如何让蛋白secretion到media里？ - Biology版

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 如何让蛋白secretion到media里？

相关主题
● Re: Flag-tagged protein	● 求助: 推荐一个买human tissue lysate的公司
● 做荧光的tetramer	● 板上有没有人用pichia做蛋白表达的？
● 请教一个在hela细胞中表达外源蛋白的问题	● 请问一个 SDS-PAGE 的奇怪问题
● 请教重组细胞表达外源基因问题	● 在美国怎么邮寄－８０度保存的细胞呀？
● Re: cross-link	● 请问Co-IP with FLAG tagged proteins
● Re: degraded protein?	● 做2D-Gel+MALDI-TOF的公司或者facility?
● [合集] 最近碰到的几个生化问题	● 请问2倍的差异可以用western监测么？
● P1 transduction紧急求助。	● 问个实验问题

相关话题的讨论汇总
话题: media话题: lysate话题: secretion话题: 蛋白话题: 如何

进入Biology版参与讨论

(共1页)

p******i
发帖数: 1092

我试着在protein前面加了pFLAG-CMV-1的preprotrypsin leader sequence,
protein后面有6HIS tag.
transfect 到293T 里后，收media和lysate
直接跑western:lysate里面看到了，但是Media里没看到
Purify by Ni column,lysate和media里都没看到……
想请问一下大家如果想让蛋白分泌到media里，是如何做到的？

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 问个实验问题	● Re: cross-link
● 向大家请教一个百思不得其解的抗体问题	● Re: degraded protein?
● 有没有方法按蛋白大小粗分细胞Lysate组分？	● [合集] 最近碰到的几个生化问题
● 关于小鼠组织内源蛋白western的问题	● P1 transduction紧急求助。
● Re: Flag-tagged protein	● 求助: 推荐一个买human tissue lysate的公司
● 做荧光的tetramer	● 板上有没有人用pichia做蛋白表达的？
● 请教一个在hela细胞中表达外源蛋白的问题	● 请问一个 SDS-PAGE 的奇怪问题
● 请教重组细胞表达外源基因问题	● 在美国怎么邮寄－８０度保存的细胞呀？

相关话题的讨论汇总
话题: media话题: lysate话题: secretion话题: 蛋白话题: 如何

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

boards

未名新帖统计// 7月16日

历史上的今天