t****p 发帖数: 1504 | 1 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为
细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它? |
s*****j 发帖数: 6435 | 2 两个不相关的问题吧?
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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m**z 发帖数: 787 | 3 几年前听的Sunny Xie的seminar,就好像讲到monitor single molecule fluorescence
in living cells了。。
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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d***y 发帖数: 195 | 4 能,
camera和algorithm搞明白就成
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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R*****o 发帖数: 14902 | 5 short answer is confocal microscopy or deconvolution
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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z****g 发帖数: 3340 | 6 我的理解是不能。因为现在的单分子技术要求就是高亮度的荧光,以期减少和背景的混
淆。
Ps,细胞的自身荧光一般都是绿色,换了其他荧光说不定可以。
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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t********n 发帖数: 64 | 7 能,TIRF上的单分子不就是这么做的么,蛋白表达在非常低的浓度,尽可能让每个分子
seperate出来,不过刚开始做的时候找表达量合适的细胞会费点劲,另外,如果你的分
子是cytosolic protein,据说现在也有照胞内单层平面的类似TIRF的技术
【在 t****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 比如只能表达少量的荧光蛋白,western可以检测到,但在一般显微镜下看不到(因为 : 细胞的自身荧光较强),现在的显微技术有没有可能看到它?
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