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Biology版 - 关于inclusion body
相关主题
Question again, protein expression/rossetta gami/inclusion body/cell lysisRe: crucial problems in Chromatin IP? HELP!!
问个IPTG诱导蛋白表达问题请教大家是怎么去除protein里混含的genomic DNA的?
6xHis-Tag融合蛋白不吸附Ni柱,求建议.做蛋白和解结构的比较容易解答我的问题紧急求助, Chip sample shear得不够,可以在dilution buffer里补么?
☆有人用过Bugbuster Master Mix裂解大肠杆菌提蛋白吗?刚刚试做ChIP,请专家帮忙看看问题
什么东西可以替代SONICATOR呢?大侠们做chip是用sonicator还是用MNase digest?
请教在IPTG induction了以后怎么检测蛋白最好?请做Chip-seq的大侠 看下size,
请ChIP专家帮我看看sonicating的问题ChIP之前有没有其他代替sonication的方法去 shear chromatin?
Re: 超声波裂解E.coli细胞求救!CO IP的一些问题! 大神们进呀!
相关话题的讨论汇总
话题: inclusion话题: 蛋白话题: sonication话题: body话题: gst
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n***w
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趁着版上好几个问蛋白表达的问题,我也来凑个热闹,
新近表达一个蛋白,连上GST差不多116kD,昨天小试了一下,按照supernatant,
pellet的顺序,跑胶然后用gelcode
染,貌似大部分蛋白都是在pellet。
我不确定是不是真出现inclusion body了。
我没有在sonication前后留样品,所以我没法知道是不是因为sonication的缘故。
遇到过这种情况的给支支招。谢谢。
s********n
发帖数: 2939
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感觉是sonication的可能性很小,如果不放心你可以试试用detergent和lysozyme
lysis (BugBuster)。估计你的蛋白大部分是inclusion boday,GST增加fusion蛋白可
溶性的程度非常有限。
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CO IP的一些问题! 大神们进呀!什么东西可以替代SONICATOR呢?
Re: GST fusion protein-Thanks, buddy, but you guys misunderstood请教在IPTG induction了以后怎么检测蛋白最好?
Re: 请教:GST fusion protein请ChIP专家帮我看看sonicating的问题
Re: question on E coli protein expressionRe: 超声波裂解E.coli细胞求救!
Question again, protein expression/rossetta gami/inclusion body/cell lysisRe: crucial problems in Chromatin IP? HELP!!
问个IPTG诱导蛋白表达问题请教大家是怎么去除protein里混含的genomic DNA的?
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