p*****y 发帖数: 44 | 1 Transfect HEK cell to produce retro virus. 260:280=1.9 Qiagen大提的质粒
效果不怎么好,尤其试用VSVG做envelope protein, 请问有没有别的方法提高DNA纯度?
文献说CSCL最好,但是太麻烦。试过醋酸钠重新沉淀,酚,氯仿抽提一下,纯度没见到
变化,再转染,不产生病毒了!
求其他纯化方法! |
h****n 发帖数: 2552 | 2 对,CSCL获得的quality是最好的,其次用传统手工大提-也就是酚氯仿。最不建议用kit
,提出来的质粒不stable而且quality也不好。 |
a***e 发帖数: 1010 | 3 我做过 5 年的 CsCl 大提, 没那么烦.
度?
【在 p*****y 的大作中提到】 : Transfect HEK cell to produce retro virus. 260:280=1.9 Qiagen大提的质粒 : 效果不怎么好,尤其试用VSVG做envelope protein, 请问有没有别的方法提高DNA纯度? : 文献说CSCL最好,但是太麻烦。试过醋酸钠重新沉淀,酚,氯仿抽提一下,纯度没见到 : 变化,再转染,不产生病毒了! : 求其他纯化方法!
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p*****y 发帖数: 44 | 4 搂主能不能发一份CsCl 大提的protocol到我的邮箱? 先谢了。
我就是看要离心OVERNIGHT就没去做了。 |
p*****y 发帖数: 44 | 5 ahche, 如果发邮件不方便,能不能直接贴在这里? 谢谢! |