V***b
发帖数: 3419 | 1 买的抗体不能用的比例太高了。我在Abcam前后买了5个抗体，都不能用；打电话，全退
了。转到Santa Cruz，买了其中2个，今天一试，还是垃圾。这两个公司抗体多而全，
质量不行啊，人心大大的坏了。Cell Signaling就好很多，没有把太多垃圾放到市场上
，90%可用。奉劝大家远离这两个公司，耽误不起时间。
顺便问一下，谁知道好用的Nrf1, Nrf2的抗体，都是转录因子，还有PI3K P85 gamma的
抗体？ |
c*********y
发帖数: 1952 | 2 公司摊子大了，质量控制就越来越差了。
听说他们好些抗体都是小公司放他们这儿卖的。
Abcam还特贼，有那么几个人comment说好用的抗体，立马涨价几十刀。
【在 V***b 的大作中提到】
: 买的抗体不能用的比例太高了。我在Abcam前后买了5个抗体，都不能用；打电话，全退
: 了。转到Santa Cruz，买了其中2个，今天一试，还是垃圾。这两个公司抗体多而全，
: 质量不行啊，人心大大的坏了。Cell Signaling就好很多，没有把太多垃圾放到市场上
: ，90%可用。奉劝大家远离这两个公司，耽误不起时间。
: 顺便问一下，谁知道好用的Nrf1, Nrf2的抗体，都是转录因子，还有PI3K P85 gamma的
: 抗体？
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s******y
发帖数: 28562 | 3 Santa Cruz 还好啦，关键是便宜，而且不能用的话还随便给你退换，
适合于那种有闲心的实验室用。
有些公司更可恶，不干活的东西也不给你换。
【在 V***b 的大作中提到】
: 买的抗体不能用的比例太高了。我在Abcam前后买了5个抗体，都不能用；打电话，全退
: 了。转到Santa Cruz，买了其中2个，今天一试，还是垃圾。这两个公司抗体多而全，
: 质量不行啊，人心大大的坏了。Cell Signaling就好很多，没有把太多垃圾放到市场上
: ，90%可用。奉劝大家远离这两个公司，耽误不起时间。
: 顺便问一下，谁知道好用的Nrf1, Nrf2的抗体，都是转录因子，还有PI3K P85 gamma的
: 抗体？
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s*********t
发帖数: 600 | 4 Nrf1 2还是推荐abcam
我用过他家做ChIP的 非常好用 |
B*****e
发帖数: 1005 | 5 Abcam的抗体不稳定，第一次用一个磷酸化的抗体做ChIP结果很好，再用一批和IgG没区
别， |
A******y
发帖数: 2041 | 6 You need to know which ab is the best and from which company. I like Santa
Cruz ones because if you fine a working one, you can run so many assays with
it. |
c*********y
发帖数: 1952 | 7 便宜，量又足
【在 s******y 的大作中提到】
: Santa Cruz 还好啦，关键是便宜，而且不能用的话还随便给你退换，
: 适合于那种有闲心的实验室用。
: 有些公司更可恶，不干活的东西也不给你换。
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c********r
发帖数: 1125 | 8 Santa cruz 就是这样的。。不好使。。
但是服务态度好，便宜。 |
s******y
发帖数: 28562 | 9 对，经常每次都给足足一毫升，用个两三年都用不完。
不像某些公司，才给几十微升
【在 c*********y 的大作中提到】
: 便宜，量又足
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B*****e
发帖数: 1005 | 10 你是在说abcam吧，不超过100ug每次
【在 s******y 的大作中提到】
: 对，经常每次都给足足一毫升，用个两三年都用不完。
: 不像某些公司，才给几十微升
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s******y
发帖数: 28562 | 11 哈哈。就是说他们。
【在 B*****e 的大作中提到】
: 你是在说abcam吧，不超过100ug每次
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V***b
发帖数: 3419 | 12 你用Abcam哪个抗体，能把cat#告知一下吗？你确信chip下来的是特异结合的吗？他们
家的抗体很脏啊。我发现有时即使有IgG control也不行，最好是同一只兔子的
preimmune serum或者IgG。
这些公司现在用的immunogen都是peptides，应用性很窄，不好用很正常，但这质控也
太恶心了。我还用过Abcam的perforin抗体，Foxp3抗体，都不好用。真耽误时间。
谢谢了。
【在 s*********t 的大作中提到】
: Nrf1 2还是推荐abcam
: 我用过他家做ChIP的 非常好用
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s*********t
发帖数: 600 | 13 Nrf1：ab34682
Nrf2 一时找不到了 ，呵呵。
还行吧，有RNAi的做对照哦。
【在 V***b 的大作中提到】
: 你用Abcam哪个抗体，能把cat#告知一下吗？你确信chip下来的是特异结合的吗？他们
: 家的抗体很脏啊。我发现有时即使有IgG control也不行，最好是同一只兔子的
: preimmune serum或者IgG。
: 这些公司现在用的immunogen都是peptides，应用性很窄，不好用很正常，但这质控也
: 太恶心了。我还用过Abcam的perforin抗体，Foxp3抗体，都不好用。真耽误时间。
: 谢谢了。
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V***b
发帖数: 3419 | 14 拜托找找，下周要和老板碰头了，他估计没心思听我和公司玩猫捉老鼠的游戏。谢谢。
【在 s*********t 的大作中提到】
: Nrf1：ab34682
: Nrf2 一时找不到了 ，呵呵。
: 还行吧，有RNAi的做对照哦。
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V***b
发帖数: 3419 | 15 完了，心彻底凉了，你这个Nrf1是nuclear respiratory factor 1，我说的Nrf1是
Nuclear factor erythroid 2-related factor 1，都是转录因子，但不是一个东西。
Nrf2应该是一样的。最后一棵稻草。
【在 s*********t 的大作中提到】
: Nrf1：ab34682
: Nrf2 一时找不到了 ，呵呵。
: 还行吧，有RNAi的做对照哦。
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w**********i
发帖数: 62 | 16 用的santa cruz的，特异性和可重复性是要命，不过也能做出来。
呵呵，你在做什么方面啊，可以站内交流一下。 |
q*****n
发帖数: 331 | 17 Try R&D systems:
http://www.rndsystems.com/pdf/MAB5306.pdf
http://www.rndsystems.com/pdf/MAB3925.pdf
http://www.rndsystems.com/pdf/AF5734.pdf
Their antibodies are relatively expensive, but high quality.
If they have insert figures showing working in natural samples, that means
they have been validated internally. |
g****1
发帖数: 36 | 18 关于 nrf2 抗体，请比较一下 R&D的和 abcam的 ，
R&D:A specific band was detected for Nrf2 at approximately 70 kDa (as
indicated).
ABCAM:http://www.abcam.com/index.html?pageconfig=reviews&intAbreviewID=18972&intAbID=62352
a specific band was detected more than 100kd,
这到底怎么回事呢？谢谢
【在 q*****n 的大作中提到】
: Try R&D systems:
: http://www.rndsystems.com/pdf/MAB5306.pdf
: http://www.rndsystems.com/pdf/MAB3925.pdf
: http://www.rndsystems.com/pdf/AF5734.pdf
: Their antibodies are relatively expensive, but high quality.
: If they have insert figures showing working in natural samples, that means
: they have been validated internally.
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c*z
发帖数: 157 | 19 cell signaling 和 protein tech group算是口碑比较好
以前带我干活的postdoc跟我传授的经验 叫我优先选这两家的 尽量避开SC
结果那次订10个抗体，有两个偏偏只有SC家有，那两个买来还偏偏都不work
我在想会不会是因为某些抗体就是比较难出好的 一些质量比较好的公司做不出好的就
不上市
然后只有这些so so的公司做出一些so so 的东西拿出来卖？
【在 V***b 的大作中提到】
: 拜托找找，下周要和老板碰头了，他估计没心思听我和公司玩猫捉老鼠的游戏。谢谢。
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V***b
发帖数: 3419 | 20 真是好人。我明天就买来试试。
【在 q*****n 的大作中提到】
: Try R&D systems:
: http://www.rndsystems.com/pdf/MAB5306.pdf
: http://www.rndsystems.com/pdf/MAB3925.pdf
: http://www.rndsystems.com/pdf/AF5734.pdf
: Their antibodies are relatively expensive, but high quality.
: If they have insert figures showing working in natural samples, that means
: they have been validated internally.
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V***b
发帖数: 3419 | 21 Abcam和Santa Cruz一个蛋白往往有好几个抗体，分子量还都不一样，我猜想他们有些
validation是用不同的recombinant protein的不同的domain做的。
【在 g****1 的大作中提到】
: 关于 nrf2 抗体，请比较一下 R&D的和 abcam的 ，
: R&D:A specific band was detected for Nrf2 at approximately 70 kDa (as
: indicated).
: ABCAM:http://www.abcam.com/index.html?pageconfig=reviews&intAbreviewID=18972&intAbID=62352
: a specific band was detected more than 100kd,
: 这到底怎么回事呢？谢谢
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V***b
发帖数: 3419 | 22 这些名声不好的公司卖一个赚一个。我猜想卖出去的不工作的抗体大部分不会有人要求
退钱的，毕竟花的经费不是自己腰包里的钱。我偏要打电话退钱。一是钱也不少，一个
抗体$350，二是很愤怒。
【在 c*z 的大作中提到】
: cell signaling 和 protein tech group算是口碑比较好
: 以前带我干活的postdoc跟我传授的经验 叫我优先选这两家的 尽量避开SC
: 结果那次订10个抗体，有两个偏偏只有SC家有，那两个买来还偏偏都不work
: 我在想会不会是因为某些抗体就是比较难出好的 一些质量比较好的公司做不出好的就
: 不上市
: 然后只有这些so so的公司做出一些so so 的东西拿出来卖？
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V***b
发帖数: 3419 | 23 还有一种可能性是一个蛋白，比如Nrf1有好几种isoform，每种分子量都不一样。不同
物种，人和老鼠的也不一样。再有就是乌龙，80kd的带白，在40kd有个带，质控的人也
不懂生物，就是它了。
【在 g****1 的大作中提到】
: 关于 nrf2 抗体，请比较一下 R&D的和 abcam的 ，
: R&D:A specific band was detected for Nrf2 at approximately 70 kDa (as
: indicated).
: ABCAM:http://www.abcam.com/index.html?pageconfig=reviews&intAbreviewID=18972&intAbID=62352
: a specific band was detected more than 100kd,
: 这到底怎么回事呢？谢谢
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c*z
发帖数: 157 | 24 你说的Nrf1是neuro fiber1吗？
我当时也是玩NF1 的WB时中招的
还有，SC的东西1：200WB 4度存储 当时就觉得有点奇怪
【在 V***b 的大作中提到】
: 还有一种可能性是一个蛋白，比如Nrf1有好几种isoform，每种分子量都不一样。不同
: 物种，人和老鼠的也不一样。再有就是乌龙，80kd的带白，在40kd有个带，质控的人也
: 不懂生物，就是它了。
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q*****n
发帖数: 331 | 25 Based on Swiss-Prot:
http://www.uniprot.org/uniprot/Q60795
mouse Nrf2 calculated M.W is 67kDa
http://www.uniprot.org/uniprot/Q16236
human Nrf2 calculated M.W is 68kDa or 66kDa (two isoforms).
Now you know which company's antibody is right.
【在 g****1 的大作中提到】
: 关于 nrf2 抗体，请比较一下 R&D的和 abcam的 ，
: R&D:A specific band was detected for Nrf2 at approximately 70 kDa (as
: indicated).
: ABCAM:http://www.abcam.com/index.html?pageconfig=reviews&intAbreviewID=18972&intAbID=62352
: a specific band was detected more than 100kd,
: 这到底怎么回事呢？谢谢
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V***b
发帖数: 3419 | 26 Nuclear factor erythroid 2-related factor 1。不是啥流行蛋白，找个抗体都困难。然后mRNA有好几种variant，在蛋白层面有好几种isoform，功能明晰的好像是最大的那个，头疼。
4度存储还好了，抗体结构稳定，不爱坏。
【在 c*z 的大作中提到】
: 你说的Nrf1是neuro fiber1吗？
: 我当时也是玩NF1 的WB时中招的
: 还有，SC的东西1：200WB 4度存储 当时就觉得有点奇怪
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q*****n
发帖数: 331 | 27 I still remember about 5 years ago, Abcam had some promotion going on. I
guess that's the time when they first started. If you purchased their
antibodies and write reviews about the working conditions, and it is better
with Western blot images or confocal images, they will give you $30 each
antibody you evaluated. I earned $120 for doing that.
Of course, they do not accept any negative evaluation on their product.
So my guess is that the customer has to do the validation themselves. |
l*******r
发帖数: 39279 | 28 原来奸商到处是
【在 c*********y 的大作中提到】
: 公司摊子大了，质量控制就越来越差了。
: 听说他们好些抗体都是小公司放他们这儿卖的。
: Abcam还特贼，有那么几个人comment说好用的抗体，立马涨价几十刀。
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T*****n
发帖数: 274 | 29 sigh,同被Santa Cruz蹂躏过。网页上给的band漂亮的不得了，实际做出来
脏的一塌糊涂，目标条带根本找不到。浪费了一个多月时间。
lab里有人推荐Bethyl，有人用过他们家产品么？
【在 V***b 的大作中提到】
: 买的抗体不能用的比例太高了。我在Abcam前后买了5个抗体，都不能用；打电话，全退
: 了。转到Santa Cruz，买了其中2个，今天一试，还是垃圾。这两个公司抗体多而全，
: 质量不行啊，人心大大的坏了。Cell Signaling就好很多，没有把太多垃圾放到市场上
: ，90%可用。奉劝大家远离这两个公司，耽误不起时间。
: 顺便问一下，谁知道好用的Nrf1, Nrf2的抗体，都是转录因子，还有PI3K P85 gamma的
: 抗体？
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h*******o
发帖数: 4884 | 30 Abcam几年前还勉强可以
最近2年明显有Santa Cruz化的趋势，而且经常缺斤少两。100ul的抗体，我aliquot只
有80多一点
我现在是只要其他口碑还不错的公司有的抗体，坚决不从Abcam和Santa Cruz买 |
