A******d
发帖数: 571 | 1 从-80度把肝脏组织拿出来，要量30毫克出来qPCR,怕RNAse,但是在干冰上切割难度很大
，在室温下经常切好了组织差不多化冻了。有没有什么高招？ |
f******9
发帖数: 39 | |
A******d
发帖数: 571 | 3 谢谢，看到过这个。不过俺们实验室已经都大规模屠杀好老鼠了，已经晚了 |
m*********n
发帖数: 215 | 4 金属板铺在干冰上，然后把tissue放在上面，用dental drill前面连上那种旋转的刀片
切割。切两秒然后就把刀片放在干冰上cool down,然后再切，这样子tissue可以一直保
持冰冻状态。。。俺们就是这么干的。。。然后提rna，质量非常好。。
不过话说楼主。。。你们是肝脏组织啊。。。大可以fresh的时候称量分装后再-80的。
。。 |
K******S
发帖数: 10109 | 5 找个STAINLESS STEEL的板子（比如BIOPULVERIZER），用液氮或者干冰冻好后可以维持
低温很久
【在 A******d 的大作中提到】
: 从-80度把肝脏组织拿出来，要量30毫克出来qPCR,怕RNAse,但是在干冰上切割难度很大
: ，在室温下经常切好了组织差不多化冻了。有没有什么高招？
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s******y
发帖数: 28562 | 6 嗯，又学到一手
【在 m*********n 的大作中提到】
: 金属板铺在干冰上，然后把tissue放在上面，用dental drill前面连上那种旋转的刀片
: 切割。切两秒然后就把刀片放在干冰上cool down,然后再切，这样子tissue可以一直保
: 持冰冻状态。。。俺们就是这么干的。。。然后提rna，质量非常好。。
: 不过话说楼主。。。你们是肝脏组织啊。。。大可以fresh的时候称量分装后再-80的。
: 。。
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a*********f
发帖数: 101 | 7 把肝脏用铝箔纸包严实，丢到液氮里面，冻几十秒，然后拿出来，砸一锤子，组织就碎
了。
【在 A******d 的大作中提到】
: 从-80度把肝脏组织拿出来，要量30毫克出来qPCR,怕RNAse,但是在干冰上切割难度很大
: ，在室温下经常切好了组织差不多化冻了。有没有什么高招？
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A******d
发帖数: 571 | 8 太强大了，膜拜
【在 a*********f 的大作中提到】
: 把肝脏用铝箔纸包严实，丢到液氮里面，冻几十秒，然后拿出来，砸一锤子，组织就碎
: 了。
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A******d
发帖数: 571 | 9 俺们真的是很简陋，没有牙医钻子，连金属板我都要好好想想有没有。
老鼠太多了，一时没来得及分装。50只老鼠算多吗？可能我又孤陋寡闻，贻笑大方 了
还想问问，你们解剖老鼠之前有没有infiltrate with saline to remove blood?
我们实验室试过，但是太慢了，也否决了。
总之我们就是很野蛮的解剖。我觉得蛋白质可能还好，rna就有些讲解了
【在 m*********n 的大作中提到】
: 金属板铺在干冰上，然后把tissue放在上面，用dental drill前面连上那种旋转的刀片
: 切割。切两秒然后就把刀片放在干冰上cool down,然后再切，这样子tissue可以一直保
: 持冰冻状态。。。俺们就是这么干的。。。然后提rna，质量非常好。。
: 不过话说楼主。。。你们是肝脏组织啊。。。大可以fresh的时候称量分装后再-80的。
: 。。
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m*********n
发帖数: 215 | 10 我们不是做肝脏组织的。比你这个麻烦多了。你们用多大的老鼠啊？perfuse也不麻烦
啊。你的tissue是flash frozen的，RNA降解不降解跟有没有blood没关系吧。没有金属
板，直接放干冰上也可以呀！
【在 A******d 的大作中提到】
: 俺们真的是很简陋，没有牙医钻子，连金属板我都要好好想想有没有。
: 老鼠太多了，一时没来得及分装。50只老鼠算多吗？可能我又孤陋寡闻，贻笑大方 了
: 还想问问，你们解剖老鼠之前有没有infiltrate with saline to remove blood?
: 我们实验室试过，但是太慢了，也否决了。
: 总之我们就是很野蛮的解剖。我觉得蛋白质可能还好，rna就有些讲解了
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y**u
发帖数: 7459 | 11 我就这么干的。很多时候不用砸，自己就裂成几块了。
【在 a*********f 的大作中提到】
: 把肝脏用铝箔纸包严实，丢到液氮里面，冻几十秒，然后拿出来，砸一锤子，组织就碎
: 了。
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A******d
发帖数: 571 | 12 小鼠
perfuse是怕血液污染
直接干冰不会疙疙瘩瘩，不稳当吗？
【在 m*********n 的大作中提到】
: 我们不是做肝脏组织的。比你这个麻烦多了。你们用多大的老鼠啊？perfuse也不麻烦
: 啊。你的tissue是flash frozen的，RNA降解不降解跟有没有blood没关系吧。没有金属
: 板，直接放干冰上也可以呀！
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