m****m 发帖数: 395 | 1 做好的膜蛋白脂质体样品,需要用extruder过滤一下,该膜蛋白有疏水部分,也有一半
以上亲水部分,请问那个滤膜会不会吸附蛋白呢?很担心损失样品。
在用透析方法做脂质体的时候,还发现一半蛋白进入不了磷脂形成脂质体,而是溶在缓
冲液里,造成大量浪费,这是什么原因呢?该怎么样解决一下啊?想听听大家的意见想
法 |
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b***y 发帖数: 45 | 2 遇到了一个药物方面的问题, 把胰岛素(单体,聚合体和6聚体的晶体的混合物)放入
脂质体以后,做成药物(平均分成5份)给老鼠吃,发现有一只老鼠可以成功的降低血
液中糖的含量。但是每次的实验结果都没有办法预测。这次这只老鼠,下次另外一只。
而且的有一只老鼠有反映,时间长了就没有反映了,或者是开始没有反应的老鼠过了一
段时间对药物有反映。做过in vitro的试验,这些脂质体可以很好的抗拒胃中酶的作用
,不会被降接。但是in vivo的试验总是不成功。
做静脉注射的试验,每次都可以成功的降低血糖,因此已经通过了检测,说明这个方法
本身还是有一定的成功性的。口服就有问题了。
请大侠给些建议可能是什么原因或者解决的可能办法。
多谢多谢!! |
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a*****n 发帖数: 6 | 3 还是想不通,小肠上皮细胞上有胰岛素的通道?
以前选修药剂的时候提到过脂质体,不过都忘得差不多了,
记得好像说脂质体可以和细胞膜融合,然后输送药物什么的,
不过那样也进不了血液呀,最多进细胞。 |
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c*****e 发帖数: 119 | 4 我想制备脂质体, 但是不太成功,特发文请教
我将磷脂(phosphatinylcholine)溶于Chloroform中(0.1g/ml),然后将溶液置于旋转
薄膜蒸发器中,旋转蒸发,却没有得到均匀的薄膜层, 只是一大团白色固体
然后溶于磷酸溶液中,sonicate, 最后得到的是乳白色的混悬液.
但是我想得到浊度很低、几乎透明的脂质体混悬液,该怎么操作? |
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e********r 发帖数: 147 | 5 我们有一个跨膜受体激酶,已经挂到脂质体里,加入小分子ligand后激酶活性会上升。
现在特别想分析ligand结合后这个跨膜激酶的构象变化如何,从而来推测可能的结构变
化机制,请问这该如何是好?圆二色谱之类能测proteoliposome这种纳米级颗粒物的构
象吗?谢谢! |
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a*****n 发帖数: 6 | 6 说实话我没搞懂这个脂质体如何能从消化道吸收到血液。
另外你做体外实验的时候是怎么做的?有没有加上肠胃蠕动的因素? |
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f***y 发帖数: 4447 | 8 中国每年数十种一类新药临床试验。印度比起中国如何?
http://www.pharmcube.com/news/article/3354
这几天,大家都在讨论《我不是药神》这部电影。影片中“格列宁”的原型即诺华的格
列卫(甲磺酸伊马替尼片)。这款药物最初以孤儿药”获批,而后逼近50亿美元的年销
售峰值使其成为超级重磅炸弹药物,可谓是医药工业界“野百合也有春天”的完美阐释
。在美国,一个新药一旦获得FDA孤儿药身份,将享有税收减免、免申请费、研发资助
、加快审批以及上市后7年的市场独占权,甚至还可能获得一张宝贵的优先审评券。因
此从新药研发的角度看,以孤儿药身份进入市场,享受市场独占期后再拓展适应症,不
失为一种“以奇致胜”的临床开发战略。鉴于被FDA批准的药物相对比较容易被其他市
场认可,因此对于国内创新药有研发企业,若选对了适应症,通过申报FDA“孤儿药资
格认定”,采取中美双报的开发策略,更是抢占了国内注册的先机,实现“弯道超车”
。据不完全统计,已经有13款来自中国药企的新药拿到了17项FDA孤儿药资格认定。其
中百济神州的BTK抑制剂BGB-3111获得3项,正大天晴的安罗替尼... 阅读全帖 |
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C*****h 发帖数: 926 | 10 我知道日本有一家公司,他们用一种脂质体,上面经过修饰加工,
带有T cell receptor的ligand,脂质体里面包埋逆转录病毒的RNA。
脂质体把RNA送到T cells里面,再逆转录,整合到genome
the
the |
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v******V 发帖数: 314 | 11 中国药科大学药剂学研究
药剂学研究方向之一 作者:admin 文章来源:本站原创 点击数:1902 更新时间:
2007-5-15
目前,本方向人员所做工作的主要内容、特色和可能取得的突破以及主要学术带头人简
介。
生物大分子给药途径和剂型是药剂学科的重点研究方向之一,该方向也是国际药学界的
热点。随着生物技术的发展,越来越多的多肽、蛋白质、核糖核酸、多糖等大 分子药
物被发现和应用于疾病的治疗和预防。根据生物大分子药物的特点,发展包括注射给药
在内的多种适宜给药途径及剂型对疾病的治疗和预防具有重要意义。药 剂学科早在80
年代中期就开始了胰岛素直肠给药栓剂和胰岛素口服复乳新剂型的研究,探索了大分子
的直肠吸收机制及其可以应用的促进剂;研究了复乳这一新的 药物载体的制备、稳定
方法,经小鼠灌胃给予胰岛素复乳后取得明显的降血糖效果。90年代,本学科对生物大
分子给药途径和剂型开展了全方位的工作,在基础研 究和应用领域内进行了大量研究
。涉及的有口服吸收、结肠靶向、经皮吸收、肺部吸入、肌肉注射等多种给药途径,涉
及的新剂型有脂质体、微乳、纳米脂质体和柔 性脂质体、脂质微球、可生物降解微球 |
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a****e 发帖数: 88 | 12 中国一朋友,患有隐球菌脑膜炎(cryptococcal meningitis),在协和医院治疗了8个
月,现在协和基本上觉得无能为力,所以患者家属想查找一下看看美国这边有没有在这
方面特别有经验的医院,如果有希望,哪怕是希望很小,他们考虑把患者转到美国救治。
如果你有生么好的的建议,请告知,不胜感激!
患者的一些情况见下:
患者: 女 34岁,2009年12月患红斑狼疮疾病采用激素和免疫抑制剂治疗,病情稳
定,2013年3月感染隐球菌脑膜炎,目前在中国协和医院治疗8个月,感染一直反复。最
近检查T细胞群中的CD4只有39个,正常人的值应该为500个。
2013年
3月12日 入住宣武医院,开始口服大扶康
3月24日 从宣武医院出院,每天在家口服大扶康
6月9日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:2
9月6日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:64
9月27日 入住解放军301医院,开始点滴国产两性霉素B脂质体(共使用0.71克)
10月9日 转院到协和医院,停用国产两性霉素B脂质体,使用大扶康点滴
11月5日 脑脊液墨汁染色转阴
11月15日 脑脊液墨汁染色阳性,... 阅读全帖 |
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a****e 发帖数: 88 | 13 中国一朋友,患有隐球菌脑膜炎(cryptococcal meningitis),在协和医院治疗了8个
月,现在协和基本上觉得无能为力,所以患者家属想查找一下看看美国这边有没有在这
方面特别有经验的医院,如果有希望,哪怕是希望很小,他们考虑把患者转到美国救治。
如果你有生么好的的建议,请告知,不胜感激!
患者的一些情况见下:
患者: 女 34岁,2009年12月患红斑狼疮疾病采用激素和免疫抑制剂治疗,病情稳
定,2013年3月感染隐球菌脑膜炎,目前在中国协和医院治疗8个月,感染一直反复。最
近检查T细胞群中的CD4只有39个,正常人的值应该为500个。
2013年
3月12日 入住宣武医院,开始口服大扶康
3月24日 从宣武医院出院,每天在家口服大扶康
6月9日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:2
9月6日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:64
9月27日 入住解放军301医院,开始点滴国产两性霉素B脂质体(共使用0.71克)
10月9日 转院到协和医院,停用国产两性霉素B脂质体,使用大扶康点滴
11月5日 脑脊液墨汁染色转阴
11月15日 脑脊液墨汁染色阳性,... 阅读全帖 |
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a****e 发帖数: 88 | 14 中国一朋友,患有隐球菌脑膜炎(cryptococcal meningitis),在协和医院治疗了8个
月,现在协和基本上觉得无能为力,所以患者家属想查找一下看看美国这边有没有在这
方面特别有经验的医院,如果有希望,哪怕是希望很小,他们考虑把患者转到美国救治。
如果你有生么好的的建议,请告知,不胜感激!
患者的一些情况见下:
患者: 女 34岁,2009年12月患红斑狼疮疾病采用激素和免疫抑制剂治疗,病情稳
定,2013年3月感染隐球菌脑膜炎,目前在中国协和医院治疗8个月,感染一直反复。最
近检查T细胞群中的CD4只有39个,正常人的值应该为500个。
2013年
3月12日 入住宣武医院,开始口服大扶康
3月24日 从宣武医院出院,每天在家口服大扶康
6月9日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:2
9月6日 脑脊液墨汁染色阳性,脑脊液抗原1:64
9月27日 入住解放军301医院,开始点滴国产两性霉素B脂质体(共使用0.71克)
10月9日 转院到协和医院,停用国产两性霉素B脂质体,使用大扶康点滴
11月5日 脑脊液墨汁染色转阴
11月15日 脑脊液墨汁染色阳性,... 阅读全帖 |
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s********n 发帖数: 650 | 15 3. 化妆品权威选购指南
日本的化妆品市场非常成熟,日本mm早就练就一身海里捞针的本事,不一定昂贵,不
一定
是名牌,只用质量最好的,最适合自己的.
介绍一个今年的最爱护肤品排行,来自一本读者群在25岁左右的美容杂志,
排行内大多数产品国内都能见到,希望能给大家做个参考.
3.1 卸妆清洁:
第一位: dhc deep cleansing oil
第二位: 资生堂tiss deep off oil
第三位: kose 清肌晶cleansing oil
第四位: 植村秀 high performance balancing oil
第五位: clarins娇韵诗 cleansing milk
卸妆油有卓越的卸妆效果,对皮肤的负担也小,所以在卸妆清洁类中卸妆油依旧是主
流。
第一位是dhc公司的看家产品。油质很轻,带着淡淡的橄榄香,卸彩妆效果当然不
用说
,去黑头的效果也不错。而且很容易冲洗干净,我自
己就在用,用她之后不需要再用泡沫再洗,这一点让人相当满意。
第二位是资生堂的产品,用过之后,感觉毛孔小了些,给人彻底清洁的满足感。而且
价格公道,150毫升合人民币65元左右。
高丝的清肌晶... 阅读全帖 |
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b*****h 发帖数: 783 | 16 小cap被pump起来,然后融资,
现在risk还是相当大的。他们开发的ThermoDox 大概机理是把广谱抗肿瘤药包在一种热
不稳定脂质体内。等脂质体到了肿瘤里,用微波释放。 效果如何还不能确定,最近会
有三期的interim data。
commitments |
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w********n 发帖数: 1119 | 17 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: wanglanlan (南刀北猫 东奇西虎), 信区: Military
标 题: 家宝很活跃:出书忆SARS时期:夜不能寐 泪流满面
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 1 05:01:42 2013, 美东)
家宝这明显是不希望大家这么快就把家宝忘记啊? 我估计宝宝还会长期活跃在大家视
线内
温家宝新书谈SARS:夜不能寐时常常泪流满面
2013年11月01日13:46
来源:新华网
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新华网北京11月1日电 《温家宝谈教育》一书10月31日由人民出版社、人民教育出
版社联合出版发行,内容涵盖了温家宝自1995年9月至2013年3月的代表性教育论述。全
书分为五大部分,即“强国必强教,强国先强教(代序)”、“关于教育工作的讲话”、
“关于教育工作的通信”、“与大学师生的座谈”以及“附录:重视教育工作纪事”,
内容包括讲话、报告、信函、谈话等66篇,新闻媒体报道文章17组,教育活动图片50余
幅,总计50余万字。
10月31日,《温家宝谈教育》新书首发式在北京西单图书... 阅读全帖 |
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w********n 发帖数: 1119 | 18 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: wanglanlan (南刀北猫 东奇西虎), 信区: Military
标 题: 家宝很活跃:出书忆SARS时期:夜不能寐 泪流满面
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 1 05:01:42 2013, 美东)
家宝这明显是不希望大家这么快就把家宝忘记啊? 我估计宝宝还会长期活跃在大家视
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温家宝新书谈SARS:夜不能寐时常常泪流满面
2013年11月01日13:46
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新华网北京11月1日电 《温家宝谈教育》一书10月31日由人民出版社、人民教育出
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书分为五大部分,即“强国必强教,强国先强教(代序)”、“关于教育工作的讲话”、
“关于教育工作的通信”、“与大学师生的座谈”以及“附录:重视教育工作纪事”,
内容包括讲话、报告、信函、谈话等66篇,新闻媒体报道文章17组,教育活动图片50余
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p****s 发帖数: 3184 | 19
就在买买提讨论过的,似乎你这个转基因控也掺乎过,没有看出来你比人家内行在哪里。
发信人: oooowolf (oooowolf), 信区: Military
标 题: 关于转基因主粮,蛋白质,脂肪,碳水化合物?
关键字: 转基因
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Sep 10 12:09:44 2013, 美东)
都在讨论转基因主粮,有众多支持转基因人士大说特说美国的转基因现状,大豆多少转
基因,菜籽多少转基因……不说有多少转基因产品最终上了餐桌,只是请问众位,转基
因转的是什么?是碳水化合物结构?脂肪结构?都不是吧?是蛋白,转进了新的蛋白。
大豆油,菜籽油里边蛋白质含量多少?转基因大豆和菜籽获得的油结构和非转基因作物
提取的有结构区别么?我不认为,虽然我尽量也不吃转基因油。
那转基因主粮呢?最关键的转基因蛋白,特别是转到植物里边的动物蛋白,要进肚子的
,这个作为一个生物WSN我个人感觉很可怕。不知道大家感想如何。大家做基因操作的
时候都知道有Off-target效应,谁知道这从动物转到植物的基因会有啥结果,我faint
!
发信人: oooowolf (oooowolf),... 阅读全帖 |
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b*****d 发帖数: 61690 | 20 强生全球51次召回事件48次将中国排除遭质疑
2013年06月08日 23:22 人民网-健康时报 我有话说(320人参与)
健康时报记者 赵广泉
提起强生,许多人都不会感到陌生。这家1886年成立于美国,迄今已有127年历史
的世界医药巨头,已在全球57个国家建立了250多家分公司,产品和服务遍布全球175个
国家和地区。
强生产品涉及医药、保健、医疗诊断、医药器械和个人护理产品、消费品等十几个
领域。旗下有泰诺、邦迪、美林、仙特明、维思通、吗丁啉、达克宁、采乐、露得清、
可伶可俐、李施德林漱口水等几十个知名品牌。2012年,强生以 650亿美元的经营业绩
,在世界500强企业中位居第138位。
然而令人惊讶的是,2005年以来,这家以“因爱而生”奉为立业之基的全球知名品
牌,世界500强企业旗下,至少13家子公司及其至少27种药品医疗器械、护肤用品等,
或因质量瑕疵或因安全隐患发生了至少51次产品召回事件。
更令人惊讶的是,在强生此起彼伏的这51次召回事件中,竟然有48次将中国列为不
召回之列。
■2008年8月,强生旗下麦克尼尔公司在确认产品存在瑕疵后,雇佣私人承包商秘
密从... 阅读全帖 |
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s*******u 发帖数: 9508 | 21 转基因,就是指将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改
造生物的目的。 常用的方法包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。
有人说转基因比太空辐射基因变异安全,是因为我们知道转入了什么基因,但是这并不能
保证转基因的安全性. 潜在的问题可能来源于如下几个方面:
1. 要转入的基因到底整合到了目的生物体基因组中哪个位置?
>>虽说整合完成后,可以通过基因测序来找到整合点, 但是在转基因过程中, 这个整
合过程到目前为止基本是不可控的.
2. 目的生物体的的原有基因会产生哪些改变?
>>虽然人类目前的基因组计划对很多基因进行了研究,但是还远远不够. 比如, 原本
认为是"垃圾DNA"片段(不直接参与蛋白编码的DNA片段), 具有非常重要的基因调控功能
. 很久以来, 人们认为外来基因插入到这些"垃圾DNA片段"中间, 不会产生不良后果,
但是根据最新的研究, 有可能引起连锁反应.
3. 转入基因的产物,和母的生物体内的物质间的相互作用,会产生有害物质么?
4. 转入基因及其产物对宿主的影响,可能是一个漫长的过程.
请大家补充... |
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s*******u 发帖数: 9508 | 22 转基因,就是指将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改
造生物的目的。 常用的方法包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。
有人说转基因比太空辐射基因变异安全,是因为我们知道转入了什么基因,但是这并不能
保证转基因的安全性. 潜在的问题可能来源于如下几个方面:
1. 要转入的基因到底整合到了目的生物体基因组中哪个位置?
>>虽说整合完成后,可以通过基因测序来找到整合点, 但是在转基因过程中, 这个整
合过程到目前为止基本是不可控的.
2. 目的生物体的的原有基因会产生哪些改变?
>>虽然人类目前的基因组计划对很多基因进行了研究,但是还远远不够. 比如, 原本
认为是"垃圾DNA"片段(不直接参与蛋白编码的DNA片段), 具有非常重要的基因调控功能
. 很久以来, 人们认为外来基因插入到这些"垃圾DNA片段"中间, 不会产生不良后果,
但是根据最新的研究, 有可能引起连锁反应.
3. 转入基因的产物,和母的生物体内的物质间的相互作用,会产生有害物质么?
4. 转入基因及其产物对宿主的影响,可能是一个漫长的过程.
请大家补充...
faint |
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w********n 发帖数: 1119 | 23 家宝这明显是不希望大家这么快就把家宝忘记啊? 我估计宝宝还会长期活跃在大家视
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温家宝新书谈SARS:夜不能寐时常常泪流满面
2013年11月01日13:46
来源:新华网
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新华网北京11月1日电 《温家宝谈教育》一书10月31日由人民出版社、人民教育出
版社联合出版发行,内容涵盖了温家宝自1995年9月至2013年3月的代表性教育论述。全
书分为五大部分,即“强国必强教,强国先强教(代序)”、“关于教育工作的讲话”、
“关于教育工作的通信”、“与大学师生的座谈”以及“附录:重视教育工作纪事”,
内容包括讲话、报告、信函、谈话等66篇,新闻媒体报道文章17组,教育活动图片50余
幅,总计50余万字。
10月31日,《温家宝谈教育》新书首发式在北京西单图书大厦举行,本书由人民出版社
、人民教育出版社联合出版发行。新华网 王志艳 摄
2
10月31日,《温家宝谈教育》新书首发式在北京西单图书大厦举行,本书由人民出版社
、人民教育出版社联合出版发行。新华网 王志艳 摄 [保存到相册]
书中收录了一篇2003年5月4日温家宝同志到清华大学看望广大... 阅读全帖 |
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g***j 发帖数: 40861 | 24 貌似真是他的
20167月3日,国际严新生命科技学会洛杉矶分会和周边地区的分会会员学者代表,在加
州大学洛杉矶分校举行“科学、健康、文明”学术研讨会和节庆晚会,庆祝美国独立日
240周年,庆祝国际严新生命科技学会成立25周年。
此次学术研讨会暨庆祝活动收到美国参议院黛安娜.范斯坦参议员和美国国会刘云
平议员的贺信。贺信中他们分别对此次庆典及学术研讨表示热情祝贺和祝福。范斯坦参
议员特别祝贺大家在致力于传统中医养生健身方法与现代科学研究技术相结合所做的努
力、奉献和创新,刘云平议员代表社区感谢国际严新生命科技学会和严新教授的不懈努
力和无私奉献。
今年7月正值该学会成立25周年。该学会在世界多个城市的中心、分会在近日分别
举行相同主题的学术研讨会和相关的庆祝活动。该学会特邀学术与技术总指导教授严新
老师应邀给系列研讨会和庆典发来贺信,与各地的会员学者一道,热诚祝贺各地的七月
佳节包括中国和加拿大“7.1”、美国“7.4”等佳节盛事,庆贺“学会”创建25周年,
祝贺大家的学习收获,并勉励大家在社会和平发展中进步,再创美好。
此次学术研讨会上,学者们在总结学习严新生命科技后广... 阅读全帖 |
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S*******l 发帖数: 4637 | 25 特效药就是通用性抗呼吸道RNA病毒的CRISPR脂质体 |
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m********o 发帖数: 237 | 26 嫂子得了卵巢癌,CA125指标一直降不下来,有什么办法不,偏方啥的也行,多谢大家
了。
下面是病人的一些简单介绍。
患者:女,42岁,已婚
第八次住院记录(湖南肿瘤医院):
主诉:双卵巢低分化腺癌IIIC期综合治疗后,末次化疗后2月。
现病史:患者因“卵巢癌外院化疗后6天”于2010-11-23第一次入我院,于2010-11-29
放腹水1000ml,2010-12-1在全麻下行卵巢肿瘤细胞减灭术(双附件+子宫+大网膜+盆腔
肿切块+盆腔腹主动脉旁淋巴结清扫术+阑尾切除术),术后病理示:双卵巢中低分化腺
癌、大网膜,阑尾,右侧腹膜结节,直肠凹结节,膀胱壁结节,右宫旁组织、盆腔淋巴
结见癌转移。术后12.6日,12.31日行TP方案化疗二疗程,多西他赛210mg,DDP200mg,
好转出院。2011.1.17第三次入我院,1.21开始TP方案化疗,多西他赛100mg,DDP100mg
,化疗经过顺利,于1月24日出院。2011.2.9第四次入我院,因CA-125下降不明显,2.
11开始TP方案化疗,紫杉醇脂质体210mg,DDP100mg,化疗经过顺利,于2.14出院。为
求化疗于3... 阅读全帖 |
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f****X 发帖数: 64 | 27 $AMRN/$CLSN
$AMRN
1)两次临床试验结果已经证明了公司的药物能有效的降低血液中的甘油三酯,而且效果
要明显好于GSK的同类药物LOVAZA。去年LOVAZA的销售接近$1b。
2)$AMRN三季度向FDA递交新药申请。临床试验设计是FDA指导下的SPA,FDA批准的可能
性不小。
3)心血管疾病治疗的市场巨大,是大药厂的摇钱树。很可能成为$PFE,$GSK, $MRK等大
药厂的收购对象。
$CLSN
1)脂质体包装的化疗药物结合RFA (radio frequency ablation )治疗肝癌。根据以
往的临床治疗数据,$CLSN治疗肝癌的三期临床试验成功的可能性很大。目前Market
Cap只有50-60M。如果三期临床试验成功的话,股价的上升空间很大。可以参考$DCTH,
目前arket Cap 226M。
2)$CLSN的治疗方法可以作为一种平台技术,推广到治疗多种肿瘤。CLSN同时正在进行
乳腺癌(chest wall breast cancer)的一二期临床试验。
3)$CLSN正在和Philips Health Care合作,准备开始治疗骨瘤的临床试... 阅读全帖 |
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y*****l 发帖数: 5997 | 28 ☆─────────────────────────────────────☆
updownlife (渔夫) 于 (Fri Jun 24 09:30:43 2011, 美东) 提到:
比赛办法:
*每个参赛人员选择最多2个股票, 按照所选股票的6个月总体收益排名,前三名获大奖,所有报名都有奖
*比赛时间: 7/15/2011 - 1/15/2012
*报名时间: 6/23/2011 - 7/15/2011
报名办法:
* 每个参赛者选择 1-2 个在美国时常交易的公司(or industry etf etc)
* 每个参赛者提供自己对所选公司的分析报告
* 每个参赛者提供自己对所选公司股票的中长期操作数据:
(1) 买入点价格 : 买入点可以在参赛后15日调整,15天后还没有合适买入价的话将按
弃权处理
(2) 6个月内止损价格:若无止损,可设此价格为0
(3) 6个月内卖出价格: 若无target, 可设此价格为999999
* 报名者回此贴或单独开贴并著名参加中长期选股比赛
* 报名时间: 6/23 - 7/15
* 报名审核办法: 由版务审核通过的报名... 阅读全帖 |
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V*****2 发帖数: 7930 | 29 发现了肿瘤不开刀,拿脂质体包着药,在相应的地方热敷一下,这技术很扯蛋。 |
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h***2 发帖数: 2351 | 30 虽然转染细胞,最好有脂质体之类的帮助,但是,外源环状DNA进入细胞,在没有帮助
的情况下也是有一定的可能性的。生物进化过程,外源DNA的插入起了很大作用,虽然
大多数是负面的被淘汰,但是也有一些正面的被保留下来。 |
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w*********g 发帖数: 10097 | 31 他的分析其实不难,我觉得做这个的都能差不多看出来这个三期不靠谱,何况二期根本
都没做。肝脏脂质体deliver 好多人都做过都失败了
不过金融的东西完全不懂,不是很明白做空一个股票怎么能挣钱呢?如果他能预料到上
涨然后投资挣钱我还能明白,预料到下跌的话怎么操作呢? |
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s*******u 发帖数: 9508 | 32 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: sanyanghu (忍者无敌之不去股票版), 信区: Military
标 题: 简单说说转基因的"安全不确定性"
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Sep 8 12:34:56 2013, 美东)
转基因,就是指将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改
造生物的目的。 常用的方法包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。
有人说转基因比太空辐射基因变异安全,是因为我们知道转入了什么基因,但是这并不能
保证转基因的安全性. 潜在的问题可能来源于如下几个方面:
1. 要转入的基因到底整合到了目的生物体基因组中哪个位置?
>>虽说整合完成后,可以通过基因测序来找到整合点, 但是在转基因过程中, 这个整
合过程到目前为止基本是不可控的.
2. 目的生物体的的原有基因会产生哪些改变?
>>虽然人类目前的基因组计划对很多基因进行了研究,但是还远远不够. 比如, 原本
认为是"垃圾DNA"片段(不直接参与蛋白编码的DNA片段), 具有非常重要的基因调控功能
. 很久以来, 人们认为外来基因插入到... 阅读全帖 |
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m****m 发帖数: 395 | 33 用来溶解脂质体做NMR的,应该需要这么高标准的水吧?
我用NANOPURE WATER再灭菌了一回,够不够呢?
HPLC级纯水能自己处理到吗?还是要买的?还是有特定的机器出来的? |
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m********r 发帖数: 124 | 35 我们是做生化的,体外纯化蛋白,做相互作用(fluorescence,ITC,pulldown),
顺便做点结晶和核磁,mapping作用位点。我第三年下了。
Rotation 的时候做一个真核信号通路蛋白的A domain(这也是老板postdoc做的
domain),是个很好纯化的蛋白,做的还行,有个coauthor的paper(师兄一作,4分左
右,话说我觉得实验室就这个水平了)。
加入实验室之前,另外一个rotation的学生做B和C蛋白,是原核的信号通路。当时
我感觉我加入实验室是不就做这个了。结果老板让我先做D和E, 顺便做原来的真核蛋
白的F domain,理由是应用的技术是一样的,要charaterize的蛋白性质也是相同的。
这是实情。这个时候有个小的grant, 关于蛋白BCDE的。结果我第二年冬天发现F
domain太大,不好做。而D和E表达起来比较困难,不可溶。加上B和C合作者有genetics
的data,所以就做了点这个。之后回国,春天回来做助教,上课考qualify,几乎春季
没做实验。完了之后,发现D和E 已经被马普的两个组发了。人家一... 阅读全帖 |
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i******n 发帖数: 181 | 36 请问有人有转染T-cell的经验吗?脂质体,电转,病毒转染,哪种效率最高?能有
protocol就更好了,谢谢。 |
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S******e 发帖数: 393 | 37 当时我转的蛋白较大,检测tag可以看到表达,但用蛋白本身抗体检测就看不大出来差
异,说明表达量还不够高。
MCS后一般有stop condon, 所以你的stop condon 没测出来应该没大问题。
我做transfection的质粒一般A260/280 是大于等于1.9, Qiagen kit prep.
plasmid浓度最好1ug/ul 以上。
我觉得你看不到差异的原因很可能是表达量还不够,但你没有tag也没法检测它是否已
表达,你把效率提上去再检测看看,我觉得还是很有希望。
提高转化效率也是我一直的问题,但我估计我转的质粒比你大,我前几天在这问过这个
问题。 你先用脂质体方法试两次,LTX或lip2000, 若还不行,建议你再try电转,据说
效率高出很多。 |
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a*******a 发帖数: 4233 | 38 不需要洗, 收病毒上清以后pall 0.45um滤器过滤一下。
我一般用fugene hd, 更省事
10cm dish 20ug质粒,50ul fugene。
我是用plko+r8.91+vsvg的。
ps 我个人觉得钙转最省事
5min转完, 10-24小时之内看心情换液就可以了。。。。
脂质体的话还要等半个小时穿插传其他细胞,麻烦。。
,不洗的 |
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M******s 发帖数: 138 | 39 这个和组织致密度(结缔组织多少),组织含水量,组织脂质体含量都有关系,都是相
对的,并没有一个固定的方法,有时候换一种固定液,就需要过糖了,糖溶液并不是为
了脱水,而是为了改变组织冰点,但同时也会改变组织渗透压,这样化冻时候有些组织
细胞结构就会被破坏,组织结构当然也就被破坏了,直接冻,切片,是因为组织液渗透
压接近生理,当然组织不会被破坏,但缺点是后期染色效果差,你的是gfp or yfp当然
没这个问题。
另外,别人的protocol未必适合你,我能做出来,也许你的组织就不work,所以你要去
试,先用不重要的tissue试一下,然后再用到正式实验里。 |
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M******s 发帖数: 138 | 40 谢包子,
关于脱片的问题,很多人都有这个问题,fisher的superfrost一般来讲是没有问题,但
质量不是很稳定,不同批号差异挺大的,有时候会掉得一张不剩,尤其是蓝盒的问题非
常多,白盒的要好一些。我们现在都用自己的产品,基本不会有这种问题 https://www
.hitobiotec.com/product_info.php/hito-super-safe-slide-100-place-
slide-box-p
-50? 如果愿意,你可以试一试。 另外你可以试着切薄片,15微米左右,一般来讲薄片要好一些
关于脂肪滴的问题,以前有人要看脂肪或脂质体,所以脂肪必须留在原位,我给出的
protocol是针对这个目的的,现在想想你不是看脂肪,所以可以换个方法试试。(都是
不固定组织)
方法1
直接用OCT干冰包埋,切片,air dry, xylene 5min, 100% Ethanol 3min x2, 95%
Ethanol 3min x2,70%Ethanol 3min x2,D-water 1min x3,PBS 1min,水性封片剂或
甘油
封片,去看荧光
这个proto... 阅读全帖 |
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f*****f 发帖数: 195 | 41 Protein transfection的试剂盒很多公司都有。一些脂质体或类似的东西,pierce,
neb, clonetech, merke应该都有。
另外,可以在纯化的蛋白上加上TAT标签,直接加到细胞培养液后就可以进入细胞了。 |
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f*****f 发帖数: 195 | 42 不是siRNA对老鼠细胞株效果不好,而是因为C2C12或primary myoblast转染效率偏低,
但也有人转染siRNA成功了的。
可以用病毒转染miRNA质粒,
或者脂质体转染后加质粒抗性标记筛选(如puromycin等)效果也很好。 |
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n********k 发帖数: 2818 | 44 可能太靠近,这个理论上意淫一下的话,技术要求上好像难度比其他小多了;不过离临
床太远,没想过的说;HARVARD还做那个什么24-72小时保存没血的猪,然后再救活;那
个我是觉得是真牛逼,关键是敢想啊!到现在我都搞不明白会什么机制?不过有时想想
冻细胞什么的,好像也是那么回事,所以,我们对生物的了解是真TMD的太太太少了。
。。
个 |
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s*******u 发帖数: 9508 | 46 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: sanyanghu (忍者无敌之不去股票版), 信区: Military
标 题: 简单说说转基因的"安全不确定性"
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Sep 8 12:34:56 2013, 美东)
转基因,就是指将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改
造生物的目的。 常用的方法包括显微注射、基因枪、电破法、脂质体等。
有人说转基因比太空辐射基因变异安全,是因为我们知道转入了什么基因,但是这并不能
保证转基因的安全性. 潜在的问题可能来源于如下几个方面:
1. 要转入的基因到底整合到了目的生物体基因组中哪个位置?
>>虽说整合完成后,可以通过基因测序来找到整合点, 但是在转基因过程中, 这个整
合过程到目前为止基本是不可控的.
2. 目的生物体的的原有基因会产生哪些改变?
>>虽然人类目前的基因组计划对很多基因进行了研究,但是还远远不够. 比如, 原本
认为是"垃圾DNA"片段(不直接参与蛋白编码的DNA片段), 具有非常重要的基因调控功能
. 很久以来, 人们认为外来基因插入到... 阅读全帖 |
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c*****u 发帖数: 357 | 47 引物能p出东西就行,验证的时候尽量加positive和negative control
关于knockdown, 你有没有比较forward 和reverse 两种方法,有的时候在效率上会差
很多(如果你用的脂质体的话),GFP那个其实也不能很好的决定你target gene的
knockdown效率,还是在oligo的选择和oligo和转染试剂比例上找条件,可以买
validated siRNA,成功率更高些 |
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I***a 发帖数: 13467 | 48 多谢,
我没有讲清楚,转的是质粒,p siRNA,
方法就是,前一天把细包转到12 /96 孔板上,第二天混合 DNA脂质体加到细胞里一段
时间,24-48小时检测
没有比较过,还不太清楚这两种方法。 |
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m********8 发帖数: 314 | 49 RNAi治疗现在发展到什么程度了?难道体内药物递送不再是问题了吗?看这篇文献,这
个药物载体的构建都不在正文里提了。 Supplementary Methods里面的图1(S-Figure
1 Schematic diagrams illustrating the preparation of (DSS)6-liposome-siRNA
and the evaluation in vitro)显示SiRNA和带骨靶向多肽的脂质体混一下就能得到有
效装载SiRNA的靶向性药物了。这个是成熟可靠的方法的话,那么RNAi治疗前景应该非
常好?
A delivery system targeting bone formation surfaces to facilitate RNAi-based
anabolic therapy. Nature Medicine 18, 307–314 (2012) doi:10.1038/nm.2617
http://www.nature.com/nm/journal/v18/n2/extref/nm.2617-S1.pdf |
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t**m 发帖数: 158 | 50 http://www.nature.com/nature/journal/vaop/ncurrent/full/nature1
结合以前发表的工作, 可以看出她的工作是相当成体系的.
在糖转运蛋白结构及作用机制这个领域, 颜宁应该具有无可争议的地位.
以下是清华的新闻稿
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颜宁研究组揭示人源葡萄糖转运蛋白 GLUT1的结构及工作机理
2014年5月18日,清华大学医学院教授颜宁研究组在Nature在线发表了题为 “Crystal
structure of the human glucose transporter GLUT1”的Article,在世界上首次报
道了人源葡萄糖转运蛋白GLUT1的晶体结构,初步揭示其工作机制以及相关疾病的致病
机理。
葡萄糖(D-glucose)是地球上包括从细菌到人类各种生物已知最重要、最基本的能量
来源,也是人脑和神经系统最主要的供能物质;据估算,大脑平均每天消耗约120克葡
萄糖,占人体葡萄糖总消耗量的一半以上。葡萄糖代谢的第一步就是进入细胞:亲水的
葡萄糖不能自由穿透疏水的细胞... 阅读全帖 |
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