o**4 发帖数: 35028 | 1 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点?
同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus?
谢谢 |
r***e 发帖数: 2539 | 2 会。
【在 o**4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点? : 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus? : 谢谢
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o**4 发帖数: 35028 | 3 O(∩_∩)O谢谢,
也就是说会有叠加效应是吧?
【在 r***e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 会。
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n********k 发帖数: 2818 | 4 u would have to prove individually first before pool them...or you would
have to design ways to control for the off target effects...
【在 o**4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点? : 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus? : 谢谢
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v***a 发帖数: 1242 | 5 弱弱地问一下,一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects?
【在 n********k 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : u would have to prove individually first before pool them...or you would : have to design ways to control for the off target effects...
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r***e 发帖数: 2539 | 6 叠加效应不知道,但是能同时感染没问题。
【在 o**4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : O(∩_∩)O谢谢, : 也就是说会有叠加效应是吧?
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w***a 发帖数: 4361 | 7 换几种不同的siRNA against同一个target,
然后看phenotype是否一致?
其实任何siRNA或多或少都有off target effect,特别是siRNA浓度大的时候。
【在 v***a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 弱弱地问一下,一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects?
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n********k 发帖数: 2818 | 8 Rescue experiment...
【在 w***a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 换几种不同的siRNA against同一个target, : 然后看phenotype是否一致? : 其实任何siRNA或多或少都有off target effect,特别是siRNA浓度大的时候。
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c******r 发帖数: 3778 | 9 不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题:
1. 增加了off target的机会。
2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。
3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感
染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。
这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实
倒是无所谓,混着就混着用好了。
【在 o**4 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点? : 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus? : 谢谢
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o**4 发帖数: 35028 | 10 其实都是同一个基因的设计的3哥不同的lentivirus啊,
如果哪个基因有表型,我再分开分析就可以了吧?
【在 c******r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题: : 1. 增加了off target的机会。 : 2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。 : 3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感 : 染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。 : 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实 : 倒是无所谓,混着就混着用好了。
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s**********r 发帖数: 1120 | 11 难道不是细胞被一个病毒感染后会“关闭”自己,其他病毒不容易再感染了吗?
【在 r***e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 会。
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r***e 发帖数: 2539 | 12 我以前也听说过这个,但是事实证明细胞能被反复感染的。
【在 s**********r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 难道不是细胞被一个病毒感染后会“关闭”自己,其他病毒不容易再感染了吗?
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v***a 发帖数: 1242 | 13 为啥混在一起会增加off target?我以前听说的是(我只做过siRNA)混在一起反而降
低了off target effect。
【在 c******r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题: : 1. 增加了off target的机会。 : 2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。 : 3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感 : 染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。 : 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实 : 倒是无所谓,混着就混着用好了。
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