b**********8 发帖数: 349 | 1 能包装慢病毒的,knockdown效率高的,能否给个sequence和vector的信息?最近整这
个,用的plenti lox3.7,在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆
,转到293T里面,western blot发现都没效果,郁闷死了。 |
q******g 发帖数: 3858 | |
h******y 发帖数: 1374 | 3 为啥不直接买Open Biosystems的lenti shRNA
【在 b**********8 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 能包装慢病毒的,knockdown效率高的,能否给个sequence和vector的信息?最近整这 : 个,用的plenti lox3.7,在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆 : ,转到293T里面,western blot发现都没效果,郁闷死了。
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b**********8 发帖数: 349 | 4 谢谢关注,我们是参考公司网站公布的序列自己订的oligo回来退火克隆的,
【在 q******g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 没效果可以退货
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b**********8 发帖数: 349 | 5 嗯,昨天跟boss讨论了下,认为这个钱还是要花的,准备买他家的那个shRNA set,用
的PLKO.1 vector,一个set里面5个克隆,就是想问问有谁用过这个吗?5个里面有几个
OK
?万一买回来都不行,退货倒是小事,关键是时间赔不起。【 在 hellowhy (夹死do
it) 的大作中提到: 】 |
q******g 发帖数: 3858 | 6 我用过。5个里面当时有两个比较好。但是,用PUROMYCIN筛选比较麻烦。
【在 b**********8 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 嗯,昨天跟boss讨论了下,认为这个钱还是要花的,准备买他家的那个shRNA set,用 : 的PLKO.1 vector,一个set里面5个克隆,就是想问问有谁用过这个吗?5个里面有几个 : OK : ?万一买回来都不行,退货倒是小事,关键是时间赔不起。【 在 hellowhy (夹死do : it) 的大作中提到: 】
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b**********8 发帖数: 349 | 7 实在是非常感谢你的回复。
只要有两个就够了,免得只有一个有效的话到时候reviewer又要提offtarget的问题了。
这下不犹豫了,直接买了。
【在 q******g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我用过。5个里面当时有两个比较好。但是,用PUROMYCIN筛选比较麻烦。
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u**********d 发帖数: 573 | 8 这个东西干掉以后细胞不会死吗?
【在 b**********8 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 能包装慢病毒的,knockdown效率高的,能否给个sequence和vector的信息?最近整这 : 个,用的plenti lox3.7,在sigma的网站上抄了4条shRNA,买回来自己退火连接做克隆 : ,转到293T里面,western blot发现都没效果,郁闷死了。
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