l********s
发帖数: 70 | 1 我最近做chip，ip ct值还挺好的29-32 但是igG 信号比较高 31-33
我的input很稳定是在24徘徊。
不知道这个正常吗？ 话说igG 应该非常low，又看到有人做过说igG 大致是22-34ct是
这样吗？
不胜感激！ |
d****7
发帖数: 109 | 2 IP ct在29-32算低的，你确定你找的区域有binding？你用多少细胞per IP？
【在 l********s 的大作中提到】
: 我最近做chip，ip ct值还挺好的29-32 但是igG 信号比较高 31-33
: 我的input很稳定是在24徘徊。
: 不知道这个正常吗？ 话说igG 应该非常low，又看到有人做过说igG 大致是22-34ct是
: 这样吗？
: 不胜感激！
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l********s
发帖数: 70 | 3 我做的是tissue，至于具体多少细胞不敢确定，只能用input 来确定。 我觉得应该有
binding区域吧，histone的，很global的。 谢谢，
我是500ul lysis buffer 后 sonication，
然后吸出100ul lysate 再加900ul dilution buffer。
用agarose G洗过后，从1000ul 里抽出100ul 做IP， 100 做IgG 100做target。 别的
保存，不知道这样行吗？谢谢 |
k*****n
发帖数: 323 | 4 it is pretty low for regular histone ChIP.
anyway, it is hard to give you suggestion without the number of cell~ |
l********s
发帖数: 70 | 5 唉估计是为了省钱，加抗体才4ul。我太抠了，推荐加10-20 |
