h*******n 发帖数: 2052 | 1 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀?数的时候很多大大小小的细胞, 貌似
很不纯啊 |
s**x 发帖数: 138 | 2 我曾经做过这个。macrophage很大,小的是红细胞。所以,你再打开腹膜腔的时候,
注意不要损伤到血管。而且,macro是贴壁的。红细胞不贴壁。你可以多用PBS洗几次。
据说,用水短时间洗一下(after 贴壁), 红细胞会很快裂解。而macro不会。 |
w***a 发帖数: 4361 | 3 可以trypsin处理几分钟,然后PBS wash就行了。
macrophage贴壁很紧的,只能用scraper刮。
【在 h*******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀?数的时候很多大大小小的细胞, 貌似 : 很不纯啊
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h*******n 发帖数: 2052 | |
f******s 发帖数: 440 | 5 我们用EDTA in HBSS to obtain cells
然后数
你还要继续分的话,用Ficoll-Paque gradient?
再要提macro的话,FACS sorting?
【在 h*******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀?数的时候很多大大小小的细胞, 貌似 : 很不纯啊
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g*******0 发帖数: 2152 | 6 Depend on what you want to do next. If you do stimulation and measure
cytokine production or do biochemistry (western or IP),seed the cells to
experimental plate, 37C 1-2 hour, before stimulation change media and wash
away floating cells by PBS. |