求教 invitro transcription - Biology版

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Biology版 - 求教 invitro transcription

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b**e
发帖数: 120

投稿review回来有一个问题需要做invitro transcription，检测一个特定蛋白对
transcription的影响，但是invitro体系中transcription用的不是SP6或者T7这些改造
过没有保真性的酶，而是RNA polymerase II，如果不用同位素的话，还有什么手段可
以检测不至于敏感度不够高？用RT PCR，模板DNA太多，消化不完全，negative
control都是阳性结果。。。。

w******e
发帖数: 1187

this should be an easier problem to solve bah? DNAse+acid phenol, repeat
a few times?

【在 b**e 的大作中提到】

: 投稿review回来有一个问题需要做invitro transcription，检测一个特定蛋白对
: transcription的影响，但是invitro体系中transcription用的不是SP6或者T7这些改造
: 过没有保真性的酶，而是RNA polymerase II，如果不用同位素的话，还有什么手段可
: 以检测不至于敏感度不够高？用RT PCR，模板DNA太多，消化不完全，negative
: control都是阳性结果。。。。

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