磷酸化蛋白的WESTERN BLOT问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 磷酸化蛋白的WESTERN BLOT问题

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相关话题的讨论汇总
话题: western话题: p65话题: 磷酸化话题: blot话题: p44

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m******g 发帖数: 69	1 我做了2组磷酸化蛋白的Western,第二次是在第一次strip之后做的，但是第二次出现了许多带，我第一次做的是p-p44，结果第二次做的是p-p65，但是我很明确的肯定我第二次做的p-p65上出现了p-p44的band,而且我的p-p65 band被强烈干扰了，很难找到。我是用0.2M NaOH 洗3次膜，然后重新block做的，我想第一次的antibody根本没有下去，而且我的抗体都是cell signal的，二抗都需要用rabbit，是不是这个原因，有没有好的办法可以strip掉第一次的抗体。
c**********e 发帖数: 230	2 给你推荐一个是buffer, 还算干净, 偶尔有残余的, 看你的抗体了. http://www.gmbiosciences.com/products_OneMinute.htm
k******0 发帖数: 1073	3 很难去除。我一般不重复WB，而是多跑块胶。

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