l**********r
发帖数: 4612 | 1 【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: laodou (别拿豆包不当干粮), 信区: Joke
标 题: 真不容易啊，为了表达对国王的敬意 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Dec 14 11:11:25 2011, 美东)
发信人: laodou (别拿豆包不当干粮), 信区: Military
标 题: 真不容易啊，为了表达对国王的敬意
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Dec 14 09:21:33 2011, 美东)
赫赫 |
|
w***s
发帖数: 7132 | 2 新年所见最搞笑的笑话，分享不足以表达其好玩，必须zz
2011-02-13 15:21:18 来自: Homesick Alien(行险而顺)
一个外国朋友，五十多岁，酷爱中国，因为他喜欢中国的美食和诗歌。
某次一边吃着美食，一边聊着诗歌的时候，外国老头说他非常崇拜孔子故乡的一位
中国近代爱国诗人，名叫庄重禅（音译）。我说我没听说过这个人，老外就即兴用
汉语给我朗诵了一首这位诗人的诗：
遥远的泰山，
展现出阴暗的身影；
厚重的基础，
支撑起浅薄的高层；
假如某一天，
有人将那乾坤颠倒；
陈旧的传统，
必将遭逢地裂山崩。
这是他看到英文诗之后自己翻译成中文的。他说这个不是原文，但意思应该差不多。
之后还说，这首诗中蕴含着非常深刻的寓意（老外还真是没法理解中国人的含蓄，
都这么直白了，还说有深刻的寓意），表达了他想要推翻旧制度、建设新国家的
爱国情怀。
我非常不好意思地再次表示，这首诗我也没听过。外国老头就又给我讲了些这位
诗人的轶闻。比如他的生活放荡不羁，与很多女人有染，但是他很尊重女人，在
他发现他的一个小妾与自己的下属有私情之后不仅没有追究还给他们路费放他们
走（比楚庄王的绝缨宴还有... 阅读全帖 |
|
z*i
发帖数: 58873 | 3 来自主题: LeisureTime版 - 表达的欲望 表达欲望下驱动的表达方式也很重要啊。 |
|
z********2
发帖数: 6488 | 4 来自主题: LeisureTime版 - 表达的欲望 写得真好啊，回头还要再细读。
那么真正的艺术家是否希望他的表达被人看到并接受呢？
事实上大众绝大多数是不喜欢真正的艺术的，他们就喜欢热闹的让人轻松的，量身定做
了可以讨好他们的东西，艺术家创作的东西若不做这些，在这个信息时代，他的东西会
被淹没，那少数本会欣赏他们表达的人很可能根本没有机会接触到他的作品。 |
|
b*********s
发帖数: 3863 | 5 来自主题: LeisureTime版 - 表达的欲望 我严重同意你表达欲望的说法，这也是和生命力相关的。一旦开始伪装，艺术生命就开
始走下坡路了，就开始混名利场了。有实力或者能忍受才敢于赤裸裸地表达真实的自己
，毕竟还有那么多混饭的同行。 |
|
w***r
发帖数: 7173 | 6 来自主题: LeisureTime版 - 表达的欲望 裸奔算表达的欲望，还是欲望的表达？ |
|
a*o
发帖数: 25262 | 7 其实除了人之外，很多这些都是动物，植物的天性。
只有人是一种奇怪的东西，想表达的天性，譬如性的东西，却不会大大方方表达出来。
你说是不是？ |
|
J******s
发帖数: 7538 | 8 我们做的事情无一不是表达自己的存在。至于植物是不是也在表达自己，完全看人类如
何解释。 |
|
发帖数: 1 | 9 有人说过这样一句话，成熟就是你忽悠的人多于忽悠到你的人。
最近重看电影《死亡诗社》，我深以为然；里面有一个词叫做Gibberish；直译为：『
胡言乱语』。
正如电影中的情节，当Keating怂恿学生安德森喊出它对美国现代诗歌之父Whitman的肖
像描述时，不断地怂恿，不断地鼓励最终让安德森从结结巴巴，到行云流水，从简单的
描述这是一个疯子（a mad man），甚至重复用疯狂这个词，crazy mad man；大家知道
这是一个重复用词的病句，到后来可以流畅的把人生比喻为一个毯子，最充分的运用了
自己的想象力，而老师Keating在鼓励中说了至关重要的一句话。
Say the first thing that pops into your head, even if it’s total gibberish.
说出第一个进入你头脑里的东西，哪怕它是胡言乱语。
没错，我们的人生也是如此，从模糊不清的牙牙学语，到最后能流利的演讲，其实我们
不断的在重复gibberish的一个过程，哪怕你的讲话没有逻辑关系，没有实质内容，那
也比什么也不说要好，最重要的就是开始说，说出你脑子里首先出现的... 阅读全帖 |
|
e****t
发帖数: 17914 | 10 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: Elevendone (sasa), 信区: WaterWorld
标 题: 英语如何表达“粗”和“细”？
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Jan 27 20:10:09 2012, 美东)
我经常需要比较两个东西“粗”和“细”。我只好用“大”和“小”表达。我不知道英
语是否有“粗”和“细”？ |
|
d*****l
发帖数: 8441 | 11 他的每次爆发都是有原因的，或是被误解，或是受了委屈。
他其实是按照他自己心中所理解的逻辑来做出的正常反应。
他这个年龄的小孩子被冤枉或被误解了以后，哪里有那么复杂的表达技巧
和能力来更好的解释辩解呢？大多还不是嚎啕大哭嘛！
杨阳洋发脾气和哭的时候多完全是因为他内心对自我的要求标准比同年龄的
别的小孩子要高的缘故。
那次杨威批评他没有分享食物给“姐姐”而导致的大哭发脾气，就是因为他没
有估计到杨阳洋这么小的小孩子内心其实第一个反应就是要分享，但只是因为
他力气小，掰玉米的尝试没有成功才作罢的。观察杨阳洋那集吃早饭，可以看出
他就是心思比同龄人多一些、表达略差一些的孩子罢了。
最近这期在草原，杨阳洋摔跤动作还是很规范的，没有象曹格儿子那样直接
推对方胸口把杨阳洋推倒坐在地上的犯规动作。经受这样没品的对手偷袭的
屈辱，动作干净、严格自律的杨阳洋当然受不了这样的委屈，自然出口就是
“不跟你玩了！”
从草原抓羊这活动来看，杨阳洋也比同组的其他孩子表现要好的多，非常积极。
虽然力气小却从不气馁。这么小的小孩，能有这么高的心气，虽然能力还不够，
但也是值得充分鼓励的。
张天天在罗卜墩游戏里，无脑冤枉... 阅读全帖 |
|
s****l
发帖数: 16457 | 12 是。但是感觉三羊好象没想用语言表达，基本都是靠撅嘴生气和不和人玩儿。他家得重
视引导他，否则估计这孩子的表达习惯和能力以后都会比较差。 |
|
s***s
发帖数: 1841 | 13 他不仅是语言问题，这娃就是不太爱表达，他内心强大，不太需要外界认同，所以也没
有太多要表达的需求
费曼完全是粤语、国语、英语三语混乱的语言障碍。多语造成的。 |
|
r******l
发帖数: 10760 | 14 多谢上面的回复。是可以有很多其他说法表达类似的意思，比如don't have to（不是
必须）或者用其他的词（比如skip）来表达，但是这些说法在有些情况下跟“可以不”
还是不完全一样吧？很多时候“可以不”强调的是“可以”，也就是我有能力不干某件
事，这个怎么强调呢？I am able not to do sth?
至于can not和cannot的区别，就算真的一个是“可以不”另一个是“不可以”，口语
中也没法区分吧？ |
|
f**********w
发帖数: 210 | 15 中文冗余多，英文冗余少，所以论文学艺术表现力，中文更好，可要论精确表达能力和
逻辑能力，英文强太多了，信息熵就是衡量语言表达的精确能力的，这个值越大越不精
确，英语，法语和西班牙语是4左右，中文是9左右。所以中文使用者喜欢主观思维，情
绪思维，逻辑能力差，看看菌斑那篇“邻居小孩抄袭--》韩寒抄袭”的文章就知道了 |
|
l*****a
发帖数: 976 | 16 中英文的差距， 根本上是文化的差别。 一个人群没有表达三俗的意愿， 自然就不会
产生表达这个意愿的载体。
你的视野太狭窄， 别一天到晚老盯着英语挖。 真正的坑王都是知识面全面， 从人情
世故出发来挖。 看看Stephen的那些坑。
feeling |
|
k**********4
发帖数: 16092 | 17 "熬夜干活"汉语表达是“开夜车”美国英语是"burn the midnight oil" . 考虑到汽
车在美国普及的时间远早于中国，而中国人用油灯的时间远长于美国
真是一个奇怪的表达. |
|
t****i
发帖数: 24 | 18 例如我想表达，我们最好要做成什么事情...
"最好'怎么表达合适？
3X |
|
E********e
发帖数: 1734 | 19 在中国，每个上班的人都有自己的单位，比如某某公司，某某学校，某某局...在美国
，“单位”如何表达？比如我想说，“每个单位都有自己的财务管理系统，”单位怎么
表达？ |
|
E********e
发帖数: 1734 | 20 谢谢回答。“institute”感觉主要是学校，学院，“agency”是代理机构。我想表达
“每个单位都有自己的财务管理系统，”。这里单位可以是学校，公司，政府部门，工
厂等。怎么表达？ |
|
E********e
发帖数: 1734 | 21 在中国，每个上班的人都有自己的单位，比如某某公司，某某学校，某某局...在美国
，“单位”如何表达？比如我想说，“每个单位都有自己的财务管理系统，”单位怎么
表达？ |
|
E********e
发帖数: 1734 | 22 谢谢回答。“institute”感觉主要是学校，学院，“agency”是代理机构。我想表达
“每个单位都有自己的财务管理系统，”。这里单位可以是学校，公司，政府部门，工
厂等。怎么表达？ |
|
k*******p
发帖数: 8821 | 23 我要参见一个面试，有一些委员会的成员将和我谈话。我想表达“谁是那些将要和我谈
话的委员会成员？”我说：Who are the committee members that will talk with me
?有语法错误吗？我担心的是that不能引导members，因为members是人不是物。但是如
果用who引导members，变成：Who are the committee members who will talk with
me?显得不自然。
究竟该如何表达？ |
|
n***s
发帖数: 1257 | 24 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: novas (building common sense), 信区: WaterWorld
标 题: ＂形式主义的＂的英语表达是什么？
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Aug 20 17:48:50 2012, 美东)
我非常讨厌形式主义的东西。
＂形式主义的＂的英语表达是什么？
Thank！ |
|
p**e
发帖数: 6317 | 25 猫咪不像狗狗那样直白的表达自己的感情，以至于我们都会以为猫咪很冷漠，不友善。
其实猫咪有它自己特殊的表达感情的方式，我们应该学着去看懂它们的心思。
1.猫咪最常见的表示友好的方式是用尾巴缠绕着你，用头或身体蹭你的腿，或者用
耳朵或后背蹭你的身体。这样做是想要在你身上留下它的气味，让它更舒服的围着你。
2.猫咪还会用它的舌头来表示好感，就像舔其他猫一样的舔你，表示它很信任你，
并对你有好感。
3.当它跳上你的腿，并趴在上面者表示它很信任并愿意依赖你。
4.它带回来战利品，比如死老鼠或是鸟，这表示它认为你是它的亲人，对你有强烈
的好感。
5.当猫咪觉得很有安全感，绝对信任你时，它会把尾巴直竖着。如果感到危险或环
境不熟悉它会把尾巴夹在腿里。
6.在地上打滚是他在邀请你跟它玩。
7.把爪子放在你的胳膊上是再次声明它很爱你！
8.当它弯曲背部蹭你的腿时，是它在说：“我爱你！”
9.猫咪一边蹭你一边呼噜呼噜的叫，那是表示它对你很有好感。 |
|
m********t
发帖数: 814 | 26 郁闷，胸闷气短，
不是什么大不了的事，
也一再的安慰自己，
不要在小事上纠缠。
可是，为什么还是会，
控制不住的皱眉，
还有镜子里，那努力微笑却愁容满面的脸。。。
大脑飞速的旋转，
千言万语却都融化消失在倾诉前的瞬间。
不愿叨扰睡梦中的双亲，
也看不到友善关切的眼。
也许不是人生孤单，
只是我，
失去了能表达自己的语言。
纵然心绪万千，
无法表达，
又怎么能被听见。。。 |
|
q*d
发帖数: 22178 | 27 发信人: hemlock (肘子——东坡、冰糖、红烧、清蒸、带把), 信区: Joke
标 题: Re: 两个乳头之间的距离有没有一个专业术语来表达？
发信站: 水木社区 (Sat Sep 26 10:48:07 2009), 站内
【 以下文字转载自 NewExpress 讨论区 】
发信人: dearwl301 (黄秋生), 信区: NewExpress
标 题: Re: 两个乳头之间的距离有没有一个专业术语来表达？
发信站: 水木社区 (Sat Sep 26 10:31:27 2009), 站内
波长（定义为两波峰之间的距离）
|
|
g***s
发帖数: 400 | 28 【 以下文字转载自 Detective 讨论区 】
发信人: Girls (O(∩_∩)O), 信区: Detective
标 题: Re: 今天看到肉联了，允许俺表达下
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 21 01:20:24 2010, 美东)
发信人: crashinfo (跨世因佛§梦幻泡影), 信区: Piebridge
标 题: Re: 今天看到肉联了，允许俺表达下
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jun 21 01:10:56 2010, 美东)
今天从我下线到现在将近500多帖，你的贴子埋没在其中，你转到complain我们就处理了
。贴子也删了，人也按照版规封了，这个有问题吗？
我们版务也是人，我们也有自己的事情，谁能24小时盯着？你把什么ONS贴子往鹊桥贴我
们都不追究了，你现在还要追究我们反应的速度和封人的理由？这个是不是过分了？
做人将心比心，我们尊重你也请你尊重我们的劳动，今天彪悍在水这么大的时候一直跟
着，处理你的投诉你说过一个谢字没有？你不觉得你自己需要提高个人修养吗？
我没管啊
我只是告诉众多ID
pie有joke
以及 如何及 |
|
r*******g
发帖数: 32828 | 29 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: Arantir (阿兰蒂尔), 信区: Biology
标 题: "生物家属倒苦水" 坑实际上要表达的是:
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 22 14:30:48 2010, 美东)
"生物家属倒苦水" 坑实际上要表达的是:生物wsn只能找到gay作老而且连gay都对生物wsn不满意,可见生物的悲惨出路. |
|
e******u
发帖数: 256 | 30 【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: erdanshu (erdan), 信区: Chemistry
标 题: 请牛人把图片中的反应用英文表达下，有包子
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Feb 17 13:45:25 2014, 美东)
正在写paper，无奈英文不过关。麻烦版上牛人帮我把这反应用英文表达出来。
多谢 |
|
s********n
发帖数: 359 | 31 如题
书到用时方恨少，字典到查时才嫌薄。。。。
这个意思要怎么才能精确地用英语表达出来呢？
我可以先给个语境：
如果句子是“别tmd成天跟我玩暧昧”
那么这个句子中的“玩暧昧”的英语表达怎么样比较地道呢？
欢迎提供多种说法
谢谢了先！ |
|
s********n
发帖数: 359 | 32 恩，谢谢解答。。。
但是我感觉ambiguous似乎用来表达整体性的文化上的暧昧是可以的
用来表达私人情感上的那种欲拒还迎欲擒故纵若即若离的小手段，貌似不那么贴切
但是貌似flirt又过于不够暧昧了，
毕竟暧昧还是属于没有明着flirt的阶段，
或许可以算是flirt的前戏。。。
anyway，继续等更多答案。。。 |
|
m**q
发帖数: 69 | 33 晚上路过公交车牌，一黑人兄弟问我知道公交车什么时候来么？
我说那我帮你查一下吧，然后打电话给站牌上的电话，结果只有自动语音，说是今天周
日，6点就就没
有人工值班了。
然后我想和黑人兄弟说他们下班了。但脑子里就是不知道怎么表达，只好指指手机，说
”they are
not working”。
黑人兄弟一脸痛苦，说他已经在寒风中等了15分钟了。。。。
后来越想越觉得不对劲，感觉they are not working会被理解成我手机坏了。
请教下怎么表到这种意思？
they are not at work？还是they go off work？还是they are not on duty？
还是有更准确的表达？
谢谢了
找不到合适的版面，感觉这里人多，就发这里了。。。。赎罪。。。 |
|
i***a
发帖数: 11826 | 34 写了不少内容点啊~(*^__^*)
主流接受主义美学称，艺术的美就在于留白和不确定性，诗歌、绘画、音乐、建筑等，
作者所有想表达的不可能全部表现，剩下的就是不确定和留白。
喜欢或者不喜欢，欣赏或者不欣赏，最高境界就是能理解作者已表达的内容、参透未表
达的留白，即共鸣。也就是为什么子期伯牙为知己。
纯粹的艺术家本身，应该是没有讨好大众的第一心理，因为个人风格和眼中的美感已经
基本形成。比如大部分文人都不画富贵牡丹。偶尔画牡丹卖钱时，也会在画的角落再绘
些竹子兰花山石等气节的东西做映衬。讨好大众的更多时候，应该是为了成名或生存，
也是个人志趣，或没有办法的事。 |
|
H******9
发帖数: 8087 | 35 所以心里不开心就表达出来，只是表达方式理智一点就好了 |
|
g*******1
发帖数: 8758 | 36 唉，自从和美国同学一起做辩论稿后，就深深感觉自己英文太差，句式单一，词汇量少
。你如果口头上能用英文很好表达，水平应该很高。你可以试试每天写点你所想的观点
，哪怕很琐碎都可以，然后再和口头表达的录音对比，看看写的和说的到底差别在哪 |
|
s**m
发帖数: 340 | 37 在此前我发表的出于反乱伦原因而反对同性婚姻的贴中，我的主要论点是：
支持同性婚姻的理由完全可能被用于支持乱伦婚姻。如果具体到我从本站收集到的具体
的理由，也就是旧例援引和社会认同度，我认为这两个具体理由完全可以被用来支持乱
伦婚姻。所以，在某些场合，我说：
支持同性婚姻的理由必然导致对乱伦婚姻的支持。
在其他场合，我说：
支持同性婚姻的理由可能导致对乱伦婚姻的支持。
显然，前者是指某具体理由，而后者是集体名词，不特指某具体理由。可能由于行文的
关系，如果忽略这些表达的上下文，这二者的区分没有很好地表达出来，如果由此导致
读者误解，我承担全责任。
谢谢。 |
|
b******e
发帖数: 182 | 38 发信人: xusy (悠然), 信区: Triangle
标 题: [转载] 尊重生命、维护尊严；要求获得知情权与表达的自 ┅
发信站: 北大未名 (Wed May 24 03:28:17 2000), 转信
【 以下文字转载自 post 讨论区 】
【 原文由 deliver 所发表 】
【此篇文章是由自动发信系统所张贴】
发信人: toutou (nobody), 信区: THUExpress
标 题: 尊重生命、维护尊严；要求获得知情权与表达的自由！
发信站: BBS 水木清华站 (Wed May 24 03:19:09 2000)
走在游行的队伍中，总会莫明地涌起一种荒诞的感觉（罪过）。我究竟是为了什么要
走在这里？我们又是为了什么？
死者固然值得纪念，但当静坐后的人群调侃似地呼喊着“建个好点的澡堂”时，行为的
意义马上变得如此的卑微。
最荒诞的莫过于游行时，零落的口号和那略显得有些文不对题的齐唱。“北大的同学团
结起来！”？团结起来作什么？有的人是因为他的确不知道是为了什么，有的人则是出
于恐惧。所以他们不知道或者装作不知道。
诚实的说，在围观人群（家属？职工？）的言谈中 |
|
j*j
发帖数: 5564 | 39 上午看到wokick奔他女儿的周岁照，因为小孩的可爱，自然地想起英语的cute一词。
cute大概是英语中用来夸婴幼儿可爱的最常用词语。美国人喜欢夸人，于是类似的
赞语有一大堆，什么sweet, lovely, adorable, darling, charming, precious,
beautiful, like an angel等等。
而我们中文里用来夸婴幼儿的词汇好像比较贫乏。多的是用来具体描绘的词汇，譬如
胖嘟嘟，长得水嫩，水灵，脸蛋红扑扑等等。但是抽象层次上的好像比较少，这会儿
我只想到可爱，甜美，漂亮几个词。（漂亮用于婴儿时好像偏重于婴儿的打扮，而不
是形容婴儿本身。）
那么，在浙江各地的方言中，称赞别人的婴幼儿可爱，又是如何表达的呢？
可爱一词，在吴语里好像是没有的。
吴语里有“乖”的说法，但这个说法也是比较具体，局限于小孩听话懂事的一个侧面；
而不是对孩子全面的描绘。
对应于“乖”，我们诸暨土话里有个形容小孩的词，念作“dian za”（dian中的d
有点清化，是吴语里对tian的典型念法）。至于对应什么汉字，好像谁也不知道。
刚才我想到这个说法，在网上搜索了一番... 阅读全帖 |
|
a*******g
发帖数: 4872 | 40 ☆─────────────────────────────────────☆
joj (寄生于世上，原是那么好) 于 (Mon Feb 4 01:30:13 2013, 美东) 提到:
上午看到wokick奔他女儿的周岁照，因为小孩的可爱，自然地想起英语的cute一词。
cute大概是英语中用来夸婴幼儿可爱的最常用词语。美国人喜欢夸人，于是类似的
赞语有一大堆，什么sweet, lovely, adorable, darling, charming, precious,
beautiful, like an angel等等。
而我们中文里用来夸婴幼儿的词汇好像比较贫乏。多的是用来具体描绘的词汇，譬如
胖嘟嘟，长得水嫩，水灵，脸蛋红扑扑等等。但是抽象层次上的好像比较少，这会儿
我只想到可爱，甜美，漂亮几个词。（漂亮用于婴儿时好像偏重于婴儿的打扮，而不
是形容婴儿本身。）
那么，在浙江各地的方言中，称赞别人的婴幼儿可爱，又是如何表达的呢？
可爱一词，在吴语里好像是没有的。
吴语里有“乖”的说法，但这个说法也是比较具体，局限于小孩听话懂事的一个侧面；
而不是对孩子全面的描绘。
... 阅读全帖 |
|
x******t
发帖数: 6 | 41 查了篇文章Loop-Free Alternating Finite Automata，清楚了。
LTL的表达能力与star-free regular expression相同。所谓的“star-free的regexp语
言”虽然不含有*，却包含negation和intersection，因此它可以表达某些无限长的串。 |
|
d********e
发帖数: 132 | 42 在Latex 里，数学里的“因为”，“所以”怎么表达？
还有整数集 的Ｎ 和实数的R 怎么表达？谢谢。 |
|
x*****u
发帖数: 3419 | 43 中国民歌中的性话语表达
臧一冰
来源：《二十一世纪》网络版第十五期
臧一冰 香港中文大学音乐系博士候选人
一 引言
福柯（Michel Foucault）这样说过：
为甚么性最终被认为是我们最「深刻」的真理藏身和表白的地方？请注意一个根本性
的事实：从基督教占统治地位以来，西方世界不停地宣称：「要知道你是怎样的人就要知
道你的性行为」。性就像一个议事厅，我们种族的前途和我们人类主体真理在那里得到决
定。（福柯，1999）
食色性也，也是中国人公认的人之本性。在中国已经出版的民歌中是不允许有直
接表达人的性行为的内容的，但有关性的民歌在实际的生活中却占有相当大的比例。只不
过它是被一种文化权力所限制的话语。很显然，为了揭示某种「最深刻的真理」，我们研
究某地的人、某区域的文化，我们不应该忽视他们的有关性文化的内容。
我在研究癫狂和监狱的过程中，发现一切事物都围绕着这样一个核心：甚么是权力。
或者说的更明确些，权力是如何实施的，当某人对另一个人实施权力的时候究竟发生了甚
么？据我看来在所有社会中 |
|
D****s
发帖数: 5 | 44 要表达一个全长40KD的蛋白，用的是pET32a+ vector. 转化入BL21(DE3) bacteria.
Western 显示full-length protein只有大约10%， 主要被降解成2条非常强的band.
而只表达这个蛋白的fragment（大约一半，20KD), 就没有蛋白降解的发生。
请问有什么好的建议？谢谢 |
|
D****s
发帖数: 5 | 45 此蛋白是一个ubiquitin E3 ligase. 加了蛋白酶抑制剂并且是低温操作，还是绝大部
分蛋白被降解。感觉降解应该发生在收菌以前。我需要表达纯化全长的此蛋白。
请问这种情况，换一个E.coli host strain 来表达会有效果吗？ |
|
b******n
发帖数: 4225 | 46 你试过低温表达了吗？比如说30度或者25度
温度低可能蛋白降解会慢一点
另外表达的时候可以尝试加3%左右的乙醇看看效果
你是不是纯化之后过柱再做的western？
如果没问题，能否将序列和western电泳图（最好有marker）发给我看看
s****[email protected]
反正蛋白纯化是门艺术，不同蛋白纯化方法不同
多试试看运气吧 |
|
s******y
发帖数: 28562 | 47 这种情况理论上是有的，比方说有的调控蛋白可以结合在某些RNA的UTR region，
使得某一个时间只能有一定浓度的RNA进行表达，多余的就不能表达。
但是我一下子想不起什么文章中提到类似现象 |
|
s****l
发帖数: 395 | 48 pET系列载体的问题就是不能保证每个clone都能表达，一般一次挑5-6个clone然后看看
哪个能诱导吧，有些难表达的蛋白大概只有50%左右的clone可以诱导。 |
|
