t****p
发帖数: 1504 | 1 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？ |
s*****j
发帖数: 6435 | 2 两个不相关的问题吧?
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
m**z
发帖数: 787 | 3 几年前听的Sunny Xie的seminar,就好像讲到monitor single molecule fluorescence
in living cells了。。
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
d***y
发帖数: 195 | 4 能，
camera和algorithm搞明白就成
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
R*****o
发帖数: 14902 | 5 short answer is confocal microscopy or deconvolution
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
z****g
发帖数: 3340 | 6 我的理解是不能。因为现在的单分子技术要求就是高亮度的荧光，以期减少和背景的混
淆。
Ps，细胞的自身荧光一般都是绿色，换了其他荧光说不定可以。
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
t********n
发帖数: 64 | 7 能，TIRF上的单分子不就是这么做的么，蛋白表达在非常低的浓度，尽可能让每个分子
seperate出来，不过刚开始做的时候找表达量合适的细胞会费点劲，另外，如果你的分
子是cytosolic protein，据说现在也有照胞内单层平面的类似TIRF的技术
【在 t****p 的大作中提到】
: 比如只能表达少量的荧光蛋白，western可以检测到，但在一般显微镜下看不到（因为
: 细胞的自身荧光较强），现在的显微技术有没有可能看到它？
|
