m***g
发帖数: 197 | 1 是这样的，要看一个酶的有和无，对他下游蛋白功能的影响。
不想用knockdown，因为这个酶很强大，有一点残留都会起作用。
KO是最理想的了。
他们给我们的这一对MEF，都是长的慢，死的多。我们没有其他immortalize的经验和质
粒，只好用这个传代的方法。
如果我不断的传代，到底会完全死掉，还是会有重生进而稳定生长的机会？ |
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发帖数: 1 | 2 撒谎的艺术：自传代笔者揭露特朗普真实人格
本文原载于The New Yorker
作者/Jane Mayer
2015年6月的一天，暮色降临于纽约市里佛岱尔，在绿茵笼罩下的偏僻小径
旁的家中，托尼·施瓦茨打开了笔记本电脑，当天的重大新闻跃入眼帘：唐纳德
·J·特朗普宣布他将竞选总统。施瓦茨看着演讲视频，开始意识到自己摊上事
了。
面对聚集在第五大道特朗普大厦大堂里的一群听众，特朗普摆出自己的资历，
他说：“我们需要一位写过《交易的艺术》的领导者。”施瓦茨觉得，若是这样，
应当由他来竞选总统，而不是特朗普。施瓦茨赶紧发了一条推特：“非常感谢唐
纳德·特朗普建议我竞选总统，因为事实上是我写了《交易的艺术》。”
施瓦茨代写了1987年出版的特朗普自传，这是一部突破性的作品，他得以与
特朗普共同署名，还拿到了一半预付款（总预付款为50万美元）和一半版税。该
书大获成功，连续48周位列《纽约时报》畅销书榜，13次排名第一。其销量超过
一百万册，获得了几百万美元的版税。这本书让特朗普扬名于纽约之外，也让他
成了成功商业大亨的表率。《纽约》杂志（施瓦茨当时为该杂志写稿）前编辑兼
出版人爱德华·考斯纳... 阅读全帖 |
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h******y
发帖数: 351 | 3 如果你的MEF是用作feeder的话，不建议用超过6代的细胞。
MEF对ROS很敏感，传代过多，MEF会自发immortalization。
分MEF最简单的办法是把组织挤过18-20G的针头，然后trypsin 3-5 分钟。MEF的培养液
中不需要加b-ME.
了。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 4 恩，你这个补充的很好，我不知道楼主分离那个是想干什么用的，如果是
用来进行immortalization，可以不管不顾地继续传代，传到下面就出现
形态正常的细胞了。但是如果是作为feeder 的话，只要功能在那里，形态
无所谓的。 |
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h******y
发帖数: 351 | 5 MEF在20%氧气的培养条件下，很快（6-8个passage以后）就会停止生长。 这是因为MEF
对reactive oxygen species很敏感，由此引起的DNA damage激活p53以及其他信号（正
常生长因子和matrix缺失等）激活p16-Rb通路，引起senescence。你应该问一下他们给
你的MEF的passage，最好要到分离后第1或第2代的细胞，这样你还能用几代。
但是如果你把这些停止生长的细胞保留着（不要传代），过几个星期你会发现细胞又长
起来了，而且越长越好，这就是自发immortalized的细胞。很多MEF细胞系就是这样建立
起来的，例如著名的3T3系列。但是我不建议你用这些immortalized的MEF做实验，因为
上述ROS引起DNA damage的原因，这些自发immortalized的MEF已经产生太多基因变异（
因为需要bypass p53和p16-Rb两个重要通路的抑制），即使你看到表型的差异，也很难
说是你的gene KO的结果。
如果确实需要长久使用MEF，一是拿到老鼠，分离新鲜的MEF做实验。二是利用低氧（3-
5%）条件培养MEF... 阅读全帖 |
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m***g
发帖数: 197 | 6 非常感谢，
我用的是普通培养箱5% CO2.
目前不担心它对信号通路的影响，就是想得到可以经常稳定传代的细胞。因为是从费劲
要到这个细胞。所以，只能自己immortalize了
MEF
建立 |
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l****j
发帖数: 70 | 7 我找的protocol上用的是0.25% trypsin在 4C overnight让trypsin完全浸入组织,然后
在 37C 30min 消化分离第一代，之后传代都用0.05% trypsin，但消化很困难，所以我
用了0.1%的trypsin,这样是会过度消化吗？
will |
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m*****z
发帖数: 1451 | 8 取embryo，去头和内脏，剪碎，0.25% trypsin 37oC消化10分钟，seed在10cm盘，3-4
天传代
一直这么做没问题，不过从来没有handle过比较神奇的MEF就是了。 |
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h******y
发帖数: 351 | 9 你这消化的时间太长了。
我的方法给你参考。
E13.5或E14.5，去头去内脏，转到一个预先装有0.25%Trypsin-0.53mM EDTA的3mL注射
器里，从20G的针头中挤过。如果组织块太大的话，多挤几次。然后在37C消化5分钟。
用FBS终止酶消化，离心收集组织和细胞，用5mL pipette重悬。每1-2个胚胎可以铺一
个10cm的dish。一两天后就长满了，这算P0。需要注意的是所有和组织接触的塑料器皿
用前需要先润湿，否则组织很容易粘到上面。
传代用0.25%Trypsin-0.53mMEDTA，37C，3-5分钟。这算P1。从这里起，seeding
density在4-5 X 10^3/cm2. 3-4天或者接近长满的时候分一次。一般在第2或3次的时候
冻足够多的细胞，1x10^6/vial. 运气好的话，一只孕鼠的6-8个胚胎分出来的MEF足够
你用的了。 |
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y***y
发帖数: 709 | 10 搭车问个问题：
您用低氧培养的时候，MEF的生长速度和普通的CO2培养箱有很大差别？
我一般都是细胞长满了在1：5传代，在7-8代以前，感觉普通培养箱的细胞比低氧的长
快2倍不止。
可过了10代以后，普通培养箱的就慢下来了，低氧的好像却长得快起来。
before |
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L**********s
发帖数: 12988 | 11 回音：代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代
传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代代传代
代传代代传代代传 |
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v******a
发帖数: 45075 | 12 【 以下文字转载自 Zhejiang 讨论区 】
发信人: John123 (悠悠渔家), 信区: Zhejiang
标 题: 科普讨论：男人年纪增大，如何保持雄风哪？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Dec 27 23:05:25 2012, 美东)
这几天闲着在买卖提灌水，看到有抱怨男人性事不强而闹家庭纠纷的贴。就随手以科普
方式写几句，寥寥看法。 如有行家，请多多包涵指点，探讨男人健康。这事虽小，却
牵连家家户户。
随着时光流逝，男人事业趋于成功，腰包鼓胀，但体力常常也随之下降。如正在红日当
头期，忽然发觉jj不如当年，人生就会充满迷惑和缺陷，甚至会被异性欺讽，或闹离婚
。不要说买卖提上有普通女性抱怨，就是女明星青春寂寞，也容易把家闹翻。情愿跟一
强壮的滑水穷男，也不留恋四大天王(乐基尔与黎明的故事？)。可想而知，为了维持雄
风，做好男人，心里压力该有多大。
年纪增加，性功能下降，是自然生理规律。 有什么办法去延缓性功能下降速度，以保
家庭性福哪？
探讨一下这几个关键字：“男人好色，不忘本”。
如何理解“男人好色，不忘本”会帮助延缓性功能下降速度哪？
先做一实验：面对一... 阅读全帖 |
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J*****3
发帖数: 525 | 13 这几天闲着在买卖提灌水，看到有抱怨男人性事不强而闹家庭纠纷的贴。就随手以科普
方式写几句，寥寥看法。 如有行家，请多多包涵指点，探讨男人健康。这事虽小，却
牵连家家户户。
随着时光流逝，男人事业趋于成功，腰包鼓胀，但体力常常也随之下降。如正在红日当
头期，忽然发觉jj不如当年，人生就会充满迷惑和缺陷，甚至会被异性欺讽，或闹离婚
。不要说买卖提上有普通女性抱怨，就是女明星青春寂寞，也容易把家闹翻。情愿跟一
强壮的滑水穷男，也不留恋四大天王(乐基尔与黎明的故事？)。可想而知，为了维持雄
风，做好男人，心里压力该有多大。
年纪增加，性功能下降，是自然生理规律。 有什么办法去延缓性功能下降速度，以保
家庭性福哪？
探讨一下这几个关键字：“男人好色，不忘本”。
如何理解“男人好色，不忘本”会帮助延缓性功能下降速度哪？
先做一实验：面对一裸体美女，正常男人从20，30， 40， 50， 60岁的生理反应会不
一样。心跳，呼吸速度，血压高低，jj翘起膨胀程度，通常会与年纪增大成反比。
从看到美女到jj膨胀，看上去简单，其实在这迅间，已发生了一环扣一环的心理，神经
，内分泌，和心血管的连锁反应。 在这... 阅读全帖 |
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t**********0
发帖数: 1700 | 14 屁的官不传代，不仅官可以传代，而且还能变成财富传代。 |
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O**W
发帖数: 58 | 15 自中国湖北省武汉市首次报道新型肺炎（COVID-19）以来，关于致病性病毒SARS-CoV-2
的起源一直存在大量讨论和不确定性。截至2020年2月14日，已确诊64473例，其中死亡
1,384例。该病毒显然能够在人与人之间有效的传播。由于目前尚无针对该疾病的疫苗
或特异性疗法，基于存在可能传播到医疗体系较弱的国家风险，WHO已宣布COVID-19疫
情为国际关注的突发公共卫生事件（PHEIC）。
SARS-CoV-2是已知感染人类的冠状病毒科的第七名成员。 其中，三种病毒（SARS CoV-
1，MERS和SARS-CoV-2）可以引起严重的疾病。 四种病毒（HKU1，NL63，OC43和229E）
与轻度呼吸道症状有关。
该论文综述了从可用基因组序列数据的比较分析中可以推断出SARS-CoV-2的起源和早期
进化的方法。 值得注意的是，该论文提出了SARS-CoV-2基因组的显著特征，并讨论了
可能出现这些特征的场景。 重要的是，该分析为“SARS-CoV-2不是实验室产物也不是
有意操纵的病毒”这一论点提供了证据。
通过对α和β冠状病毒（冠状病毒科家族）的基因组比较确定了SAR... 阅读全帖 |
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s********n
发帖数: 26222 | 16 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 孟山都转基因主粮是将转基因大豆玉米棉花的翻版
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:35:47 2010, 美东)
孟山都转基因主粮将是转基因大豆翻版
孟山都转基因主粮是转基因大豆玉米棉花的翻版
中国的大豆业陷落了， 为什么， 被孟山都的转基因大豆搞垮了
中国的玉米种植主权失去了， 为什么， 被孟山都的转基因玉米攻陷了
中国的棉花业依赖于美国， 为什么还是孟山都的转基因棉花占了上风
现在孟山都居然进一步将黑手伸到中国主粮， 其结果将是转基因大豆玉米棉花的翻版
， 全盘受控于美国粮商和华尔街资本。
所有这些孟山都推出的转基因品种都有类似一种自杀机制， 也就是说不能传代保种，
传代就会品质下降， 病虫害重生， 这可能是跟转基因表达的淬灭有关系， 第一代转
基因高表达，以后由于表观遗传的不稳定逐代下降甚至失去表达。 这样， 中国农民必
需持续不断地向孟山都买种子， 而且出了病虫害只有买孟山都专门的农药化肥， 还有
专利费是不间断的。 |
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s********n
发帖数: 26222 | 17 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 揭秘： 孟山都转基因品种的自杀机制
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:43:37 2010, 美东)
所有孟山都推出的转基因品种都有类似一种自杀机制， 也就是说不能传代保种， 传代
就会品质下降， 病虫害重生， 这可能是跟转基因表达的淬灭有关系， 第一代转基因
高表达，以后由于表观遗传的不稳定逐代下降甚至失去表达。 这样， 中国农民必需持
续不断地向孟山都买种子， 而且出了病虫害只有买孟山都专门的农药化肥， 还有专利
费是不间断的。
要想克服孟山都的转基因品种自杀机制， 可能只有通过组织培养， 也就是取第一代品
种组织培养， 直接体细胞繁殖下一代， 避免生殖细胞繁殖对品种质量的影响。大家可
以想一下。 |
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o*****d
发帖数: 609 | 18 有必要吹捧这些人吗？他们父辈的伟业根他们有关系吗？"红二代"也真惨。这也是社会
主义的优越性：官不传代。在资本主义社会，钱可以传代，这就产生了不劳而获的“富
二代"。美国的遗产税近40%，每年只能免税给子女2万美金，超过部分作为子女的收入
要征33%的所得税。中国应征90%遗产税，以体现社会主义的优越性。 |
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S*****s
发帖数: 7520 | 19 主要是接班人的传代问题。毛对邓的态度
对华国锋的态度，其实决定了他对后事的安排，基本就是默认邓会掌权
只不过为了摇摇欲坠的文革大业没有挑明，的确是在为后世铺路。
耀邦紫阳泽民锦涛都是权威体制下的传帮带，也就是邓陈一干毛的老臣制定
至此，政治superman权威体制，那种charisma的魔力也就消失了
现在，中共到了一个毫无权威制衡的传代模式，能否顺利交班，交班的质量
能否保证，就很难说了 |
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发帖数: 1 | 20 狂犬病毒分四代：第四代转基因狂犬比疫苗最安全，保护率最高。
1. 脑组织疫苗
1.1兔脑组织疫苗 1885年，巴斯德首次用兔脑脊髓制备成狂犬病弱毒苗，并应用于一个
被疯狗咬伤14处的9岁男孩治疗，并取得成功。
1.2 羊脑组织疫苗 1911年，Semple将羊脑组织悬液于37℃，经0.5%~1%酚固定，β-丙
内酯灭活后，制备了Semple疫苗。1925年，Hempt通过补加乙醚处理，进一步保证了
Semple疫苗的无毒性。
新生鼠脑疫苗 1955年，Fuenjalidat和Palacios将狂犬病毒脑内接种3~5
日龄新生鼠制备了新生鼠脑疫苗，过去40多年中，南美洲广泛应用此疫苗。
脑组织疫苗注射次数多，剂量大，抗体产生慢，抗体水平低，含有神经麻痹因子，易引
发变态反应，WHO提出尽快停止使用该疫苗。
2. 禽胚疫苗 1955年Peck制备了鸭胚疫苗，1959年，Powell和Cubertson改进其生
产工艺，制备的疫苗中含有10%经β-丙内酯灭活的鸭胚组织悬液。禽胚疫苗抗体效价低
，但引起变态反应的可能心血来潮小。目前在亚洲、非洲、南美... 阅读全帖 |
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s*****n
发帖数: 1998 | 21 疫苗出来了， 非洲猪瘟本身不变异， 不像感冒那样不停地变， 疫苗成熟了非洲猪瘟就
完蛋了， 还能出口疫苗赚点
2019年5月24日，由中国农科院哈尔滨兽医研究所自主研发的非洲猪瘟疫苗取得阶段性成
果。中国在非洲猪瘟疫苗创制阶段主要取得五项进展：
一是分离中国第一株非洲猪瘟病毒。建立了病毒细胞分离及培养系统和动物感染模型，
对其感染性、致病力和传播能力等生物学特性进行了较为系统的研究。
二是创制了非洲猪瘟候选疫苗，实验室阶段研究证明其中两个候选疫苗株具有良好的生
物安全性和免疫保护效果。
三是两种候选疫苗株体外和体内遗传稳定性强。分别将两种候选疫苗株在体外原代细胞
中连续传代，其生物学特性及基因组序列无明显改变，猪体内连续传代，也未发现明显
毒力返强现象。
四是明确了最小保护接种剂量，证明大剂量和重复剂量接种安全。
五是临床前中试产品工艺研究初步完成，已建立两种候选疫苗的生产种子库，初步完成
了疫苗生产种子批纯净性及外源病毒检验，初步优化了候选疫苗的细胞培养及冻干工艺
。 [71] |
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d******r
发帖数: 16947 | 22 这要是成了能拿炸药奖，欧洲老毛子被祸祸多少年也没办法。主要是他们大概猪肉吃的
不多？ LOL
: 疫苗出来了， 非洲猪瘟本身不变异， 不像感冒那样不停地变， 疫苗成熟了非
洲猪瘟就
: 完蛋了， 还能出口疫苗赚点
: 2019年5月24日，由中国农科院哈尔滨兽医研究所自主研发的非洲猪瘟疫苗取得
阶段性成
: 果。中国在非洲猪瘟疫苗创制阶段主要取得五项进展：
: 一是分离中国第一株非洲猪瘟病毒。建立了病毒细胞分离及培养系统和动物感染
模型，
: 对其感染性、致病力和传播能力等生物学特性进行了较为系统的研究。
: 二是创制了非洲猪瘟候选疫苗，实验室阶段研究证明其中两个候选疫苗株具有良
好的生
: 物安全性和免疫保护效果。
: 三是两种候选疫苗株体外和体内遗传稳定性强。分别将两种候选疫苗株在体外原
代细胞
: 中连续传代，其生物学特性及基因组序列无明显改变，猪体内连续传代，也未发
现明显
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发帖数: 1 | 23 你说的太简单了 你知道分离到野毒株驯化到可以在细胞系里传代有多难吗，不同病毒
毒株难度不一样
: 这个很好做啊，细胞培养传代减毒，或者灭活。做成灭活疫苗或者减毒疫苗。需
要的是
: 时间和小白鼠。
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a****t
发帖数: 7049 | 24 kaleege，这个观点很不错，很有意思，好像是我板上看到的第一个让我深思一下的说
法。
里面有两点内容：
1。资源的充沛程度和社会松散度的关系
2。社会怎么从平衡走到平衡
这里面带着许多进化论和memetics的味道，也可以用进化论来解释。关于一，无非就是
“社会”这个“动物”的“文化”遗传是要适应环境的，适应的“文化”就传下去，不
适应的“文化”就终结。这环境是内在的还是外在的我一直不确定，但是你给了一个很
好的支持外在环境的说法，很有意思。关于二，社会怎么随着环境而变化，如果你的观
点是，需要一些先驱者来带动，而我的观点是，就像达尔文进化论取代了拉马克遗传论
（Lamarckian inheritance），“文化”遗传也是传代的，也就是，某一代人适应于一
个时代的文化，两个人结婚加上外部的刺激，传授给下一代的文化就会更适应新时机，
所以从平衡走到平衡这个宏观变化靠的不是个人的变化，而是组成成分的分布变化，并
不靠先驱者带动也并不靠任何人的什么人为的手段。
在生物界，拉马克遗传基本上是不成立的，因为生理遗传靠的是染色体，传代时才能起
效果。在我们说的“文化”遗传上，这不是绝对的， |
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s******y
发帖数: 28562 | 25
癌症干细胞是癌症细胞里面比较特殊的一种。之所以叫它们为干细胞是因为它们有比较
高的潜伏性和可变性。但是它们并不是正常的干细胞，其实他们到底应不应该叫做“干
细胞”都是有疑问的。比方说，正常的干细胞的传代是有限的，而且可以被稳定的诱导
成为分化细胞。癌症干细胞则是可以无限传代的，但是不能稳定诱导为分化细胞。所以
对于研究正常的干细胞应用来说，癌症干细胞几乎是一点用都没有。
至于说近年干细胞的进展，除了可诱导干细胞，在我的个人的看法中，比较重要的进展
还有：
１。用干细胞治疗心肌坏死取得初步疗效
２。用干细胞体外重构有基本功能的器官
３。用干细胞分化出有功能的胰岛细胞 |
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s********n
发帖数: 26222 | 26 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 孟山都转基因主粮是将转基因大豆玉米棉花的翻版
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:35:47 2010, 美东)
孟山都转基因主粮将是转基因大豆翻版
孟山都转基因主粮是转基因大豆玉米棉花的翻版
中国的大豆业陷落了， 为什么， 被孟山都的转基因大豆搞垮了
中国的玉米种植主权失去了， 为什么， 被孟山都的转基因玉米攻陷了
中国的棉花业依赖于美国， 为什么还是孟山都的转基因棉花占了上风
现在孟山都居然进一步将黑手伸到中国主粮， 其结果将是转基因大豆玉米棉花的翻版
， 全盘受控于美国粮商和华尔街资本。
所有这些孟山都推出的转基因品种都有类似一种自杀机制， 也就是说不能传代保种，
传代就会品质下降， 病虫害重生， 这可能是跟转基因表达的淬灭有关系， 第一代转
基因高表达，以后由于表观遗传的不稳定逐代下降甚至失去表达。 这样， 中国农民必
需持续不断地向孟山都买种子， 而且出了病虫害只有买孟山都专门的农药化肥， 还有
专利费是不间断的。 |
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L*****i
发帖数: 237 | 27 甲型肝炎的预防和治疗（转载）
甲型肝炎是由通过感染甲型肝炎病毒(HAV)引起的急性肝脏炎症，主要经粪——口途径
传播，是我国常见的肠道传染病之一，在病毒性肝炎中发病率及感染率最高。
甲型病毒性肝炎（简称甲型肝炎）主要由粪--口（或肛--口），通过消化道传播的甲型
肝炎病毒（简称甲肝病毒）而得病。人体感染甲肝病毒后，通常约有1个月的潜伏期，
此时没有症状，之后可出现无其他原因可解释的发烧、乏力、食欲减退、恶心、呕吐和
皮肤发黄，有的病人有腹胀或腹泻，尿呈褐色，大便色浅，检查肝脏有肿大和触痛或叩
痛的体征。肝功能检查显示谷丙转氨酶（ALT）明显异常。患者血清甲肝抗体呈阳性或
滴度明显升高。症状轻重各异，轻症病程1－2周，重症可致数周或更长。
黄疸前期 起病急，有畏寒、发热、全身乏力、食欲不振、厌油、恶心、呕吐、腹痛、
肝区痛、腹泻，尿色逐渐加深，至呈浓茶状。少数病例以发热、头痛、上呼吸道症状等
为主要表现。本期持续1-21日，平均5-7日。
黄疸期 自觉症状可有所好转，发热减退，但尿色继续加深，巩膜、皮肤出现黄染，约
于2周内达高峰。可有大便颜色变浅、皮肤骚痒、心动过缓等梗阻性黄疸表现。肝... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 28 武则天在营州之乱时曾经让武氏子弟带兵镀金，好传代，但是武氏子弟大多纨绔，残暴
弑杀，让百姓和士民非常反感。黄河以北有民谣说杀人之多，唯此二何。（武则天的侄
子武懿宗和叛军将领何阿小）
武则天的宠臣也都被人称为酷吏和佞臣，名声非常不好，因为武则天本人的声望就不是
很高。她无法确保死后能保住武家的天下，因此在营州之乱后开始召见太子反京。
总结来看原因有三点。
一是武家子弟没有成器可以继承大统的。
二是朝廷内没有稳到可以用托孤大臣传代。
三是李家声望很高，武则天来不及慢慢铲除了。
再加上一个原因，就是史书中记载她问狄仁杰娘家和夫家哪个亲，狄仁杰回答说夫家称
帝仍然可以让武则天作为帝后享受祭祀。
享受祭祀，确保身后之事，对古代人也是很重要的。 |
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h*****n
发帖数: 2415 | 29 真主（即安拉，是创造万物，掌握一切，无形象，无方位，无所不在的宇宙主宰）两天
之内造了大地。他在地上造了山岳，并在那里降下幸福吉利。接着又在四天内为需求者
规定了生活所需。他遂前往满是烟雾的苍天。他对天地说：“你俩不管是自愿还是被迫
都前来听令吧！”天地说：“我们自愿前来。”
真主登上宝座。他役使日月各按一定的时辰运行。随后他又造了众天使，他们赞美
他，崇拜他，虔诚地向他顶礼膜拜。接着真主又想创造阿丹及其子孙，让他居住在大地
上。他告诉众天使说，他要造另外的人类，让他们在大地上劳动生息，让他们以植物为
食，开发利用大地底下的宝藏，并让他们在那里繁育传代。
众天使是真主所造，并赐予他们以恩惠。他们崇拜他，服从他。当众天使得知真主
又要造人类时，便产生了疑虑。他们担心这是由于他们失职或者他们之中有谁违背了真
主的意志造成的结果，于是赶快来到真主面前表白：“我们赞美你，颂扬你，你怎么又
要在大地上造别的呢？他们定会做出伤风败俗的事，争权夺利，相互残杀，弄得污血四
溅。只有我们才赞美你，奉你为神圣。”他们说这些话是为了解除自己心中的疑虑，希
望真主让他们在大地上繁育传代，因为他们最先得到真主的... 阅读全帖 |
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A**e
发帖数: 1388 | 30 培养的细胞，在高倍镜下发现小黑点，不多，但是仔细观察这些小点在动，同时培养基
没有混浊，细胞形态影响不大。
查了一下，好像是一种叫“黑胶虫”的东西，不知道英文名字是什么。说是国内实验室
感染这种东西的很多，所以想请教一下大家，你们在国外养细胞有没有遇到过这种东西？
这个东西到底存在不存在呢？英文是什么呢？遇到这种问题了，究竟该怎么处理？谢谢
下面是我在网上搜的：
“黑胶虫”是近十几年才发现的一种细胞污染物，“黑胶虫”的分类目前尚无鉴定确认。
“黑胶虫”可寄生于动物细胞，也可以生存于培养基中，依靠细胞和培养基中的营养为
生，并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，开始时对细胞并没有什么影
响，但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候， 细胞生长就会受到影响直至死亡，严重
影响了科研活动的开展和进行。所以“黑胶虫”的污染常在培养条件改变、细胞接种密
度降低、细胞状态不佳时显现并使实验中断，尤其在冻存细胞复苏时可造成大量细胞死
亡。
目前比较公认的观点认为“黑胶虫”是一种微生物，增殖缓慢但对细胞有损害，数量达
到一定程度可引起细胞死亡，其来源可能是细胞本身的污染或从动物取材时污染造成的
。 |
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s********n
发帖数: 26222 | 31 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 揭秘： 孟山都转基因品种的自杀机制
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:43:37 2010, 美东)
所有孟山都推出的转基因品种都有类似一种自杀机制， 也就是说不能传代保种， 传代
就会品质下降， 病虫害重生， 这可能是跟转基因表达的淬灭有关系， 第一代转基因
高表达，以后由于表观遗传的不稳定逐代下降甚至失去表达。 这样， 中国农民必需持
续不断地向孟山都买种子， 而且出了病虫害只有买孟山都专门的农药化肥， 还有专利
费是不间断的。
要想克服孟山都的转基因品种自杀机制， 可能只有通过组织培养， 也就是取第一代品
种组织培养， 直接体细胞繁殖下一代， 避免生殖细胞繁殖对品种质量的影响。大家可
以想一下。 |
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s******n
发帖数: 233 | 32 谢谢回复，但这与细胞周期没关系。我以前发现同样细胞开始可被retrovirus 感染，
但如果长满后不传代，拖延1-2天后，再消化传代后细胞就不被感染，应该和细胞表面
病毒受体变化有关系，但不知怎么解决。 |
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t****b
发帖数: 47 | 33 2012年11月13日，新的生物学刊物eLife发表论文：中国科学家攻克了一个长期困扰国
际科学界的难题，而这一基础科学问题也与人类、特别是中国人民的健康相关。
过去，世界和中国忽略了1980年代我国科学家在条件艰苦时代做出重要贡献，我们现在
应该赞广西肿瘤防治研究所的严瑞琪和苏建家等、北京第二传染病院的余昌晏等和中国
医学科学院的庞其方等建立乙肝动物模型；
现在，我国已经有条件和能力改革科学管理体制机制、提供适当环境，让一些科研机构
年富力强的科学家心无旁骛，如北京生命科学研究所的李文辉带领学生和同事发现乙肝
病毒受体；
将来，希望全国科研机构能推广适合各个学科和机构自身规律的体制机制改革，使大批
年轻人集中精力在专业上充分发挥作用，他们大有作为才能使中国的科学大有希望。
肝炎和肝炎病毒
肝炎在全世界有广泛的危害，中国人群肝炎患病率尤其高。多种病毒导致病毒性肝炎：
甲、乙、丙、丁、戊（A、B、C、D、E）等。
全球二十亿人曾感染乙型肝炎病毒（HBV），慢性乙肝感染超过3.5亿人。即使在乙肝疫
苗已经研制成功多年以后，我国还有逾九千万人感染过乙肝病毒，上千万乙肝患者，每
年感染超过百万... 阅读全帖 |
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s********r
发帖数: 312 | 34 Rock inhibitor 主要是防止human ES 传代之后有很多细胞死掉的问题，普通的mouse
ES随便怎么传都疯长，加这个没什么意义啊。除非你能够challenge mouse ES出现传代
后细胞死亡的现象，那倒可以试试。 |
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f*******e
发帖数: 354 | 35 周五传代，周六换液去掉rock inhibitor,然后多加个三倍培液，周日不去没有问题
: 那不是刚传代的细胞，可不可以周五傍晚换液后，周六不换，周日早上换？
: 实验室只有我一个人做，没人跟我轮
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发帖数: 1 | 36 你这个问题描述的非常不清楚。
我猜你的模式生物是Arabidopsis，你的MutantB是T-DNA mutation line。你的
overexpression line也是用的35S-driven T-DNA insertion vector。这些T-DNA
insertion fragment元件都非常相似比如都有35S启动子，都有35S或是NOS terminator
，还有很多坑性元件的启动子和终止子都是相同的。多个T-DNA insertion 在同一个植
株里面会导致植物PTGS，使 T-DNA insertion 上的基因表达沉默。这个在Arabidopsis
里面非常常见。
即便是野生型背景下插入一个T-DNA多次传代后表达量也有变化。很直接的例子是T-DNA
insertion 库的种子多次传代后失去antibiotic抗性。
就算不考虑PTGS的因素，因为T-DNA是随机插入。你也需要有至少两个A 基因
overexpression line说明MutantB对A基因表达的量的影响，因为B基因可能调控A的T-
DNA插入位点的表达水平。
你已经有了WT和Mut... 阅读全帖 |
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s********n
发帖数: 26222 | 37 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 揭秘： 孟山都转基因品种的自杀机制
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:43:37 2010, 美东)
所有孟山都推出的转基因品种都有类似一种自杀机制， 也就是说不能传代保种， 传代
就会品质下降， 病虫害重生， 这可能是跟转基因表达的淬灭有关系， 第一代转基因
高表达，以后由于表观遗传的不稳定逐代下降甚至失去表达。 这样， 中国农民必需持
续不断地向孟山都买种子， 而且出了病虫害只有买孟山都专门的农药化肥， 还有专利
费是不间断的。
要想克服孟山都的转基因品种自杀机制， 可能只有通过组织培养， 也就是取第一代品
种组织培养， 直接体细胞繁殖下一代， 避免生殖细胞繁殖对品种质量的影响。大家可
以想一下。 |
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s********n
发帖数: 26222 | 38 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: smokinggun (硝烟), 信区: Military
标 题: 美国孟山都和高盛操控中国物价指数（CPI）
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Mar 6 23:18:19 2010, 美东)
美国孟山都和高盛操控中国物价指数（CPI）
中国的物价指数构成很大一部分是来自于食物， 占34%， 其中猪肉占10%。另外一个
大头是衣服， 服装占物价指数9%。 从各种数据里看， 美国企业正逐渐操控中国的物
价指数。 还有大项是住房， 占13%， 且正在上升中。
食品价格主要构成是粮食， 油价， 猪肉价格。 粮食方面， 美国正在操控中国的玉
米生产， 其方法就是孟山都的转基因玉米品种。这种转基因品种第一年两年种下去收
成好且抗病害， 但是这种品种不能传代，如果农民私下自己往下种， 就品质下降，
虫害大幅度上升， 而且农药只有孟山都特有。 孟山都通过种子专利， 化肥可以牢牢
第 控制住中国玉米的生产。 现在孟山都将公关做到了转基因主粮上， 力求一气掌控
中国主粮生产， 那么从玉米来看， 就是其转基因策略的翻版， 中 |
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j**n
发帖数: 13789 | 39 寻找宪政共识
——诺奖为《零八宪章》群体雕塑揭幕
本年度诺贝尔和平奖颁给正在狱中服刑的《零八宪章》运动的发起人刘晓波，由此
掀起了一场世界性的刘晓波冲击波。而刘晓波获奖的真正意义，就是世界文明主流对来
自中国民间，并广泛凝聚社会共识的《零八宪章》历史地位的肯定。这是刘晓波及其中
国民主运动群体，以几代人的追求和牢狱灾难为代价赢得的。
中国当政者为刘晓波获诺奖提供条件
当代中国，从西单民主墙时代至今，民主运动已经走过30多年风雨历程，其间不断
有人被提名诺奖，但除1989年达赖喇嘛获奖外，事实上大陆本土无人赢得。然而，此次
挪威诺贝尔委员会不顾中国当局百般干扰，在今年获提名人士或组织多达237个，创历
来纪录之最的情况下，颁给了中国异议人士刘晓波，实在是意义非凡。这不仅体现着国
际社会为寻找宪政共识的刘晓波付出的代价买单，更是世界文明主流对“异议人士”所
代表的中国国内民主力量和《零八宪章》给予了最高的奖赏。
其实，有关对刘晓波先生的诺奖提名从今年年初就开始了。因为晓波蒙难入狱以来
，国内外已经有很多机构和个... 阅读全帖 |
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d*g
发帖数: 16592 | 40 我对胡温和江朱都没有什么偏好，
不过我觉得胡温都是典型的一直在中央集权线上的，
江则是代表了上海地方势力。
这就是为啥邓隔代接班人选了胡。
果然江搞出了上海帮，陈良宇，
好在江还比较乖，最终没有违背邓的遗愿，传权力给胡。
所以邓还是有高人之处的，
顺便废话一下邓的传位策略
看到这么多中外领导人（包括古代君王）在选接班人时候出了那么多问题
自己发明了隔代转权，
这样强悍的孙代不会在还处于被培养的时候，就虎视眈眈，比如赵，
自己也不会因为不满意就朝令夕改，不时搞废长立幼，比如刘少奇
而且因为这需要在选下代接班人时候选相对比较乖和弱的，
所以自己期待不高，而且自己的政策可以比较好地延续，
这种传代方法，比较适合集权的传位。 |
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C********g
发帖数: 9656 | 41 张育明
明末清初文史哲大师顾炎武说：“士大夫之无耻是为国耻。”诚哉斯言也。
任何群众运动群体都需要知识份子参与，因为知识份子一般都是人群中的精英，代言人
，或摇羽毛扇的领袖人物。而任何群体行动欲有所作为均离不开士大夫的舆论和思想指
导。但人间任何舆论和作为都有正义与邪恶之分，知识份子中君子言行之一切动机与后
果一般都是正义的，无论从哪个角度分析与观察，无论到任何地方任何时候看起来总离
不开‘真，善，美，爱’这个核心。而知识份子中小人言行之一切动机与后果则都是邪
恶的，无论从哪个角度分析与观察，无论到任何地方任何时候看起来也总离不开‘假，
恶，丑，毒’这个核心。正如耶稣在福音书中教训门徒说：‘只有好树结好果子，惟独
坏树结坏果子，所以凭着他们的果子就可以把它们认出来’（马太福音7：16—18）。
毛泽东在北京大学图书馆当管理员时，有一天早晨刚一上班，傅斯年教授拿一张纸片交
给毛泽东说：“我今天有个重要讲演，这个纸条上写有几篇参考资料，请你帮我找出来
，多谢了！”毛泽东当场用湖南土话回答说：“你讲演与我何干，你自己去找！”傅斯
年老教授面对这个青年管理员的无理在忍无可忍的情况下，轻轻打了毛... 阅读全帖 |
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M*******o
发帖数: 632 | 42 发信人: MonkeyBro (猴哥), 信区: Salon
标 题: 反右的直接责任人是谁？ (反思中共之一)
发信站: BBS 未名空湔?(Sat Apr 30 22:44:07 2011, 美东)
反右是毛泽东精心设计的“引蛇出洞”的一个阳谋， 这是勿需质疑的。 但是，谁是反
右的马前卒？多年来，没有中国的大众传播媒介谈论反右话题，没有中国的出版社出版
有关反右运动的书籍。其中的隐情，就在于邓小平已在党内对反右运动盖棺定论。邓小
平在1980年3月19日说：“一九五七年反右派斗争还是要肯定……不反击，我们就不能
前进，错误在于扩大化。”（《小平文选》1957——1982年，第258页）。他致死都拒
绝右派平反，以“改正”敷衍，并以此为中共纠正反右政策定调。1981年6月27日中共
中央十一届六中全会通过决议说：“在整风运动中，极少数资产阶级右派分子乘机鼓吹
所谓'大鸣大放’，向党和新生的社会主义制度放肆地发动进攻，妄图取代共产党的领
导，对这种进攻进行坚决地反击是完全正确和必要的……。”就是这样一纸荒唐的决议
，至今像紧箍咒一样束缚着胡温当局的手脚。由此可见，邓小平的阴影，就是... 阅读全帖 |
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B*V
发帖数: 3365 | 43 方舟子批评余凤高支持高尔顿的优生学，有多少人认为方舟子是对的呢？
2010-10-19 00:02谢觅仁 | 分类：其他社会话题 | 浏览456次
大家说的有一定道理。我觉得，方舟子之所以批评余凤高，批评高尔顿的优生学，主要
是因为他不知道中国有中国的不同国情，就像一位网友所说，方舟子是“媚西方之俗”
，不能理解中国是一个人满为患的大国，需要优生学来提高中国人的素质。关于方舟子
批评优生学的问题，我写了一篇题为“从优生学的是与非说起——方舟子对了吗？”的
文章和其它一些文章和故事等，欢迎各位来讨论，我的博客地址是：http://blog.sina.com.cn/u/1825589161
优生学是英国著名科学家弗朗西斯 · 高尔顿（ 1822－1911）创立的。就像西方的文
艺复兴和近代历史时期的一些其它先驱科学理论经历了历史风雨考验一样，优生学在诞
生以来的一百多年里，也在经受历史风雨的考验。
关于高尔顿的优生学，余凤高和蒋功成等学者已经做过一些介绍和论述，但为了让人们
对高尔顿及其优生学多了解一些，我再把高尔顿创立优生学的情况介绍一下。高尔顿是
进化论奠基者达尔文的表弟，他从小就显露... 阅读全帖 |
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i***s
发帖数: 39120 | 44 中国历史上，秦始皇、汉武帝等强大的帝王，也不能免俗地求仙、服丹，以求长生。那么人类到底能活多长？
长寿几乎是世界各民族的追求。中国历史上，秦始皇、汉武帝等强大的帝王，也不能免俗地求仙、服丹，以求长生。那么人类到底能活多长？最近，研究人员发现一种药物疗法，有望通过限制并修复细胞DNA损伤的方法治疗一种影响儿童的早衰疾病。澳大利亚新南威尔士大学医学院院长彼得-史密斯也宣称，随着干细胞治疗等新技术以及用于帮助人体自身修复的新药物的研发，人类寿命预期将很有可能达到150岁。由于医药、生活方式和公共卫生事业等方面在不断取得进步，那么，人类的长寿问题，是不是得到了解决？
人类寿命不断延伸
各国热研“长寿”课题
在一些古代资料中，可以查到享寿高达200多岁的记录，比如据说逝于1933年的中医师李清云，生年有说是1677年，即他活了256岁。更详细的说法是在他100岁时曾因在中医中药方面的杰出成就，而获政府的特别奖励；200岁的时候仍常去讲学；还说他曾娶过24个妻子，育有180位后人；而他的去世也一样传奇――据说当天上午仍在山间采药，下午就无疾而终了。果如是，他的一生经历了康熙、雍正、乾隆、嘉庆、道光... 阅读全帖 |
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c***s
发帖数: 70028 | 45 秦始皇（雕像）曾企图能够长生不老。
人类梦想长寿
长寿几乎是世界各民族的追求。中国历史上，秦始皇、汉武帝等强大的帝王，也不能免俗地求仙、服丹，以求长生。那么人类到底能活多长？最近，研究人员发现一种药物疗法，有望通过限制并修复细胞DNA损伤的方法治疗一种影响儿童的早衰疾病。澳大利亚新南威尔士大学医学院院长彼得·史密斯也宣称，随着干细胞治疗等新技术以及用于帮助人体自身修复的新药物的研发，人类寿命预期将很有可能达到150岁。由于医药、生活方式和公共卫生事业等方面在不断取得进步，那么，人类的长寿问题，是不是得到了解决？
人类寿命不断延伸
各国热研“长寿”课题
在一些古代资料中，可以查到享寿高达200多岁的记录，比如据说逝于1933年的中医师李清云，生年有说是1677年，即他活了256岁。更详细的说法是在他 100岁时曾因在中医中药方面的杰出成就，而获政府的特别奖励；200岁的时候仍常去讲学；还说他曾娶过24个妻子，育有180位后人；而他的去世也一样传奇——据说当天上午仍在山间采药，下午就无疾而终了。果如是，他的一生经历了康熙、雍正、乾隆、嘉庆、道光、咸丰、同治、光绪、宣统九代清帝，直至民国，是... 阅读全帖 |
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S*******s
发帖数: 10098 | 46 我们的审美观是基于病态的， 比如要求女子瘦弱苍白贫血。
这样的弱种传代，后代男子们的体魄越来越瘦小。 |
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c***s
发帖数: 70028 | 47 年轻时的夏梦
秋风沉醉，伊人垂泪。当92岁的秦怡和88岁的王文娟把手轻轻地与夏梦交叠，这个82岁的“小妹妹”竟有些动了情、动了容。夏梦没想到，阔别银幕多年，回到出生之地上海，老朋友待她如初见。影迷们更觉惊喜，从来只觉银幕上斯人如天仙下凡，袅袅婷婷，怎知暌违多年，一身素色难掩光彩。
11月，“还记得年少时的‘梦’吗？——纪念著名表演艺术家夏梦女士从影65周年”活动在上海电影博物馆举行。那一晚，能容纳百人的艺术影厅里座无虚席，连通道都挤满了人。不仅是观众，秦怡、王文娟、叶辛、吴思远、曹景行、佟瑞欣等许多文化名人也在挤挤挨挨的人群里化身影迷。不为别的，只为谈谈旧电影、聊聊当年情。
“我和金庸，其实不如不说”
一说夏梦，金庸对她的那点爱慕之意便不可不提。武侠大师为梦中情人委身长城影业当个小编剧的轶事，当年的华语文学圈里人尽皆知。一度还有人揣测，大侠笔下的黄蓉、小龙女、王语嫣，其原型都有夏梦若隐若现的影子。而金庸以化名“林欢”为夏梦度身定制的剧本《绝代佳人》，单看片名，爱意已了然若揭。
但无论是“襄王有心，神女无意”，抑或是“才子有情，佳人有意，只是恨不相逢未嫁时”，穿行过春花秋月，一切往事都如... 阅读全帖 |
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y**********r
发帖数: 672 | 49 我的意思可以啸聚山林传代
其实真做土匪 官府反而不怎么管 但是你造反不行 |
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S*******C
发帖数: 7325 | 50 ☆─────────────────────────────────────☆
hahan (hahan) 于 (Fri Mar 26 15:34:33 2010, 美东) 提到:
现在好像把宋江说的阴险全凭厚黑术爬到老大的位子，还为了自己私利牺牲兄弟。
实际上宋江说的一点都没错，招了安对各兄弟都是好的出路，不招安死路一条，什么叫
宋江为了自己谋出路牺牲几乎所有梁山好汉，别人又不是傻子，旧社会帮会堂会的老大
又不是教主，让别人干什么就干什么。
出场就有人气那是宋公明的江湖声望，我们那过去听人讲一人没钱没势没人，但一句话
对周围几百里道上混的都有份量，这都是江湖规矩（道义），要觉得这声望是能用几个
钱，几个小计谋就能把人收买把人厚黑了真是naive，太低估劳动人民的智商了，不是
所有人都跟李逵那样没脑子。
那年代没报纸电视，也也比现在重道义（江湖规矩），宋江绝对是有强大人格力量才能
有书里写得那个名望的。
杀人放火受诏安是宋代脱贫甚至当官的一条路，就像宋江说的，弟兄们也好有个好出路。
问题出在去打方腊，实际土匪都是跟政府扯皮，今天招了，明天官府找麻烦就又反了，
制度原因又导致剿... 阅读全帖 |
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