h*******n
发帖数: 2052 | 1 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀？数的时候很多大大小小的细胞， 貌似
很不纯啊 |
s**x
发帖数: 138 | 2 我曾经做过这个。macrophage很大，小的是红细胞。所以，你再打开腹膜腔的时候，
注意不要损伤到血管。而且，macro是贴壁的。红细胞不贴壁。你可以多用PBS洗几次。
据说，用水短时间洗一下(after 贴壁)， 红细胞会很快裂解。而macro不会。 |
w***a
发帖数: 4361 | 3 可以trypsin处理几分钟，然后PBS wash就行了。
macrophage贴壁很紧的，只能用scraper刮。
【在 h*******n 的大作中提到】
: 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀？数的时候很多大大小小的细胞， 貌似
: 很不纯啊
|
h*******n
发帖数: 2052 | |
f******s
发帖数: 440 | 5 我们用EDTA in HBSS to obtain cells
然后数
你还要继续分的话，用Ficoll-Paque gradient?
再要提macro的话，FACS sorting？
【在 h*******n 的大作中提到】
: 请问peritoneal macrophage怎么进一步纯化呀？数的时候很多大大小小的细胞， 貌似
: 很不纯啊
|
g*******0
发帖数: 2152 | 6 Depend on what you want to do next. If you do stimulation and measure
cytokine production or do biochemistry (western or IP),seed the cells to
experimental plate, 37C 1-2 hour, before stimulation change media and wash
away floating cells by PBS. |
