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Biology版 - 怎么能把DNA3'端的ddNTP去掉呢?
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m**i
发帖数: 47
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请教大家,我用ddNTP让DNA replication停止了之后,想把ddNTP去掉,然后让DNA继续
复制。我本来想用pfu来做,因为它有3'-5' exonuclease activity,结果发现切不掉那
个ddNTP。大家有没有什么建议呀?多谢多谢。
z*********8
发帖数: 1203
2
能不能用那个poxvirus DNA polymerase啊,那个也有3-5 exonuclease而且能对ds
dna专门作用,那个clonetech的infusion dry down cloning kit就是利用这个达到
seamless cloning的。你看看吧,我们可以继续讨论。
m**i
发帖数: 47
3
谢谢你的建议。我没有找到文献说这个poxvirus DNA polymerase能chop ddNTP。我目
前的困扰就是好几种DNA polymerase都有3-5 exonuclease,能chop mismatch,但是
不能chop ddNTP.可能ddNTP 和dNTP太像了,不能被识别。
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