这是一个不能忘却的日子。虽然 这个日子在共产党
的杀人历史上,不是最多的一次,但是这一次他所面对的不是他革命的对象--“地富反坏
右”。而是一批在他执政以后,以共产党的话来说是“生在红旗下,长在红旗下”的一代
青年,是共产党自己培养起来的大学生,而杀人地是在共和国的第一广场“天安门”,派
出的是全副武装的正规军,用的是坦克和机枪,而且是在全球新闻记者的面前。因此,“
六四”事件成为全球震惊的大事,在全世界的制裁下,差一点要了共产党的老命。“六四
”青年学生血洒广场,历史记住了这一天,人民记住了这一天,共产党也记住了这一天。
从此,每年“六四”共产党是草木皆兵,把一切都扼杀在萌芽之中,那怕是一封“六四”
难属的信,那怕是一个无关“六四”的上访者,都把它视作可能萌发成一场,使共产党倒
台的政治运动的触发点严加对待,每年“六四”都是风声鹤唳之时。
回顾十七年前的“六四”,因有了历史的沉淀,对于这场运动有了反省的时间,但
一部分人对“六四”的反省的结果,是因学生的过激行动才造成了共产党的镇压,这样的
反省是奴才的反省,“六四”人人共知,学生的要求只 |
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发帖数: 1 | 41 九、冶炼
方法一三氧化二铝保护碳电极,水冷铁护套,隔离冶炼土壤岩石。粉碎,填满空隙。
电极,空气不要氮气保护。碳酸钠氢氧化钠溶液吸收废气。电流冶炼。把高电阻岩石投
入低电阻岩浆
1、三氧化二铝保护层,碳芯,渗铝钢,水冷或空冷氮气吹气保护气体。划刻敲碎凝结
玻璃。
2、石墨碳电极高压交(直)流电放电电流加热。
3、二氧化硅蒸发,沸点前,后,2230度。碳化硅管道,高温胶,空冷。
左右移动后置式吹风扇。
烟雾冷却管道,或水冷(帘喷雾)吸收,或负压水冷吸收。二氧化硅水去尘。
空气冷却管道,空、水蒸气混合冷却管道。
出矿。环保。蒸发氯盐去放射性。
如果用空气需要全部吸入碳酸钠溶液中,防止硝酸腐蚀。
换坑。
500千伏高压直流电直流电,即使是花岗岩20万电阻率,10平米5米每秒25mw,25000焦
尔每克,20吨每坑每天,300多万个连坑。
先管道空冷水冷灰尘;吸气风机在碳酸钠池后,气管底孔排气,拍尘,可疏通。多几个
碳酸钠池。酸池吸收,a盐酸水池,b、空冷,c凉水池,d氨水池,e亚硫酸钠池,f碳酸
钠池,再酸洗二氧化硅。竖炭化硅管冷却。酸池盖
蒸发池熔岩水平下降无异常
气流方向控制。
碳电极... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 42 十四、矿产冶炼系统
1、 集中挖一地,运河、水库、蓄能电站。
2、 矿产公司分布在电厂,不集中。
3、 空调服,制冰机冰服。
4、 先有炉盖电极防尘。后无炉盖电极提高到2000度。封闭室水冷空冷系统
5、 封闭室密封门,二氧化碳注入吸出系统。
6、 输出二氧化碳管道。每秒2.5立米。管道通多个罐的上端。玻璃钢罐或复合罐。
7、 硅酸钠池对半使用。二氧化碳气体循环系统。液体注入吸出系统。反应时间结
束后吸出压滤。
8、 离心材料,钛,硬塑,玻璃钢,等。
9、 压滤材料,钛,硬塑,铁,塑料复合等。碳化硅、氮化硅轴承。
10、 碳酸钠溶液300度水蒸气蒸发。玻璃管道冷却。数据没问题。
11、 活动转移轨道。
12、 沸腾床?结合光热。玻璃罩。控制在200度,多倍碳酸钠堆列。不完全蒸发可
后期电加热彻底蒸发水分。
13、 冶炼室冷却,水冷。胶密封高温塑料。
14、 轨道交直流电极。
15、 冶炼蒸汽空冷
16、 电厂空冷冷却用金属数量没问题。
17、 1万平方公里镜面2000亿吨水。
18、 ... 阅读全帖 |
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r***u 发帖数: 1272 | 43 1.问:CAST工艺,污泥脱水后的混合液直接排入进水泵房,导致进水COD,SS偏高,并
影响选择池的反硝化反应(因为前段爆气沉砂池已经降解了部分C源),应该如何解决
?
答:这是一个目前污水处理厂普遍被忽视的问题,即污泥脱水后的滤液回流至生化池后
对生化处理的影响问题。由于污泥脱水前要加调质药剂,如PAC和PAM,有些药剂有一定
的毒性,污泥脱水时可随滤液回流至生化反应池。处理这些滤液在技术上没问题,只是
成本问题,如果选用合适的污泥调质药剂,并控制好加药量以及脱水机的进泥量等,对
前面的生化处理就不会造成大的影响。还是强调的是,污泥脱水效果取决于污泥处理工
序的全过程管理,包括污泥浓缩池的管理。
2.问:“污泥泥龄”是怎样确定的?如何来控制?究竟是用排泥量确定它,还是用其
它来确定排泥量?
答:泥龄、F/M、等与其说是运行的控制参数,不如说是设计方面的参数,在工艺控制
中的只是参考参数。实际运行中排泥量通常是根据MLSS值加上经验来控制的,在SVI相
对稳定的情况下,也可用SV30来参考。
3.问:本厂用的是卡罗塞尔氧化沟工艺。有时装置的出水氨氮比进水还高,进水TP2.
5mg/L ... 阅读全帖 |
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r****o 发帖数: 105 | 44 本文献给YL
(九) 沉淀,沉淀,沉淀
上一部分我匆匆提到了用硫酸氨沉淀来去掉PEI(Polyethyleneimine)的步骤。
不常做生化的同学可能对硫酸氨沉淀的方法不熟悉。但其实这种沉淀是蛋白质纯化中
及其重要的一种方法。说实话我过去也很少接触,但是在这个课里面,四组实验中有
三个都用到了这个方法,可见其重要性。
硫酸氨沉淀是怎么做的呢?其实很简单,把磨细了的硫酸氨粉末往样品溶液里
倒就行了,蛋白就会相继沉淀下来。由于不同的蛋白,在不同的硫酸氨浓度下被分
别沉淀下来,这种方法把蛋白质样品粗粗的分离一下。这种方法对大量样品尤其好
用,因为比较方便快捷便宜。硫酸氨沉淀的优点是什么呢?最大的优点是这东西虽
然能让蛋白质沉淀下来,但是不会让蛋白质变性,所以沉淀下来的蛋白质一般可以
重新溶解。
其实沉淀蛋白质的方法有很多种,但是对于娇贵的蛋白质来说,很多常用方法
都太harsh了。我举两个例子把:TCA沉淀大家都熟悉的。TCA是个强酸,施放出
来的质子中和了蛋白质的负电荷,只留下正电荷与TCA形成不溶物,从而变性。
丙酮沉淀,通过改变介电常数来降低蛋白质的溶解度,从而沉淀, |
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f****o 发帖数: 8105 | 45 【 以下文字转载自 everybodydeservestruth 俱乐部 】
发信人: fuxeto (富士德), 信区: everybodydeservestruth
标 题: 南水北调工程已然完全失败,后患无穷(图)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 28 22:08:07 2016, 美东)
大陆南水北调工程是由前中共党魁江泽民强行批准上马的浩大工程,已数次引发外界的
质疑(网络图片)
空前浩大,举世瞩目的中国南水北调工程东线和中线一期,至今已经耗资达约二千五百
亿人民币,加上后续工程和维修养护运行管理费用,总共将耗资五千亿人民币。东线已
经在2013年底宣告通水,中线也在2014年汛后正式通水。这样一项世界空前的建设工程
,按官方说辞,功在当代,利在千秋。尤其是北方缺水,已到干渴难忍,不可持续的地
步。南水北调若却能缓解北方干渴之苦,是莫大的功利,应该全国敲锣打鼓,大大庆贺
一番。可是在官方媒体的宣传上,对南水北调建成的报道着墨不多,似乎是有意回避难
言之词。各方重要决策者,建设者,负责者,指挥者,也不见纷纷出来邀功。到底是怎
么回事呢?
我曾经撰文,痛斥整个南... 阅读全帖 |
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M******a 发帖数: 6723 | 46 2016-08-15 明镜爆料微信号mjbl513
功能介绍
1122
空前浩大,举世瞩目的中国南水北调工程东线和中线一期,至今已经耗资达约二千五百
亿人民币,加上后续工程和维修养护运行管理费用,总共将耗资五千亿人民币。东线已
经在2013年底宣告通水,中线也将在2014年汛后正式通水。这样一项世界空前的建设工
程,按官方说辞,功在当代,利在千秋。尤其是北方缺水,已到干渴难忍,不可持续的
地步。南水北调若却能缓解北方干渴之苦,是莫大的功利,应该全国敲锣打鼓,大大庆
贺一番。可是在官方媒体的宣传上,对南水北调建成的报道着墨不多,似乎是有意回避
难言之词。各方重要决策者,建设者,负责者,指挥者,也不见纷纷出来邀功。到底是
怎么回事呢?
我年前撰文,痛斥整个南水北调工程决策和实施是屁股决定大脑,罔顾起码的自然和科
学原理,必败无疑。现在根据各方的报道,不但东线和中线都是失败工程,并且还是惨
败,一败涂地,无法交代,无法收场。
南水北调怎样才算成功或者失败
继续讨论之前,有必要对南水北调这样空前规模的远距离输水工程,怎样才算成功,怎
样算是失败,先下一个定义。没有定义,只要有一桶水流到了北京... 阅读全帖 |
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f****o 发帖数: 8105 | 47 【 以下文字转载自 everybodydeservestruth 俱乐部 】
发信人: fuxeto (富士德), 信区: everybodydeservestruth
标 题: 南水北调工程已然完全失败,后患无穷(图)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 28 22:08:07 2016, 美东)
大陆南水北调工程是由前中共党魁江泽民强行批准上马的浩大工程,已数次引发外界的
质疑(网络图片)
空前浩大,举世瞩目的中国南水北调工程东线和中线一期,至今已经耗资达约二千五百
亿人民币,加上后续工程和维修养护运行管理费用,总共将耗资五千亿人民币。东线已
经在2013年底宣告通水,中线也在2014年汛后正式通水。这样一项世界空前的建设工程
,按官方说辞,功在当代,利在千秋。尤其是北方缺水,已到干渴难忍,不可持续的地
步。南水北调若却能缓解北方干渴之苦,是莫大的功利,应该全国敲锣打鼓,大大庆贺
一番。可是在官方媒体的宣传上,对南水北调建成的报道着墨不多,似乎是有意回避难
言之词。各方重要决策者,建设者,负责者,指挥者,也不见纷纷出来邀功。到底是怎
么回事呢?
我曾经撰文,痛斥整个南... 阅读全帖 |
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c*********d 发帖数: 9770 | 48 2017-12-01 看法 微信号 kanfaroo
功能介绍
面对世界,每个人都应该有看法;所有人的看法之和便是这个世界。
来源:根据网友“boss的神油”的文章:《哈哈,好一个集中力量办大事,世纪大工程
太震撼了!》编汇而成。
在中国“集中力量办大事”的模式中,有一项特大型的世纪工程,现在搞得只有虎头,
连蛇尾也不见了。这就是空前浩大、举世瞩目的中国南水北调工程。东线工程早已经在
2013年底宣告通水,中线工程也在2014年汛后通过水了。按官方说辞,“功在当代,利
在千秋”。南水北调能大大缓解北方干渴之苦,理应全国会敲锣打鼓,大大庆贺一番才
对。可是,二年都过去了,习惯于好大喜功、赞美声不断的官方媒体,却从来不对这么
一项世界空前的伟大的建设工程,及时地跟踪报道,更无须谈及对该工程的决策者、指
挥者、建设者表彰授功的新闻了。这实在出乎人们的意料之外、蹊跷得很。
这里面是否有什么难隐之词,还是因为正在测试验收阶段,或没有达到预期的设计效果
,或者更可怕的是,这是一项失败而丢脸的大工程?因为东线和中线一期,至今已经耗
资达约2500亿人民币,加上后续工程和维修养护运行管理费用,总共将... 阅读全帖 |
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n**t 发帖数: 45 | 49 【 以下文字转载自 Biology 讨论区,原文如下 】
发信人: royluo ( 罗马情结), 信区: Biology
标 题: 从纯化到星辰---CSH蛋白质纯化课侧记(九)
发信站: Unknown Space - 未名空间 (Sun May 1 22:44:00 2005) WWW-POST
本文献给YL
(九) 沉淀,沉淀,沉淀
上一部分我匆匆提到了用硫酸氨沉淀来去掉PEI(Polyethyleneimine)的步骤。
不常做生化的同学可能对硫酸氨沉淀的方法不熟悉。但其实这种沉淀是蛋白质纯化中
及其重要的一种方法。说实话我过去也很少接触,但是在这个课里面,四组实验中有
三个都用到了这个方法,可见其重要性。
硫酸氨沉淀是怎么做的呢?其实很简单,把磨细了的硫酸氨粉末往样品溶液里
倒就行了,蛋白就会相继沉淀下来。由于不同的蛋白,在不同的硫酸氨浓度下被分
别沉淀下来,这种方法把蛋白质样品粗粗的分离一下。这种方法对大量样品尤其好
用,因为比较方便快捷便宜。硫酸氨沉淀的优点是什么呢?最大的优点是这东西虽
然能让蛋白质沉淀下来,但是不会让蛋白质变性,所以沉淀下来的蛋白 |
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f**u 发帖数: 346 | 50 呵呵,你这样能沉淀下来DNA才奇怪呢。DNA的酒精或者异丙醇沉淀是需要一定的盐浓度
的,常用的是0.3M NaAc。如果盐浓度不够是沉不下来的。你做Maxiprep的时候洗脱的
那一步是高盐洗脱,所以你第一遍沉淀不需要自己加盐,但是当你把沉淀溶解了以后二
次沉淀进一步纯化的时候一定要加盐才行。
另外说一句,你想把DNA里的盐完全去掉从化学上就是不可能的,磷酸骨架上的负电必
须要有正电的阳离子去中和,即使你用水去溶你的沉淀,或者用水从柱子上洗脱DNA,
都免不了有微量的盐。所以更可行的办法是找到一种和你的病毒包装实验compatible的
盐。由于Qiagen的elution buffer里的盐对于有些实验是不好的,所以有时候的确是需
要二次沉淀,不过沉淀前一定要自己调整盐浓度,一般来说加0.1体积的3M NaAc (PH 5
.2),然后再用1体积异丙醇,或者三体积酒精沉淀。我的经验温度是不重要的。冰箱不
冰箱无所谓。
另外向Maxi这种很麻烦的,建议你离心以后把上清留着,这倒确认最后得到了DNA。另
外对于Maxi,绝对不可能看不到沉淀,你肯定能看到很大很大的沉淀才对,否则肯定是
哪... 阅读全帖 |
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