r****m
发帖数: 46 | 1 已经选择了Alexfluro594 590nm和617nm的激发吸收波长
FITC是490和525nm的激发吸收波长
最后一个能选择Pacific Blue（PB） 405nm和455nm的激发吸收波长吗？
谢谢 |
w*e
发帖数: 740 | 2 488 568 647 works well as three color simultanous scanning
【在 r****m 的大作中提到】
: 已经选择了Alexfluro594 590nm和617nm的激发吸收波长
: FITC是490和525nm的激发吸收波长
: 最后一个能选择Pacific Blue（PB） 405nm和455nm的激发吸收波长吗？
: 谢谢
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r****m
发帖数: 46 | |
q*****n
发帖数: 331 | 4 It should work.
Make sure your confocal system have all three lasers to excite the
fluorophore. Some confocal system does not have the blue laser. |
T**********t
发帖数: 1604 | 5 647的话，应该是用cy5吧。
【在 r****m 的大作中提到】
: 那647那个我选择什么荧光标记呢?
: 多谢多谢
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h******e
发帖数: 44 | 6 大家一般喜欢用488 543 633.商业化的机器，滤镜组多数是为这个组优化的。另外常用
的激光器也多和这组match.
别的光主要可能你的机器并没有相应的滤镜组或激光器。另外405因为和核染料吸收发
射谱相近,在抗体标记时也少用。
我做的一般是405 488 561 633. alexa dye会比别的染料好一些。特别cy3 cy5时不时
会出现诡异的问题。
再多了会用quantum dot.
你需要看你的机器硬件来决定具体的选择。另外多色标记一般需要很严的对照，扫的时
候最好是弱激光，窄谱线接收，不然假的会很多。
【在 r****m 的大作中提到】
: 已经选择了Alexfluro594 590nm和617nm的激发吸收波长
: FITC是490和525nm的激发吸收波长
: 最后一个能选择Pacific Blue（PB） 405nm和455nm的激发吸收波长吗？
: 谢谢
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s*****j
发帖数: 6435 | 7
543nm 的激光用在alexa594上也行的.
有文章说过vectorshield的mounting medium会破坏cy-series dye.
【在 h******e 的大作中提到】
: 大家一般喜欢用488 543 633.商业化的机器，滤镜组多数是为这个组优化的。另外常用
: 的激光器也多和这组match.
: 别的光主要可能你的机器并没有相应的滤镜组或激光器。另外405因为和核染料吸收发
: 射谱相近,在抗体标记时也少用。
: 我做的一般是405 488 561 633. alexa dye会比别的染料好一些。特别cy3 cy5时不时
: 会出现诡异的问题。
: 再多了会用quantum dot.
: 你需要看你的机器硬件来决定具体的选择。另外多色标记一般需要很严的对照，扫的时
: 候最好是弱激光，窄谱线接收，不然假的会很多。
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w*e
发帖数: 740 | 8 INVITROGEN的很多2抗都是647标记的呀
【在 r****m 的大作中提到】
: 那647那个我选择什么荧光标记呢?
: 多谢多谢
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w*e
发帖数: 740 | 9 我们 用的INVITROGEN的PROLONG GOLD MOUNTING MEDIUM
防止淬灭，特别是做CONFOCAL Z STAC扫描的时候
【在 s*****j 的大作中提到】
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: 543nm 的激光用在alexa594上也行的.
: 有文章说过vectorshield的mounting medium会破坏cy-series dye.
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