由买买提看人间百态

boards

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档,一周内的贴子最多显示50字,超过一周显示500字 访问原贴
Biology版 - Re: 细胞传代求助
相关主题
transfection 的问题Re: cross-link
有人用过Millipore的enzyme-free cell dissociation solution没?向大家请教transfection的问题
请教养小鼠干细胞的问题microarray slides 真贵啊
分离的MEF cell第一代长的很好,为什么传代之后形态发生改变?Chip-seq 实验球助
请教一个细胞代数的问题急问:如何从这边买试剂再寄回国
short double strand DNA dissociates automatically??germline specific Cre mediated KO 求教
[合集] Trypsinization现在还可以求paper么?
48/96孔板上养的人胚胎干细胞有没有简易冷冻的方法?Re: 哪位大仙知道生化中K cat 的定义是什么
相关话题的讨论汇总
话题: trypsin话题: 传代话题: confluence话题: 细胞
进入Biology版参与讨论
1 (共1页)
d***e
发帖数: 243
1
Trypsin, pepsin 等对LH receptor影响不大{Gospodarowicz 1973}. 所以也可能是其它
的一些原因:cells condition, monolayer overlapping之类的问题.当然commercial
trypsin function本身就比较复杂,有时有些人就用较纯化或重组的trypsin和胶原酶之
类成份确定的混合物去消化。
我的感觉是你是否让你的宝贝细胞刚长得90%confluence后,hanks washing triple,再用
0.05%trypsin在不同温度(Rm, 36)消化一下看有没有提高。
实在不行就定些Cell Dissociation Buffer or Enzyme Free Dissociation
Reagents(60% confluence),但我总认为是花拳秀腿,但也许就对你的实验管用。
另外培养界面,polypropylene, glass, teflon-coated 都是option,但我对这些不熟悉
。可能还有几个较流氓的方法,冰水超声,内置tiny cover slides, 瞬时低渗
1 (共1页)
进入Biology版参与讨论
相关主题
Re: 哪位大仙知道生化中K cat 的定义是什么请教一个细胞代数的问题
Re: 请教trypsin的多肽抑制剂问题……short double strand DNA dissociates automatically??
Re: protein identification[合集] Trypsinization
Re: 如何鉴定Floating Cells是不是进入Cell Death?48/96孔板上养的人胚胎干细胞有没有简易冷冻的方法?
transfection 的问题Re: cross-link
有人用过Millipore的enzyme-free cell dissociation solution没?向大家请教transfection的问题
请教养小鼠干细胞的问题microarray slides 真贵啊
分离的MEF cell第一代长的很好,为什么传代之后形态发生改变?Chip-seq 实验球助
相关话题的讨论汇总
话题: trypsin话题: 传代话题: confluence话题: 细胞