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Biology版 - 求提高 plasmid purity
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p*****y
发帖数: 44
1
Transfect HEK cell to produce retro virus. 260:280=1.9 Qiagen大提的质粒
效果不怎么好,尤其试用VSVG做envelope protein, 请问有没有别的方法提高DNA纯度?
文献说CSCL最好,但是太麻烦。试过醋酸钠重新沉淀,酚,氯仿抽提一下,纯度没见到
变化,再转染,不产生病毒了!
求其他纯化方法!
h****n
发帖数: 2552
2
对,CSCL获得的quality是最好的,其次用传统手工大提-也就是酚氯仿。最不建议用kit
,提出来的质粒不stable而且quality也不好。
a***e
发帖数: 1010
3
我做过 5 年的 CsCl 大提, 没那么烦.

度?

【在 p*****y 的大作中提到】
: Transfect HEK cell to produce retro virus. 260:280=1.9 Qiagen大提的质粒
: 效果不怎么好,尤其试用VSVG做envelope protein, 请问有没有别的方法提高DNA纯度?
: 文献说CSCL最好,但是太麻烦。试过醋酸钠重新沉淀,酚,氯仿抽提一下,纯度没见到
: 变化,再转染,不产生病毒了!
: 求其他纯化方法!

p*****y
发帖数: 44
4
搂主能不能发一份CsCl 大提的protocol到我的邮箱? 先谢了。
我就是看要离心OVERNIGHT就没去做了。
p*****y
发帖数: 44
5
ahche, 如果发邮件不方便,能不能直接贴在这里? 谢谢!
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