a*****v
发帖数: 128 | 1 如题
蛋白质溶于水溶液，但是药物只溶于Ethanol和DMSO， ACN。
然后我最低可以用50%ACN溶解该药物，
但是滴定到蛋白质溶液中立刻就沉淀了。
最终是要作蛋白质NMR，不能用有机溶剂让蛋白质变性阿。
而且该药物还是用于口服的药物，这是怎么起作用的呢？
碰到这种情况，大家怎么办呢？ |
s*******e
发帖数: 1010 | |
s****l
发帖数: 513 | 3 是一下1%的DMSO看能不能溶解你的化合物。1%DMSO一般不会让蛋白质变性。
口服药物是经过formulation的吧。
对了，你可以看一下人家弄成药物的时候是不是做成了盐形态。而你用的还是
hydrophobic的。
【在 a*****v 的大作中提到】
: 如题
: 蛋白质溶于水溶液，但是药物只溶于Ethanol和DMSO， ACN。
: 然后我最低可以用50%ACN溶解该药物，
: 但是滴定到蛋白质溶液中立刻就沉淀了。
: 最终是要作蛋白质NMR，不能用有机溶剂让蛋白质变性阿。
: 而且该药物还是用于口服的药物，这是怎么起作用的呢？
: 碰到这种情况，大家怎么办呢？
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s*****g
发帖数: 7857 | 4 口服药是要加辅助剂的.否则那么多中间药厂就要黄了.辅助剂可以是醇类,可以是...
去制剂版问问吧.
至于你的实验.可以采取楼上大侠的建议.
也用DMSO制备高浓度储备液,再用PBS或MEDIUM(处理细胞的培养液)制备第二储备液,把第二储备液放进MEDIUM步或水里达到你的最终浓度.(本人是这么做的)
【在 a*****v 的大作中提到】
: 如题
: 蛋白质溶于水溶液，但是药物只溶于Ethanol和DMSO， ACN。
: 然后我最低可以用50%ACN溶解该药物，
: 但是滴定到蛋白质溶液中立刻就沉淀了。
: 最终是要作蛋白质NMR，不能用有机溶剂让蛋白质变性阿。
: 而且该药物还是用于口服的药物，这是怎么起作用的呢？
: 碰到这种情况，大家怎么办呢？
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a*****v
发帖数: 128 | 5 有核磁的文章是用1%DMSO做蛋白质滴定的么？
这个破药物，就是一个咪唑环还能带点点，其他的根本没法成盐啊...
他们做细胞实验的时候也是用DMSO溶解的。
但是核磁，真的是希望完全溶解的...
文章中说的口服药是in a vehicle contained 33.3% Simple Syrup and 66.6% 0.1 M
citrate buffer.也没说syrup的配方，柠檬水也没说啥...
【在 s****l 的大作中提到】
: 是一下1%的DMSO看能不能溶解你的化合物。1%DMSO一般不会让蛋白质变性。
: 口服药物是经过formulation的吧。
: 对了，你可以看一下人家弄成药物的时候是不是做成了盐形态。而你用的还是
: hydrophobic的。
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a******c
发帖数: 597 | 6 这种不溶于水的药物，一般制成水包油的乳剂，可以和水良好混合，可以口服，也可以
制成包衣制剂，使药物在特定部位被吸收。
。
如果想要增加药物在水中直接的溶解度，可以加少量增溶剂，增溶剂一般具有去垢剂的
性质。 |
a******c
发帖数: 597 | 7 这种不溶于水的药物，一般制成水包油的乳剂，可以和水良好混合，可以口服，也可以
制成包衣制剂，使药物在特定部位被吸收。
。
如果想要增加药物在水中直接的溶解度，可以加少量增溶剂，增溶剂一般具有去垢剂的
性质。 |
a*****v
发帖数: 128 | 8 事实上蛋白质溶液中是有detergent的，DPC，但是还是不溶解啊
还有，我不是做细胞实验的，细胞实验中的确是用DMSO做的，这个基本已经是通用方法
了，但是做结构的还没见有人加有机溶剂的...
纯化这个膜蛋白头大啊，一个月才纯化那么一点...
【在 a******c 的大作中提到】
: 这种不溶于水的药物，一般制成水包油的乳剂，可以和水良好混合，可以口服，也可以
: 制成包衣制剂，使药物在特定部位被吸收。
: 。
: 如果想要增加药物在水中直接的溶解度，可以加少量增溶剂，增溶剂一般具有去垢剂的
: 性质。
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a*****v
发帖数: 128 | 9 我不是做细胞实验的啊...
细胞实验DMSO是常用方法...
把第二储备液放进MEDIUM步或水里达到你的最终浓度.(本人是这么做的)
【在 s*****g 的大作中提到】
: 口服药是要加辅助剂的.否则那么多中间药厂就要黄了.辅助剂可以是醇类,可以是...
: 去制剂版问问吧.
: 至于你的实验.可以采取楼上大侠的建议.
: 也用DMSO制备高浓度储备液,再用PBS或MEDIUM(处理细胞的培养液)制备第二储备液,把第二储备液放进MEDIUM步或水里达到你的最终浓度.(本人是这么做的)
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V**3
发帖数: 12756 | 10 做结构用DMSO也很正常，一般来说，最终DMSO含量低于5% 或者10% 不会导致变性（这
个需要试验）
另外你需要看一下滴到溶液中就沉淀了，沉淀的是光drug还是也有蛋白
【在 a*****v 的大作中提到】
: 事实上蛋白质溶液中是有detergent的，DPC，但是还是不溶解啊
: 还有，我不是做细胞实验的，细胞实验中的确是用DMSO做的，这个基本已经是通用方法
: 了，但是做结构的还没见有人加有机溶剂的...
: 纯化这个膜蛋白头大啊，一个月才纯化那么一点...
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a*****v
发帖数: 128 | 11 我现在没有蛋白质的溶液里面实验的，
光是用drug就这样了。
还没敢加蛋白呢，我的蛋白少啊,不管乱试
【在 V**3 的大作中提到】
: 做结构用DMSO也很正常，一般来说，最终DMSO含量低于5% 或者10% 不会导致变性（这
: 个需要试验）
: 另外你需要看一下滴到溶液中就沉淀了，沉淀的是光drug还是也有蛋白
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g*********r
发帖数: 2033 | 12 什么蛋白啊，能否结晶？
【在 a*****v 的大作中提到】
: 我现在没有蛋白质的溶液里面实验的，
: 光是用drug就这样了。
: 还没敢加蛋白呢，我的蛋白少啊,不管乱试
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a*****v
发帖数: 128 | 13 不能结晶，有很大的区域是IDP
这个对于x-ray基本就是噩梦，所以就只是做核磁了。
【在 g*********r 的大作中提到】
: 什么蛋白啊，能否结晶？
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d***e
发帖数: 1215 | 14 能不能降低浓度？应该有个很低很低的浓度不会沉淀出来的。如果非要高浓度，用PS80
吧。
【在 a*****v 的大作中提到】
: 我现在没有蛋白质的溶液里面实验的，
: 光是用drug就这样了。
: 还没敢加蛋白呢，我的蛋白少啊,不管乱试
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s********x
发帖数: 472 | 15 如果本来就不溶，其实你用溶解的那部分做实验就可以了，反正也是一个固相液相的平
衡，因此用饱和溶液做实验不是一样的么？你的sample又不代谢这些药。
即使你勉强弄溶了，也未必会增加有效和蛋白相互作用浓度。
【在 a*****v 的大作中提到】
: 如题
: 蛋白质溶于水溶液，但是药物只溶于Ethanol和DMSO， ACN。
: 然后我最低可以用50%ACN溶解该药物，
: 但是滴定到蛋白质溶液中立刻就沉淀了。
: 最终是要作蛋白质NMR，不能用有机溶剂让蛋白质变性阿。
: 而且该药物还是用于口服的药物，这是怎么起作用的呢？
: 碰到这种情况，大家怎么办呢？
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a*****v
发帖数: 128 | 16 polysorbate(PS)-80 (Tween 80)???
为什么用PS80，他比别的detergent有什么优势？
有文献这么用么？
浓度已经很低了...基本跟蛋白质的浓度差不多了，umol级别了
PS80
【在 d***e 的大作中提到】
: 能不能降低浓度？应该有个很低很低的浓度不会沉淀出来的。如果非要高浓度，用PS80
: 吧。
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a*****v
发帖数: 128 | 17 这个原理也考虑过，但是最终希望定量，所以希望知道溶解的浓度
溶解的那些部分，有些峰有split，应该是证明有相互作用了。
【在 s********x 的大作中提到】
: 如果本来就不溶，其实你用溶解的那部分做实验就可以了，反正也是一个固相液相的平
: 衡，因此用饱和溶液做实验不是一样的么？你的sample又不代谢这些药。
: 即使你勉强弄溶了，也未必会增加有效和蛋白相互作用浓度。
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