D***a
发帖数: 516 | 1 用293T细胞，转lentivirus病毒载体和gagpal+vsvg,产生的病毒是不是有一部分又感染
回到293T了？那这个会增加病毒产率（比如说感染回去，vector又可以被复制，产生新
的病毒）还是降低病毒产率（病毒被消耗掉了）？
我的一个shRNA病毒产量总是很低（一个是共转染之后293T荧光少（载体含GFP），另一
个是病毒infect target cell后筛选，得到的克隆少得多），跟control和另外一个
gene family isoform相比。我做了不加gagpal和vsvg,把载体单独转到293T里面，从
GFP荧光看plasmid质量没问题，跟control是一样的。查到有文章提到这个蛋白可以帮
助病毒entry，是不是就是病毒低的原因呢？
谢谢大家。 |
p*******e
发帖数: 3 | 2 病毒被消耗了吧。被感染的细胞不可以再复制病毒了吧。 |
D***a
发帖数: 516 | 3 那我的shRNA这个情况，应该是消耗减少了，得到的病毒应该更多啊。
【在 p*******e 的大作中提到】
: 病毒被消耗了吧。被感染的细胞不可以再复制病毒了吧。
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r***e
发帖数: 2539 | 4 有可能。
另外看一下你的载体有没有重组，掉了一段，影响包装。
但是单独转染看不出问题。lenti很容易重组的。
【在 D***a 的大作中提到】
: 用293T细胞，转lentivirus病毒载体和gagpal+vsvg,产生的病毒是不是有一部分又感染
: 回到293T了？那这个会增加病毒产率（比如说感染回去，vector又可以被复制，产生新
: 的病毒）还是降低病毒产率（病毒被消耗掉了）？
: 我的一个shRNA病毒产量总是很低（一个是共转染之后293T荧光少（载体含GFP），另一
: 个是病毒infect target cell后筛选，得到的克隆少得多），跟control和另外一个
: gene family isoform相比。我做了不加gagpal和vsvg,把载体单独转到293T里面，从
: GFP荧光看plasmid质量没问题，跟control是一样的。查到有文章提到这个蛋白可以帮
: 助病毒entry，是不是就是病毒低的原因呢？
: 谢谢大家。
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D***a
发帖数: 516 | 5 谢谢。
【在 r***e 的大作中提到】
: 有可能。
: 另外看一下你的载体有没有重组，掉了一段，影响包装。
: 但是单独转染看不出问题。lenti很容易重组的。
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