求救！提纯前目标蛋白还是一条带，用SDS提纯后分裂成两条？ - Biology版

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 求救！提纯前目标蛋白还是一条带，用SDS提纯后分裂成两条？

相关主题
● 同一个蛋白却不跑在一条带上？	● Ni柱提纯蛋白为什么总有14KD杂带？镍柱不好用吗？
● SDS对蛋白的折叠有重要性吗？	● 用AKATA系统(FPLC)提纯蛋白，NaCl的浓度有讲究吗？
● 求一个5X或者6XSDS protein sample buffer 配方	● 最近心里很闷
● 直接用2 X laemmli buffer裂解的细胞怎么测蛋白浓度？	● 学生物的也不能这样啊
● ubiquitin 单体聚集的问题	● 问个蛋白纯化保持活性的问题
● Re: 蛋白提纯中盐的作用？/	● purify RNA
● Re: GST-Fusion 蛋白提纯求助!!!	● 大家都是怎么精确测量蛋白浓度的？
● 急问SDSPAGE胶查看蛋白纯度上样量多少？	● 酸性酚氯仿抽提纯DNA，中间层有白的东西

相关话题的讨论汇总
话题: 蛋白话题: 提纯话题: sds话题: 洗柱话题: 一条

进入Biology版参与讨论

(共1页)

m****m
发帖数: 395

要提纯蛋白，可以看到提纯前虽然有些杂带，但是目标蛋白还是一条带在那里的，于是
我用NI柱提纯，其中用0.1%SDS洗柱子去杂蛋白，最后用1%SDS洗脱蛋白，洗柱IMIDAZO
浓度36mM,洗脱IMIDAZO浓度500mM，取样都用BME切了（5%BME，冷室overnight），结果
用纯化前蛋白、洗柱取样、纯化后的蛋白跑胶完后发现，纯化前的目标蛋白还是一条带
（有杂质），但是经过SDS洗和洗脱后的样品都发现我要的蛋白居然分裂成两条临近的
带，距离有5KD左右，都挺深的（一条稍微浅点），太奇怪了，想不通！

v*******a
发帖数: 759

二硫键？

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 酸性酚氯仿抽提纯DNA，中间层有白的东西	● ubiquitin 单体聚集的问题
● 照这样实验下去，请问会不会有造出病毒来的危险？	● Re: 蛋白提纯中盐的作用？/
● 求建议，谢谢。	● Re: GST-Fusion 蛋白提纯求助!!!
● 再次请教，关于15kb的大plasmid	● 急问SDSPAGE胶查看蛋白纯度上样量多少？
● 同一个蛋白却不跑在一条带上？	● Ni柱提纯蛋白为什么总有14KD杂带？镍柱不好用吗？
● SDS对蛋白的折叠有重要性吗？	● 用AKATA系统(FPLC)提纯蛋白，NaCl的浓度有讲究吗？
● 求一个5X或者6XSDS protein sample buffer 配方	● 最近心里很闷
● 直接用2 X laemmli buffer裂解的细胞怎么测蛋白浓度？	● 学生物的也不能这样啊

相关话题的讨论汇总
话题: 蛋白话题: 提纯话题: sds话题: 洗柱话题: 一条

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

boards

未名新帖统计// 7月16日

历史上的今天