l********s
发帖数: 70 | 1 最近做RNA从plate中提取，发现RNA测试有机溶剂那个参数很低，0.3-0.6 。 其实最后
我尽量把乙醇抽吸干净。我怀疑是不是DEPC水有问题，因为我统一吧RNA dilute 到
100ng/ul 做反转，发现dilute后，那个比值更低了。。。
当然Nanodrop 的control 用的是DEPC，这个不会搞错。。
不知道为啥，怎么提高这个比值？ 另外这个如果低多大程度影响反转？ |
z*t
发帖数: 863 | 2 RNA怎么沉淀？异丙醇沉淀可能会造成盐浓度过高，可以换2倍体积乙醇
230高是混了酚类和盐。理论上70%乙醇洗可以降低盐类污染
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近做RNA从plate中提取，发现RNA测试有机溶剂那个参数很低，0.3-0.6 。 其实最后
: 我尽量把乙醇抽吸干净。我怀疑是不是DEPC水有问题，因为我统一吧RNA dilute 到
: 100ng/ul 做反转，发现dilute后，那个比值更低了。。。
: 当然Nanodrop 的control 用的是DEPC，这个不会搞错。。
: 不知道为啥，怎么提高这个比值？ 另外这个如果低多大程度影响反转？
|
g********0
发帖数: 6201 | 3 我当初测２6０／２8０时无论怎么努力改善提取，更换溶解RNA的buffer，值就是偏
低。后来我想了一个终级方法解决了这个问题，就是－－－－－－不测了，直接用２6
０算浓度就行了，反正我用这种RNA从来没出过问题。 |
f*******e
发帖数: 628 | 4 用过 DEPC 水，没问题的，除非没有处理好。
还是提纯时候有机溶剂没除干净吧？ |
l********s
发帖数: 70 | 5 可能找到原因了，确实是DEPC水出的问题。 谢谢楼上兄弟。我索性用水稀释算了，反
正马上反转 |
s******s
发帖数: 13035 | 6 去买点nuclease free的water吧，回来分装一大堆，反正一直会有用
【在 l********s 的大作中提到】
: 可能找到原因了，确实是DEPC水出的问题。 谢谢楼上兄弟。我索性用水稀释算了，反
: 正马上反转
|
