o**4
发帖数: 35028 | 1 我也不确定那个比较有效果，所以我想同时加进去，会不会效果更好点?
同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus？
谢谢 |
r***e
发帖数: 2539 | 2 会。
【在 o**4 的大作中提到】
: 我也不确定那个比较有效果，所以我想同时加进去，会不会效果更好点?
: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus？
: 谢谢
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o**4
发帖数: 35028 | 3 O(∩_∩)O谢谢，
也就是说会有叠加效应是吧？
【在 r***e 的大作中提到】
: 会。
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n********k
发帖数: 2818 | 4 u would have to prove individually first before pool them...or you would
have to design ways to control for the off target effects...
【在 o**4 的大作中提到】
: 我也不确定那个比较有效果，所以我想同时加进去，会不会效果更好点?
: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus？
: 谢谢
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v***a
发帖数: 1242 | 5 弱弱地问一下，一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects？
【在 n********k 的大作中提到】
: u would have to prove individually first before pool them...or you would
: have to design ways to control for the off target effects...
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r***e
发帖数: 2539 | 6 叠加效应不知道，但是能同时感染没问题。
【在 o**4 的大作中提到】
: O(∩_∩)O谢谢，
: 也就是说会有叠加效应是吧？
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w***a
发帖数: 4361 | 7 换几种不同的siRNA against同一个target，
然后看phenotype是否一致？
其实任何siRNA或多或少都有off target effect，特别是siRNA浓度大的时候。
【在 v***a 的大作中提到】
: 弱弱地问一下，一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects？
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n********k
发帖数: 2818 | 8 Rescue experiment...
【在 w***a 的大作中提到】
: 换几种不同的siRNA against同一个target，
: 然后看phenotype是否一致？
: 其实任何siRNA或多或少都有off target effect，特别是siRNA浓度大的时候。
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c******r
发帖数: 3778 | 9 不确定就分开三个试试好了，混一起有几个问题：
1. 增加了off target的机会。
2. 发paper的时候，如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。
3. 混一起，如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差，那么会有很多cell只感
染一个，两个的。你最后的phenotype就会比较moderate，以后的实验就比较麻烦。
这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment，其实
倒是无所谓，混着就混着用好了。
【在 o**4 的大作中提到】
: 我也不确定那个比较有效果，所以我想同时加进去，会不会效果更好点?
: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus？
: 谢谢
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o**4
发帖数: 35028 | 10 其实都是同一个基因的设计的3哥不同的lentivirus啊，
如果哪个基因有表型，我再分开分析就可以了吧？
【在 c******r 的大作中提到】
: 不确定就分开三个试试好了，混一起有几个问题：
: 1. 增加了off target的机会。
: 2. 发paper的时候，如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。
: 3. 混一起，如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差，那么会有很多cell只感
: 染一个，两个的。你最后的phenotype就会比较moderate，以后的实验就比较麻烦。
: 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment，其实
: 倒是无所谓，混着就混着用好了。
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s**********r
发帖数: 1120 | 11 难道不是细胞被一个病毒感染后会“关闭”自己，其他病毒不容易再感染了吗？
【在 r***e 的大作中提到】
: 会。
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r***e
发帖数: 2539 | 12 我以前也听说过这个，但是事实证明细胞能被反复感染的。
【在 s**********r 的大作中提到】
: 难道不是细胞被一个病毒感染后会“关闭”自己，其他病毒不容易再感染了吗？
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v***a
发帖数: 1242 | 13 为啥混在一起会增加off target？我以前听说的是（我只做过siRNA）混在一起反而降
低了off target effect。
【在 c******r 的大作中提到】
: 不确定就分开三个试试好了，混一起有几个问题：
: 1. 增加了off target的机会。
: 2. 发paper的时候，如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。
: 3. 混一起，如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差，那么会有很多cell只感
: 染一个，两个的。你最后的phenotype就会比较moderate，以后的实验就比较麻烦。
: 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment，其实
: 倒是无所谓，混着就混着用好了。
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