w*****a
发帖数: 437 | 1 如何把很小的sample快速打散啊？vortex不太行，pipetting一个sample要耗掉5分钟，
可是一次都提很多呢
大牛们都是肿么做的？拜谢 （sorry 没包子though) |
s******e
发帖数: 370 | 2 glass homogenizer?
not sure how small your samples are... |
w*****a
发帖数: 437 | 3 谢谢回答，10天鼠胚胎的小心脏，可能不够塞homogenizer的牙缝~~ |
m******5
发帖数: 1383 | 4 一只？还是好几个pull到一起？
你们现在用的是什么方法？我如果是做microarray的做法是快速超声一下
【在 w*****a 的大作中提到】
: 谢谢回答，10天鼠胚胎的小心脏，可能不够塞homogenizer的牙缝~~
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b****r
发帖数: 38 | |
w*****a
发帖数: 437 | |
w*****a
发帖数: 437 | 7 半只，只有心室。。
现在就pipetting啊，累啊所以问牛同学们~~谢谢建议
【在 m******5 的大作中提到】
: 一只？还是好几个pull到一起？
: 你们现在用的是什么方法？我如果是做microarray的做法是快速超声一下
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b*******n
发帖数: 8420 | |
m******5
发帖数: 1383 | 9 问个题外话，不能几个pull到一起吗？
【在 w*****a 的大作中提到】
: 半只，只有心室。。
: 现在就pipetting啊，累啊所以问牛同学们~~谢谢建议
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i***l
发帖数: 1656 | 10 不新鲜
这东西还有电动的呢
【在 w*****a 的大作中提到】
: 谢谢~呵呵，这东东还真第一次见，有意思~
: 嗯，强大
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a******7
发帖数: 7936 | |
w*****a
发帖数: 437 | 12 呵呵，不能。每只都有可能是不同的genotype：－）
【在 m******5 的大作中提到】
: 问个题外话，不能几个pull到一起吗？
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B*M
发帖数: 1418 | 13 use the blue plastic pestles then.
http://www.bio-world.com/productinfo/4_71_556_723/120889/Pestle
【在 w*****a 的大作中提到】
: 如何把很小的sample快速打散啊？vortex不太行，pipetting一个sample要耗掉5分钟，
: 可是一次都提很多呢
: 大牛们都是肿么做的？拜谢 （sorry 没包子though)
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m******5
发帖数: 1383 | 14 我就是这个意思，不能用RNA later存着，等genotyping结果出来把genotype一样的
Pull到一起么？
【在 w*****a 的大作中提到】
: 呵呵，不能。每只都有可能是不同的genotype：－）
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l**********1
发帖数: 5204 | 15 if individual SNP screening, that is impossible?
【在 m******5 的大作中提到】
: 我就是这个意思，不能用RNA later存着，等genotyping结果出来把genotype一样的
: Pull到一起么？
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m******5
发帖数: 1383 | 16 i see!
【在 l**********1 的大作中提到】
: if individual SNP screening, that is impossible?
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m******5
发帖数: 1383 | 17 thanks !
【在 l**********1 的大作中提到】
: if individual SNP screening, that is impossible?
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s******e
发帖数: 370 | 18 好像说到快速genotyping上来了
我们现在基本可以在2个小时做出genotyping，有一种enzyme可以15分钟digest tissue
，然后用Kappa的fast PCR，30分钟作用完成PCR，再跑gel15分钟，不知道楼主敢不敢
等2小时再提RNA？
还有homogenizer最小的体积我用过1ml的，也许还有更小的尺寸。话说看tissue在homogenizer里面被粉碎是件很过瘾
的事…… |
w*****a
发帖数: 437 | 19 感兴趣这个快速typing的方法。我们现在该是最common的吧，5% PK O/N，然后
saturated NaCl，100% ETOH, 70% ETOH。Maintain 80笼老鼠typing到都快吐了。。
可以请教是什么enzyme? Kappa的fast PCR 也没用过，呵呵。。
tissue
homogenizer里面被粉碎是件很过瘾
【在 s******e 的大作中提到】
: 好像说到快速genotyping上来了
: 我们现在基本可以在2个小时做出genotyping，有一种enzyme可以15分钟digest tissue
: ，然后用Kappa的fast PCR，30分钟作用完成PCR，再跑gel15分钟，不知道楼主敢不敢
: 等2小时再提RNA？
: 还有homogenizer最小的体积我用过1ml的，也许还有更小的尺寸。话说看tissue在homogenizer里面被粉碎是件很过瘾
: 的事……
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s******e
发帖数: 370 | 20 Zymed 的prepgem
不过我个人喜欢用MGB＋proteinase K，55C 30 min 来digest 胚胎tissue，如果时间
不是特别紧张的话 |
h*******o
发帖数: 4884 | 21 我们实验室都是用得bead homogenizer来打碎组织的
根据组织不同用不同材料和大小的beads,和tissue一起放在trizol里面打 |
