w******e 发帖数: 1187 | 1 Methods Mol Biol. 1999;118:143-60.
Detection of nucleic acid interactions using surface plasmon resonance.
Crouch RJ, Wakasa M, Haruki M.
email: q****[email protected]
thank you!! |
m*******s 发帖数: 3142 | |
a****o 发帖数: 1786 | 3 建议你不要用这种方法,除非有人对这个方法很熟,愿意帮你,不然不值得费这个事
【在 w******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : Methods Mol Biol. 1999;118:143-60. : Detection of nucleic acid interactions using surface plasmon resonance. : Crouch RJ, Wakasa M, Haruki M. : email: q****[email protected] : thank you!!
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T**********t 发帖数: 1604 | 4 嗯,SPR很tricky,不像EMSA或者filter binding那么容易上手的。 |
w******e 发帖数: 1187 | 5 多谢提醒!实不相瞒,我就是想各种方法都玩玩。。。呵呵
【在 a****o 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 建议你不要用这种方法,除非有人对这个方法很熟,愿意帮你,不然不值得费这个事
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w******e 发帖数: 1187 | 6 thx for sharing!!
【在 m*******s 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : the whole book : http://www.sendspace.com/file/szxxvi
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w******e 发帖数: 1187 | 7 en,我们lab ms从来没人做出来过。。。不过话说我做EMSA或filter
binding居然也前三次颗粒无收。。。丢人啊~
BTW,如果想知道Kon/Koff,不用SPR的话有什么比较简单的方法吗?
ms可以做dilution time course,不过ms很麻烦
【在 T**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 嗯,SPR很tricky,不像EMSA或者filter binding那么容易上手的。
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T**********t 发帖数: 1604 | 8 dilution time course是什么?
我刚开始做Isothermal Titration Calorimetry (ITC),好像不算特别难做。就是时间
长,一个test要接近三个小时,样品用量也大,我做一次titration要用掉0.1-0.2mg的
蛋白。
【在 w******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : en,我们lab ms从来没人做出来过。。。不过话说我做EMSA或filter : binding居然也前三次颗粒无收。。。丢人啊~ : BTW,如果想知道Kon/Koff,不用SPR的话有什么比较简单的方法吗? : ms可以做dilution time course,不过ms很麻烦
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w******e 发帖数: 1187 | 9 我看一个methods上,在incubation结束后狂dilute一下,模拟ligand无法rebind的
状态,那么complex的数量根据时间成指数衰减,把几个time point上的
value plot一下可以搞出个koff来。
ITC倒没听过,不过0.1~0.2mg...我的蛋白都是买的,50ug300大刀,肯定没得玩~
【在 T**********t 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : dilution time course是什么? : 我刚开始做Isothermal Titration Calorimetry (ITC),好像不算特别难做。就是时间 : 长,一个test要接近三个小时,样品用量也大,我做一次titration要用掉0.1-0.2mg的 : 蛋白。
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T**********t 发帖数: 1604 | 10 嗯,买蛋白的话,肯定做不起这个实验,我的都是自己表达的,做起来都特心疼。
【在 w******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我看一个methods上,在incubation结束后狂dilute一下,模拟ligand无法rebind的 : 状态,那么complex的数量根据时间成指数衰减,把几个time point上的 : value plot一下可以搞出个koff来。 : ITC倒没听过,不过0.1~0.2mg...我的蛋白都是买的,50ug300大刀,肯定没得玩~
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