p******i 发帖数: 1092 | 1 我把TLR4 cDNA (2.6kb)从macrophage里PCR出来,加上XhoI和BamHI,接到
pEGFP-N1里,测序结果也是正确的,就是TLR4后面接了个in frame fusion的EGFP
但问题是transfect到293T里不亮,而空载体pEGFP-N1很亮……
我现在怀疑是kozak不够强,准备在ATG前面加一个
GCCACCATGGXX,不知道会不会有帮助……
哪位做过类似的实验,请不吝赐教啊,
在下先谢过了…… | i**********a 发帖数: 1402 | | m***c 发帖数: 637 | 3 i did a 3kb cdna-GFP fusion protein, signal is very weak, it may hide the
green color | C*******e 发帖数: 4348 | 4 加linker了么?
会不会后面EGFP没折叠好
做了别的实验验证的确有EGFP fusion protein表达么? |
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