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Biology版 - 求助: 怎么溶丙酮沉淀的蛋白?
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j*******8
发帖数: 933
1
在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!
j*******8
发帖数: 933
2
come on, guys! give me a hand!
e****s
发帖数: 1125
3
不能在沉淀以前测浓度?
然后沉淀,用SB溶解。

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

j*******8
发帖数: 933
4
沉淀前太稀了。 其实有人用不加秀芬兰的SB溶蛋白, 然后测浓度, 然后再泡脚。 不
过我不喜欢。
s********n
发帖数: 2939
5
你可以试试加SDS溶解,但具体的浓度你得参照你的蛋白测定方法所能忍受的SDS浓度范
围。
l*********s
发帖数: 5409
6
you can stain your gel to get quantification.

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

l*********s
发帖数: 5409
7
you can stain your gel to get quantification.

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

s******y
发帖数: 28562
8
8M urea

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

j*******8
发帖数: 933
9
谢各位热心回答!
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