s******y
发帖数: 220 | 1 转膜后，在page 胶的顶部（分子量大的蛋白部分）总是残留在膜上，下部很快就能弄
下来。
为什么会这样呢？
跑得是biorad的4-20%梯度胶，
我要看的一个目标蛋白正好还在有胶残留的那块，会影响下游的WB结果吗？ 用的那个
一抗本来就有点tricky，有这个残留的胶估计更讨厌了。
有什么办法能把膜弄得更加干净点吗？
谢谢。 |
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e********r
发帖数: 147 | 2 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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e********r
发帖数: 147 | 3 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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e********r
发帖数: 147 | 4 我们用最常用His tag + Ni-NTA（未加detergent）纯化到了一个可溶的细菌膜蛋白（
pET30a, 两个跨膜区）。虽然量很少，但有活性。Western blot和MS都鉴定该蛋白是正
确的。我们用这个蛋白做了论文里所有的实验。诱导条件是12度，24小时，0.5 mM
IPTG。
论文审稿后问题不大，但有个审稿意见让我们说明一下是“怎么纯化得到膜蛋白的”。
我猜专家是做蛋白结构的所以觉得很意外，但我怎么回答他比较合适呢？总不能说“我
纯化到了，所以我纯化到了吧”，这样审稿人会发怒滴，呵呵。请各位给个合理的建议
，谢谢。 |
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S***J
发帖数: 1210 | 5 分子量小的膜蛋白可以上抗体，然后电镜搞定，这个已经证明可行了。
水溶蛋白之所以不用电镜，还是因为x-ray优势更大，很多时候x-ray做得更快，分辨率
更高。当然，水溶蛋白不如膜蛋白好发文章也是一个原因。
目前看来，膜蛋白结构领域有更多lab是paper oriented，水溶蛋白结构圈要好不少，
估计是水溶蛋白lab如果不focus，那真的是很难生存了。
amphipol |
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发帖数: 1 | 7 我只是做过很多tail anchored protein，有一些经验。
我觉得你说的已经可以充分证明作用区域在TMD。如果现在设想的单纯用TMD的办法又表
达量很低，那么可以考虑swap TMD。就是找另一个在细胞膜上毫不相干的跨膜蛋白质，
挑它的TMD，就找中间20个非常疏水的AA应该没有问题，swap到你蛋白质里，然后做
CoIP。这个不相干的蛋白质作为negative control。这样可以保证你的蛋白质TMD外围
信号不变。
但是要提醒你，如果蛋白A和蛋白B都是跨膜蛋白，CoIP出来的结果可能是假阳性，特别
是你用的detergent只有NP40，并且negative control是cytoplasmic protein，比如
free GFP。那么AB会CoIP，negative control不会。因为NP40是弱detergent，我怀疑
membrane在buffer里被打成了micelle， 所以AB同在micelle里一起被IP。如果用RIPA
buffer你会发现AB不CoIP了，当然你也可以认为RIPA buffer太强了。所以除了CoIP最
好有其他证据证... 阅读全帖 |
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f*****6
发帖数: 153 | 8 求审稿， 二氧化碳 捕集 和高分子膜， 气体分离膜等方向
多谢 |
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L*****i
发帖数: 237 | 9 艰难梭菌伪膜性结肠炎的中医治疗（转载）
艰难梭菌伪膜性结肠炎的发生，抗病力及免疫功能低下、菌群失调是重要原因。广谱抗
生素应用之后，特别是林可霉素，氯林可霉素，氨基苄青霉素，羟氨苄青霉素等的应用
，抑制了肠道内的正常菌群，使艰难梭菌得以迅速繁殖并产生毒素而致病，本病也可发
生于手术后，特别是胃肠道癌肿手术后，以及其他有严重疾病如肠梗阻，恶性肿瘤，尿
毒症，糖尿病，心力衰竭，败血症等患者。
患者一般抗病能力和免疫能力极度低下，或因病情需要而接受抗生素治疗，机体的内环
境发生变化，肠道菌群失调，有利于艰难梭菌繁殖而致病。艰难梭菌及其毒素为本病致
病因素。
艰难梭菌伪膜性结肠炎是使用抗生素不当或使用化学治疗药物而引起的肠道二重感染，
临床上几乎所有的抗生素都可诱发此病 ，治疗原则是一经诊断明确就应立即停用抗生
素 ，因此，此病的西医治疗较难实施。我们采用大蒜汁辅以清热燥湿方剂进行调治 ，
取得了很好的疗效。
轻型 ：采用大蒜糖浆口服。糖浆制备 ：去皮紫皮大蒜 50克 ，捣碎后浸于38摄氏度温
开水100毫升内浸泡两小时 ，然后用纱布过滤 ，制成大蒜汁 ，再加入半量糖浆 （配
制后置 4摄氏度... 阅读全帖 |
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b**s
发帖数: 589 | 10 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区,原文如下 】
发信人: hunan (xiangyun), 信区: Chemistry
标 题: 做高分子膜的帮个忙
发信站: The unknown SPACE (Sat Mar 30 19:12:25 2002) WWW-POST
我想得到一层超薄高分子膜(~100nm), 膜表面应该含有大量的OH基团。
那位能推荐一种合适的膜材料，从那儿能买到这种膜材料 (我不想自己做)，用什么溶剂
等等。
谢谢 |
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a*i
发帖数: 1652 | 11 膜不是平面的，有一定弧度。
最近出现的问题是，有的膜看起来不光滑，也不够透明。
当然大多数情况下，得到的膜很光滑透明。
不知道一般有什么细节要注意的？ |
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e***q
发帖数: 93 | 12 【 以下文字转载自 ChemEng 讨论区 】
发信人: ezfaq (ezfaq), 信区: ChemEng
标 题: 求:在中空纤维膜管层的质量传递公式
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 17 23:26:52 2008)
物质Ｂ随着时间由管层向壳层扩散（假设膜的长度为Ｌ，膜的面积为Ａ，物质Ｂ的流速
为Ｑ，质量传递系数为Ｋ），请问：在管层内物质Ｂ的浓度随时间的变化公式是什么？
如何推导？
多谢！ |
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N****r
发帖数: 507 | 13 我的民科想法是： 空间弯曲和引力各自都是由于质量引起的，但不能说它们互相引起
，也就是不能说引力是空间弯曲引起的。
比如那个youtube上的视频：橡皮膜上面放一个大铁球，膜被压弯曲了，然后小铁球自
然就滚向大铁球。 但是这难道不是因为在这个膜空间之外还有个重力场么？ 如果推广
到宇宙空间的话，大恒星周围空间弯曲了，光线的传播会弯曲，这比较好理解，但是弯
曲了行星就会被吸过去么？难道本质不还是万有引力么？
希望不吝赐教，鞠躬 |
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N****r
发帖数: 507 | 14 我的民科想法是： 空间弯曲和引力各自都是由于质量引起的，但不能说它们互相引起
，也就是不能说引力是空间弯曲引起的。
比如那个youtube上的视频：橡皮膜上面放一个大铁球，膜被压弯曲了，然后小铁球自
然就滚向大铁球。 但是这难道不是因为在这个膜空间之外还有个重力场么？ 如果推广
到宇宙空间的话，大恒星周围空间弯曲了，光线的传播会弯曲，这比较好理解，但是弯
曲了行星就会被吸过去么？难道本质不还是万有引力么？
希望不吝赐教，鞠躬 |
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a**e
发帖数: 1072 | 15 我在纽约小转了一圈，没去过高级的，普通店全是中国国内牌子的膜，一般一辆车都搞
100块钱左右吧，这膜倒是短期内也没啥不好（听说很久以后会褪色），也能block紫外
线，降温效果也挺明显的，不过这膜贴一辆车的成本撑死也就10刀我估计，90块手工费
高了点感觉。
3M的有啥区别吗？我看ebay上有卖的，一辆车好像80-100左右 |
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i***s
发帖数: 39120 | 16 网传西瓜封膜放冰箱细菌增10倍
专家称网络实验不靠谱，冰西瓜寒性隐患更大
前天，一位市民给本报食品药品安全专栏打来电话时很激动：“夏天我最爱吃西瓜，听说西瓜盖上保鲜膜后细菌更多，这可咋办？”问他听谁说的，答：“网上。”
上网搜索，一条“西瓜封膜放冰箱细菌暴增10倍”的消息夺人眼球，并声称“西瓜放入冰箱，使用保鲜膜后细菌反而增多！经过培养，保鲜膜处理的西瓜菌落数高达1356个，而没有保鲜膜的西瓜菌落数仅124个”，并将原因归结为“保鲜膜阻碍了西瓜降温，给细菌繁殖提供了条件。”
网络实验“靠不住”
昨天，市食品药品监管局专家段健民说，这则网上传言乍一看，的确怪吓人的，但这则“消息”有诸多漏洞。切西瓜的道具和砧板是否经过无菌处理？“经过培养”了多长时间等等……
那怎样的实验才算准确呢？段健民说，应该买一些不同产地、不同大小、不同生熟程度的西瓜，数量越多越好；然后把冰箱的温度设成2-8摄氏度的某一个固定值，再然后等几个小时，用温度计多次测量冷藏室温度待其恒定；再然后将西瓜刀、砧板、抹布还有瓜皮作无菌处理；再然后在无菌的环境下切瓜、贴膜，同时放冰箱；再然后过若干个小时后取出，“若干”的数字没有一... 阅读全帖 |
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b****a
发帖数: 4465 | 17 http://hk.apple.nextmedia.com/realtime/china/20130709/51543617
台灣台中市一名男子從香港搭機返台，邀請在機上新相識一名到台自由行的香港女
遊客，到他家裏住宿，卻連續2天在女子早餐飲料裏添加安眠藥，趁女子昏睡時性侵犯
對方。他原被控迷姦罪入獄8年，但因女子處女膜未破，二審時獲改判4年監。
事發於前年3月，該名香港女子當日發覺自己從早上昏睡到下午，醒來下體有疼痛
感等異狀，於是佯稱要到运歪t，期間詢問醫生她是否曾遭下藥，醫師遂建議她報警
。法院二審時查出，香港女子處女膜未破，改以較輕的用藥劑強制猥褻罪控告他。不過
，法官判刑時，嚴厲斥責他假意協助香港女子觀光旅遊，卻心懷不軌，侵害台灣治安 |
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n*******l
发帖数: 208 | 18 据英国《每日邮报》2月18日报道，有人曾说，作为易碎品常用外包装的气泡膜唯一的
作用其实是被捏。但或许没有人想过，捏气泡膜的习惯不是人类独有，小动物们也喜欢
！近日，Youtube上疯传的一段爆笑视频证明了这一点。在57秒的视频中，一只呆萌的
小浣熊不断地用前爪和嘴巴把气泡垫上的泡泡压扁，玩的不亦乐乎。
视频中，小浣熊极其“认真”地捏着气泡垫。它似乎对这个有趣的游戏很着迷，不
断地用前爪在气泡垫上发出“啪啪”的声音，来回捏个不停。
这个视频自上传后，迅速受到网友的欢迎，获得上百万的点击率。有网友评论道：
“从来没想过，我竟然和小浣熊这么相似！”(林熹) |
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p***n
发帖数: 17190 | 20 說穿了也就是個 PI膜
被吹成大猩猩 PI膜了
回頭作成斗篷
出門在外
車撞飛機摔都不怕了... |
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l*****O
发帖数: 402 | 21 没有第二性证的，尤其三岁小孩，基本只有中膜，内膜薄到忽略不计。怎么长癌？长癌
也只能长在中膜上。当然，有些无娃单身绝经老将要注意了，一直不来例假，没有正常
性生活，不仅精神不健康，还要得子宫内膜癌. |
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k********e
发帖数: 400 | 23 夏天车里太热，我想给车窗加膜。请问会不会影响视线？另外，什么地方加膜 性价比
高？ |
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u****r
发帖数: 2053 | 24 买的二手车，state inspection的时候说前面的车窗遮光膜贴的太往下了，我看了下，
确实超过了那个标的横线，说这次帮我做了，下次要给裁掉才能通过。
我想请问这种帮助裁剪或者贴车窗膜的地方叫什么？应该怎么找？
似乎普通的修车行不干这种事情。
麻烦知道的前辈指点一二，谢谢啦！ |
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c******n
发帖数: 16666 | 25 最近天热了 车没有tint 晒得很啊。。
考虑搞一下
版上考古了下 没发现太多有用信息
所以还是来唉问一下
1.tint自己diy可行性如何（借得到热风枪而且买pr-ecut的的前提下，后窗有curve估
计难度比较大）？
2.膜的选择问题，看到很多说非金属膜容易褪色起泡但是很担心金属膜对信号的屏蔽
陶瓷膜貌似太贵了。。。
3.最后就是透光率问题了，看了下35%基本还满足大部分州的要求，但是如果突然跑到
NJ这种前两排drivers door不允许tint的地盘。。会被拦下来不 |
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a*****a
发帖数: 1085 | 26 那洗车会不会影响这个防护膜？尤其是到自动洗车房，那大刷子在膜上刷一下，不会留
痕迹么？ |
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n****1
发帖数: 2895 | 27 俺家三辆车都贴了前窗,加州阳光太厉害。贴是是88%的。大概300左右,只是前窗,贵但
是值。前窗一定要好膜,否则戴上偏光墨镜会有花。88%的膜号称无色,不贴上还能看出
暗色,贴上后根本看不出来,特别是后窗全贴的话,车内较暗,根本就看不出来前窗贴膜。
不过隔热效果及其明显,没贴前开车会晒得胳膊疼,贴了后就好了。 |
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Y****a
发帖数: 17170 | 28
很好，目前排名第二的膜，
第一的是photosync的膜。
你问的价钱还可以 |
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b*h
发帖数: 637 | 29 【 以下文字转载自 SanFrancisco 讨论区 】
发信人: bbh (bbh), 信区: SanFrancisco
标 题: 苗比达哪里有修车的可以把玻璃上挡光的膜撕下来的
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 26 00:21:37 2015, 美东)
在高速上开车被拦下，说是前面的车窗太黑，给了一张ticket让在30天内把把玻璃上挡
光的膜撕下来。 不过自己是从dealer买的二手车，买了就这样，自己也看不出有贴膜
，感觉就是茶色玻璃。求推荐苗比达手艺好的修车铺。 |
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f*******9
发帖数: 249 | 30 我觉得应该不会是气泡，因为气泡都是好几年后才会出现。贴膜有一点灰很正常，就像
跟手机贴膜一样。多多少少都会有。而且3M的膜是太阳膜之中最好的。国内贴真的太阳
膜都要4-5000……我以前在国内就是做这个，很多还是A货3M
等水泡散掉后 就去找他们重新fix灰尘气泡！ |
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p***r
发帖数: 8071 | 33 “你的上家的破膜率这么高”－你怎麼知道“破膜率”高？坦率说，有人走了70台的，
都没任何问题，其实，大家注意点，就都没问题。。。我也曾经因为包装没考虑周到，
出过错，从次，注意就好了。。。 |
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t*********u
发帖数: 26311 | 34 经高人提点
如果大家还有上次pplar自爆的说收到破膜的货照片
看看那台机器和给我的照片里面的第四台
为啥两台机器破膜的方式和形态都那么一样？ |
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n*******4
发帖数: 6402 | 35 这个毛子蛮猥琐的，他的货应该也是发迪拜的，如果仅仅是膜破了，拿到我迪拜的店，
成本两个迪拉姆帮他搞定重新封膜，跟apple 差不多，收他2$服务费。 |
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P******a
发帖数: 162 | 36 工作忙了 急转。
第一张图里有5个颜色，都是金属拉丝的 $10包邮
金属拉丝简洁的手机壳和iphone 5 金属拉丝变形金刚的都是 $8
剩这几个颜色
透明磨砂tpu iphone 5 case $5
屏保膜一共有2种
和上面一起买，透明的，$1一个； 磨砂的-保护视力，不留指纹，$2一个。（屏保膜不
单独卖）
paypal，如有需要，注明颜色，email我， a**********[email protected] |
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p*******j
发帖数: 1613 | 37 好牛的手套膜，请问用的是那种高筋面粉呢？怎么感觉米国的高筋面粉不如国内的筋度
好呢~虽然也出膜，但从来木有手套过。。。 |
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z****n
发帖数: 1514 | 38 Some bread machines don't "出膜". I bought a $40 sunbean machine and never "
出膜", you need to buy a more powerful bread machine. |
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h**t
发帖数: 1678 | 39 油放的多点，多到一杯（面粉三杯）我都试过，以前没有出膜的都出了。出膜一个是揉
的要够久，一个就是黄油的量。用植物油替代黄油，太详细的对比也没做过，多方一些
就是。跟面粉也有关系，有的本身韧性好油性大些的就不怎么需要特别多油。 |
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W***e
发帖数: 5422 | 40 我从来都没弄出过膜，觉得说一定要弄出膜的都是骗人的！ |
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B********n
发帖数: 12753 | 41 以前觉得面包水分比例是不是搞错了
那么大比例的水分，那么粘手，肯定是我加多了
后来研究了一堆文字视频，顺带尝试了一堆，发觉，就应该是粘手的
现在我基本做中种（这里60%和40%面粉的概念，举例来说，就是好比你要做500g面粉的
面包，取当中60%，也就是300克做中种；余下200g留作第二天的主面团）
1 中种：总量里60%面粉 + 水 + 酵母 + 一半糖 （参照基本比例）
揉匀，室外1小时，然后进冰箱，12-24小时
2 主面团：余下40%面粉 + 水 + 另一半糖 + 盐 （参照基本比例）
揉匀，掺入中种，揉匀，KA 2档 5分钟
然后加入黄油继续2档5分钟
再上4档5分钟，一定能出手套膜
有些方子在1里不加糖，但是我试下来，不放糖发的效果没有放糖好
另外，KA搅拌的时候，我一般都先用Beater Blade，混合成团后，才换S头，这样能省
不少时间
---------------------
基本比例是
假设，面粉是1份，那么其它就是
水：占65%左右
酵母： 1%
盐： 1%-2%
糖： 5%-7%
油： 5%-7%
另外，几个含水量换算
全蛋： 75%
蛋黄： 50%
蛋白... 阅读全帖 |
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n*******e
发帖数: 3141 | 42 有的烂米背面有一层薄薄的膜，这个起什么作用，和没膜的比哪个好？ |
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M*****2
发帖数: 1093 | 43 我家有几扇窗户下午很晒，虽然也装了帘子，但是还是热。想贴上膜或者用别的什么办
法，最好是无色的膜，看不出来但挡主了紫外线。谁做过，大约多少钱一扇窗？会不会
影响玻璃的保险？谢谢！ |
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l**********s
发帖数: 255 | 44 国内一个朋友的亲戚得了脂膜炎，从06年开始腰，腿，臀部反复发炎肿大，用抗生素可
以消炎，但总是反复。住院10多次都没有得出明确的诊断结论，在北京301医院做穿刺
活检，结论是“纤维组织中少许脂肪组织及纤维母细胞，并见较多急慢性炎细胞浸润及
血管炎改变”， 诊断为脂膜炎。目前按照301医院的医嘱，用强的松等药，效果较好，
但用强的松减少时，又复发。
朋友想问美国有什么药，实在无处可问，请版上的各位指点。或者国内哪个医院治疗这
类病比较有效果？
虽然其实我是爱莫能助，现在中国医疗条件也不比美国差，但朋友是个热心人，他是尽
心多问。我也是尽心帮问，多谢大家啦。 |
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l**********s
发帖数: 255 | 45 前一段发过关于国内朋友家人的脂膜炎的问题， lmh 曾经给过回复， 在此谢过。
附件是他的病历，60多岁，男，没有其他疾病。
我的朋友说国内很多医院都去过了， 最后只能吃激素来控制，希望看看美国这边有什
么最新的方法。我也帮他查了一些医学论文，隔行如隔山确实看不太懂，貌似也是说要
吃激素。
lmh 曾说过不像是脂膜炎，不知道能不能再指点下。 谢谢。 |
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w**********s
发帖数: 57 | 46 代国内同学咨询膜性肺炎的西医治疗方法。前不久被确诊为膜性肺炎，普遍的治疗建议
都是首先中医保守疗法，如果效果不理想，再用激素药物加他克莫司或其它的免疫疗法
。想咨询美国对此类疾病的治疗方案，特别是在初期，相比起中医保守疗法，有没有效
果更好的西药？还有，除了激素药物以外，是否还有别的选择？不甚感激！ |
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m****s
发帖数: 58 | 47 究竟是“膜性肺炎”还是“膜性肾炎”？标题写的是肾炎，底下说的怎么全是肺炎？ |
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p****6
发帖数: 3373 | 48 【 以下文字转载自 Living 讨论区 】
发信人: pl6666 (nono), 信区: Living
标 题: 包子急求gift letter膜版 兼问问题
发信站: BBS 未名空间站 (Wed May 8 20:50:54 2013, 美东)
包子急求gift letter膜版
大概从国内汇款3万美金过来作为房子的部分首付和closing cost，这个月汇款过来，
下个月用，没啥问题吧，正在准备贷款中
是领导的弟弟帮忙汇款，这也是直系亲属吧？ |
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x******a
发帖数: 45 | 49 谢谢妈妈们，她刚出生时候我没注意，彩色膜是在黑眼球上，不是全部的膜，只是一小
部分。 |
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n****a
发帖数: 268 | 50 昨天过了预产期一天医生内检，这回下手挺重，当时就出血了，她说也是为了宝宝能尽
快出来。然后就觉得宫缩比以前频繁了一点，伴随cramping.昨天一直用护垫，留了些
血，不太多。
今天早上上厕所发现有血膜状物出来，觉得可能是mucus plug吧？但是到现在下午了，
又出来了一两次血膜状物，不大，也没留什么其它血。我这种情况要今天再去看医生吗
？（约了明天做B超，但是跟医生诊所不是同一个地方）。谢谢！ |
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