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Biology版 - WB 转膜胶残留的问题
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Re: western blot问题15%和7%的acrylamide gels
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s******y
发帖数: 220
1
转膜后,在page 胶的顶部(分子量大的蛋白部分)总是残留在膜上,下部很快就能弄
下来。
为什么会这样呢?
跑得是biorad的4-20%梯度胶,
我要看的一个目标蛋白正好还在有胶残留的那块,会影响下游的WB结果吗? 用的那个
一抗本来就有点tricky,有这个残留的胶估计更讨厌了。
有什么办法能把膜弄得更加干净点吗?
谢谢。
C**S
发帖数: 522
2
过热了吧。用冷的transfer buffer和ice pack降温。

【在 s******y 的大作中提到】
: 转膜后,在page 胶的顶部(分子量大的蛋白部分)总是残留在膜上,下部很快就能弄
: 下来。
: 为什么会这样呢?
: 跑得是biorad的4-20%梯度胶,
: 我要看的一个目标蛋白正好还在有胶残留的那块,会影响下游的WB结果吗? 用的那个
: 一抗本来就有点tricky,有这个残留的胶估计更讨厌了。
: 有什么办法能把膜弄得更加干净点吗?
: 谢谢。

D******9
发帖数: 2665
3
transfer in cold room overnigh
n***w
发帖数: 2405
4
嗯。你转的时候电流多少?胶过期了吗?我用inviteogen的胶,有时最顶部会沾一点,
直接剪掉就可以了
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Can someone recommend a qPCR system求助,western 结果
乐子来看:生物学研究生的一个梦(zz) (转载)Re: 怎样调整gel,走好SDS-PAGE?
BME下的做医学检测光学仪器的方向怎么样Re: western blot问题
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