b**********8
发帖数: 349 | 1 能包装慢病毒的，knockdown效率高的，能否给个sequence和vector的信息？最近整这
个，用的plenti lox3.7，在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆
，转到293T里面，western blot发现都没效果，郁闷死了。 |
q******g
发帖数: 3858 | |
h******y
发帖数: 1374 | 3 为啥不直接买Open Biosystems的lenti shRNA
【在 b**********8 的大作中提到】
: 能包装慢病毒的，knockdown效率高的，能否给个sequence和vector的信息？最近整这
: 个，用的plenti lox3.7，在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆
: ，转到293T里面，western blot发现都没效果，郁闷死了。
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b**********8
发帖数: 349 | 4 谢谢关注，我们是参考公司网站公布的序列自己订的oligo回来退火克隆的，
【在 q******g 的大作中提到】
: 没效果可以退货
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b**********8
发帖数: 349 | 5 嗯，昨天跟boss讨论了下，认为这个钱还是要花的，准备买他家的那个shRNA set，用
的PLKO.1 vector，一个set里面5个克隆，就是想问问有谁用过这个吗？5个里面有几个
OK
？万一买回来都不行，退货倒是小事，关键是时间赔不起。【 在 hellowhy (夹死do
it) 的大作中提到: 】 |
q******g
发帖数: 3858 | 6 我用过。5个里面当时有两个比较好。但是，用PUROMYCIN筛选比较麻烦。
【在 b**********8 的大作中提到】
: 嗯，昨天跟boss讨论了下，认为这个钱还是要花的，准备买他家的那个shRNA set，用
: 的PLKO.1 vector，一个set里面5个克隆，就是想问问有谁用过这个吗？5个里面有几个
: OK
: ？万一买回来都不行，退货倒是小事，关键是时间赔不起。【 在 hellowhy (夹死do
: it) 的大作中提到: 】
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b**********8
发帖数: 349 | 7 实在是非常感谢你的回复。
只要有两个就够了，免得只有一个有效的话到时候reviewer又要提offtarget的问题了。
这下不犹豫了，直接买了。
【在 q******g 的大作中提到】
: 我用过。5个里面当时有两个比较好。但是，用PUROMYCIN筛选比较麻烦。
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u**********d
发帖数: 573 | 8 这个东西干掉以后细胞不会死吗？
【在 b**********8 的大作中提到】
: 能包装慢病毒的，knockdown效率高的，能否给个sequence和vector的信息？最近整这
: 个，用的plenti lox3.7，在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆
: ，转到293T里面，western blot发现都没效果，郁闷死了。
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